用LipoD293?體外DNA轉染試劑(Ver.II)(上圖)和受歡迎的品牌產(chǎn)品Invitrogen公司的293fectin?(下圖)轉染pEGFP-C1質(zhì)粒到HEK293細胞中。轉染24小時后,細胞的尼康Eclipse熒光顯微鏡DIC成像圖(左側)和熒光成像圖(右側)。對懸浮HEK293F產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較30毫升的293F細胞分別使用LipoD293?試劑、293fectin、Xfect和Fugene6等轉染試劑按照生產(chǎn)商的標準轉染步驟將pEGFP-6xHis質(zhì)粒導入細胞表達,用量為LipoD293?試劑,20微克,所有其他三種轉染試劑均使用30微克質(zhì)粒DNA。世界上低價的細胞轉染試劑PEI,這里有**詳細的操作步驟!上海體內(nèi)轉染試劑購買
轉染是將外源核酸導入真核細胞的過程,是細胞和分子生物學研究的重要工具,也是大部分的生物和分子生物領域的科研黨們繞不開的話題。然而常常聽到的抱怨是"轉染效率太低""轉染完細胞全漂了""轉染后忘記給細胞換液了",真所謂辛辛苦苦實驗N多回,一夜回到解放前……眾所周知,影響轉染成功的因素非常多,包括細胞質(zhì)量、核酸質(zhì)量、微生物污染、轉染試劑等。各種細胞使用的轉染條件都可能不同,現(xiàn)實中也并沒有一種放之四海而皆準的方案。上海懸浮細胞轉染試劑對照給你選擇CycloFect轉染試劑的五大理由!
簡介:X-tremeGENEHPDNA轉染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉染試劑,兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,可用于轉染各類真核細胞(包括昆蟲細胞)以及多種難轉染細胞系。優(yōu)勢:1.簡單易用的多組分混合試劑,無動物源性成分,室溫穩(wěn)定。2.高轉染效率,對于原代細胞和使用其它試劑難轉染的**細胞系有高轉染效率。3.使用細胞毒性低的試劑,結果相關性好。圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉染性能。通過X-tremeGENEHP和脂質(zhì)體轉染方法將GFP表達質(zhì)粒轉染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實驗后兩種方法均獲得了成功轉染的細胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉染方法的細胞毒性遠高于X-tremeGENEHP,導致存活細胞量減少(圖片來源于網(wǎng)絡)...
LipoFectMax?轉染試劑LipoFectMax?轉染試劑具有以下幾個優(yōu)點:高轉染效率,適用于多種細胞系對細胞毒性低適用于DNA和RNA的轉染轉染前無需去除細胞培養(yǎng)基或血清轉染后無需清洗細胞或更換培養(yǎng)基轉染效率高,適用于多種細胞系圖1.LipoFectMax?轉染試劑以綠色熒光蛋白(GFP)表達質(zhì)粒轉染幾種常見細胞系,通過檢測GFP信號比較轉染效率。細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉染操作,通過計算轉染后的細胞存活率比較細胞毒性。原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖.
原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖。因此,它們的形態(tài)學和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉染。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命(即它們是有限細胞系),且隨著傳代的進行,具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據(jù)支配地位,從而造成了細胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對來說,這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便,尤其是穩(wěn)定轉染的克隆傳代。 .0試劑及RNAi復合物非常容易獲得:只需簡單地混合,并進行孵育(30min)、稀釋、及注射即可。非脂質(zhì)體轉染試劑選購
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用LipoFectMax?轉染Hela細胞,左圖轉染GFP cDNA,右圖共轉染GFP CDNA和GFP靶向siRNA。轉染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默。
4適用于神經(jīng)細胞的轉染圖4. 用LipoFectMax? 和LipoFectamine®2000分別對小鼠神經(jīng)元細胞進行轉染綠色熒光白蛋白(GFP),轉染24小時后觀察轉染效果,LipoFectMax? 轉染效率(左圖)比LipoFectamine®2000(右圖)高5倍。
LipoFectMax? 轉染試劑轉染試劑操作流程
細胞毒性低圖2.LipoFectMax? ,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉染操作,通過計算轉染后的細胞存活率比較細胞毒性。 上海體內(nèi)轉染試劑購買
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