病毒轉(zhuǎn)染試劑配方

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-06-04

Lipofectamine RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑是先進(jìn)、高效的siRNA輸送解決方案。目前尚無(wú)其他siRNA轉(zhuǎn)染試劑能夠在***的細(xì)胞系中(包括常見(jiàn)細(xì)胞類(lèi)型、干細(xì)胞、原代細(xì)胞以及歷來(lái)難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類(lèi)型)提供如此簡(jiǎn)便、高效的siRNA輸送效果。

高效

可在低siRNA濃度下獲得優(yōu)良的轉(zhuǎn)染效果

相對(duì)于其他的siRNA轉(zhuǎn)染試劑,Lipofectamine RNAiMAX 轉(zhuǎn)染試劑可以獲得更佳的基因***效果。同在10 nM和1 nM p53 siRNA下,Lipofectamine RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑實(shí)現(xiàn)了更高的有效***細(xì)胞/未轉(zhuǎn)染細(xì)胞比率,超過(guò)其他RNAi試劑。 研發(fā)合成的針對(duì)siRNA、microRNA、mimic、inhibitor、mRNA和shRNA等RNA的轉(zhuǎn)染試劑。病毒轉(zhuǎn)染試劑配方

基于陽(yáng)離子聚合物的轉(zhuǎn)染試劑,帶正電的聚合物與核酸帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成帶正電的復(fù)合物后與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用,并通過(guò)內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞。其又分為樹(shù)枝狀陽(yáng)離子聚合物和線(xiàn)性陽(yáng)離子聚合物兩類(lèi),前者細(xì)胞毒性相對(duì)較大,后者細(xì)胞毒性較小,但其轉(zhuǎn)染效率都高于脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染,適用也較為廣范。以上單一成分的轉(zhuǎn)染試劑或聚焦于提高效率或著重于降低細(xì)胞毒性,可謂魚(yú)和熊掌不可兼得也。新一代轉(zhuǎn)染試劑,不局限于單一成分,混合了不同 配方的脂類(lèi)(非脂質(zhì)體)、加上蛋白質(zhì)組分、以及各種的 成分,兼具了轉(zhuǎn)染效率高和細(xì)胞毒性小的優(yōu)勢(shì),且操作更加簡(jiǎn)單,易于高通量。上海蛋白轉(zhuǎn)染試劑作用從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。

確定希望輸送的運(yùn)載物

(如DNA、RNA或蛋白質(zhì))

根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)類(lèi)型,我們可能需要將不同的運(yùn)載物輸送到細(xì)胞內(nèi)部,包括**常見(jiàn)的DNA,用于基因編輯的siRNA,能夠更快表達(dá)蛋白的mRNA,CRISPR-Cas9甚至是體內(nèi)轉(zhuǎn)染。正確的了解您希望輸送的運(yùn)載物是選擇可靠轉(zhuǎn)染產(chǎn)品的第一步。

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希望轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類(lèi)型

轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類(lèi)型可簡(jiǎn)單分為兩大類(lèi),連續(xù)細(xì)胞系和原代細(xì)胞。

連續(xù)細(xì)胞系具有無(wú)限增殖的潛能,通常要比原代或有限細(xì)胞更易處理。但由于此類(lèi)細(xì)胞經(jīng)歷過(guò)基因改變而變得具有無(wú)限增殖能力,它們?cè)谂囵B(yǎng)過(guò)程中的表現(xiàn)可能無(wú)法必然地反映體內(nèi)狀態(tài)。

用于轉(zhuǎn)染的Invivofectamine 3.0試劑及RNAi復(fù)合物非常容易獲得:只需簡(jiǎn)單地混合,并進(jìn)行孵育(30min)、稀釋、及注射即可。

靶向敲低

在實(shí)驗(yàn)靶標(biāo)中可觀察到高達(dá)85%的敲低效果

使用Invivofectamine 3.0試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實(shí)現(xiàn)靶向敲低。Invivofectamine 3.0試劑與靶向Factor VII (FVII)或PPIB mRNA的siRNA組成的復(fù)合物,以每千克小鼠體重1 mg(mg/kg)的注射量進(jìn)行注射,**終靶向mRNA水平出現(xiàn)了高達(dá)85%的敲低(使用TaqMan分析對(duì)敲低進(jìn)行評(píng)估)。 質(zhì)粒細(xì)胞轉(zhuǎn)染步驟是什么?

圖2.采用LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞時(shí),實(shí)現(xiàn)了比較好的基因***效果和比較低的細(xì)胞毒性。試驗(yàn)采用的LipofectamineRNAiMAX試劑劑量范圍為0.1μL-1.0μL之間,在維持優(yōu)良的細(xì)胞活力的同時(shí),實(shí)現(xiàn)了p53基因表達(dá)水平的有效敲低.功能多樣簡(jiǎn)便的實(shí)驗(yàn)方案,易于針對(duì)***的細(xì)胞系進(jìn)行優(yōu)化Invivofectamine?3.0Reagent突破性的體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑Invivofectamine3.0試劑是一種突破性的體內(nèi)RNAi輸送試劑,可大幅改善實(shí)驗(yàn)性能,使用微克級(jí)的siRNA即可達(dá)到高達(dá)85%的敲低效果。正確的了解您希望輸送的運(yùn)載物是選擇可靠轉(zhuǎn)染產(chǎn)品的第一步。動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑原理

細(xì)胞轉(zhuǎn)染必備——高效低毒轉(zhuǎn)染試劑.病毒轉(zhuǎn)染試劑配方

原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖,因此,它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對(duì)于連續(xù)細(xì)胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過(guò)***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細(xì)胞系具有有限的壽命(即它們是有限細(xì)胞系),且隨著傳代的進(jìn)行,具有比較高的生長(zhǎng)能力的細(xì)胞逐漸占據(jù)支配地位,從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對(duì)來(lái)說(shuō),這一類(lèi)細(xì)胞要比原代細(xì)胞使用起來(lái)更為方便,尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。病毒轉(zhuǎn)染試劑配方

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