成都心臟成纖維細(xì)胞增殖檢測(cè)

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2021-09-01

上海儒安生物科技有限公司封閉液貨號(hào):R52-412A規(guī)格:500ml價(jià)格/元:120產(chǎn)品簡(jiǎn)介:Western封閉液,可以用于Western時(shí)轉(zhuǎn)移后的蛋白樣品的PVDF膜或NC膜的封閉。封閉后,可以減小后續(xù)的一抗或二抗和膜的非特異性結(jié)合,降低背景,增強(qiáng)信噪比。按照每張膜封閉需要5-10毫升封閉液計(jì)算,一個(gè)包裝的Western封閉液可以封閉10-20張膜。產(chǎn)品說(shuō)明完成轉(zhuǎn)膜后,用Western洗滌液洗滌蛋白膜1-2分鐘。加入Western封閉液,封閉60分鐘,然后進(jìn)行一抗孵育等后續(xù)操作。CCK-8的檢測(cè)操作更簡(jiǎn)單,無(wú)需有機(jī)溶劑.成都心臟成纖維細(xì)胞增殖檢測(cè)

內(nèi)參抗體

Anti MBP-Tag Mouse mAb


1.產(chǎn)品簡(jiǎn)介

    麥芽糖結(jié)合蛋白(Maltose binding protein, MBP)是非常有用的親和標(biāo)簽,可提高M(jìn)BP標(biāo)簽融合蛋白的表達(dá)量和可溶性。它能促進(jìn)融合蛋白的正確折疊,也能阻止不溶性蛋白(包涵體)的形成。本抗體可用于MBP標(biāo)簽融合蛋白的檢測(cè)。

2.產(chǎn)品特點(diǎn)

?用于WB實(shí)驗(yàn),性?xún)r(jià)比高,推薦稀釋比例為1:1000 - 1:10000

?常備現(xiàn)貨Anti GST-Tag Mouse mAb


1.產(chǎn)品簡(jiǎn)介

    Anti GST-tag mouse mAb是常用的標(biāo)簽抗體。本抗體可在純化及將具有高度敏感性,可用于GST標(biāo)簽融合蛋白的檢測(cè),能識(shí)別重組蛋白C端、N端和內(nèi)部的GST標(biāo)簽。

2.產(chǎn)品特點(diǎn)

?用于WB實(shí)驗(yàn),性?xún)r(jià)比高,推薦稀釋比例為1:1000 - 1:10000

?常備現(xiàn)貨 血管平滑肌細(xì)胞增殖試劑盒細(xì)胞增殖是生物體的重要生命特征,細(xì)胞以分裂的方式進(jìn)行增殖。

Q:在做刺激實(shí)驗(yàn)時(shí),對(duì)測(cè)定是否有影響?

A:如果有還原性,則會(huì)與CCK-8發(fā)生反應(yīng),影響吸光度;金屬離子的存在可能會(huì)影響CCK-8的靈敏度。終濃度為1 mM 的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會(huì)5% 、15% 、90%的顯色反應(yīng),使靈敏度降低。如果終濃度是10 mM 的話(huà)。

Q:如果吸光度值太低,可以采取什么辦法?

A:適當(dāng)增加細(xì)胞數(shù)量或延長(zhǎng)加入CCK-8溶液后的孵育時(shí)間。

Q:如果吸光度值太高,可以采取什么辦法?

A:適當(dāng)減少細(xì)胞數(shù)量(建議正式實(shí)驗(yàn)前優(yōu)化細(xì)胞數(shù)量與熒光值之間的關(guān)系)或縮短加入CCK-8溶液后的孵育時(shí)間。

Cell Counting Kit-8(CCK-8試劑盒)是由日本同仁化學(xué)研究所(Dojindo)開(kāi)發(fā)的檢測(cè)細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性的試劑盒,為MTT法的替代方法,試劑盒中采用自己開(kāi)發(fā)的水溶性四唑鹽-WST-8,在日本,美國(guó),歐洲等國(guó)家地區(qū)均持有**,同仁化學(xué)研究所于2006年在中國(guó)獲得了WST-8的注冊(cè)商標(biāo)。

CCK-8法與普通的MTT法相比,具有特點(diǎn):

★靈敏度高,數(shù)據(jù)可靠,重現(xiàn)性好

★操作簡(jiǎn)便,省時(shí)省力

★水溶性,不需要換液,尤其適合于懸浮細(xì)胞

★無(wú)需放射性同位素和有機(jī)溶劑,對(duì)細(xì)胞毒性低

★為1瓶溶液,毋需預(yù)制,即開(kāi)即用

★適合于高通量篩選

CCK-8用途:篩選、細(xì)胞增殖測(cè)定、細(xì)胞毒性測(cè)定、藥敏試驗(yàn)

CCK-8試劑盒在國(guó)內(nèi)**科研院所、重點(diǎn)大學(xué)、三甲醫(yī)院被廣泛應(yīng)用,國(guó)際認(rèn)可度高,使用CCK-8發(fā)表的中外文獻(xiàn)達(dá)600多篇,其中截止08年底SCI影響因子IF>10分的論文有37篇,比較高IF26.5分。 機(jī)體創(chuàng)傷愈合、組織再生、病理組織修復(fù)等,都要依賴(lài)細(xì) 胞增殖。

Cell Counting Kit-8(cck8)細(xì)胞增值與毒性檢測(cè)試劑盒是一種基于水溶性四唑鹽的細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒。它在電子耦合試劑1-Methoxy PMS存在的情況下,可以被線(xiàn)粒體內(nèi)的脫氫酶還原為可溶性的橙黃色甲臜(formazan)。甲臜的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。細(xì)胞增殖越快、細(xì)胞毒性越小、細(xì)胞數(shù)量越多,則顏色越深,顏色的深淺與細(xì)胞數(shù)量呈現(xiàn)良好的線(xiàn)性關(guān)系。該產(chǎn)品細(xì)胞毒性小,對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)沒(méi)有影響,與MTT,XTT,MTS和WST-1相比,此法檢測(cè)靈敏度更高,線(xiàn)性范圍更寬,適用于***篩選,細(xì)胞增殖測(cè)定,細(xì)胞毒性測(cè)定和**藥敏實(shí)驗(yàn)。 CCK-8是非放射性的,允許敏感的比色分析來(lái)測(cè)定細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性分析中的活細(xì)胞數(shù)量。

  比MTT、MTS或WST-1更敏感對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性簡(jiǎn)單步驟(無(wú)需解凍) ,操作更安全。 細(xì)胞分裂的前期,明顯的變化是細(xì)胞核中出現(xiàn)染色體。武漢mts檢測(cè)細(xì)胞增殖

細(xì)胞增殖的技術(shù)難點(diǎn)。成都心臟成纖維細(xì)胞增殖檢測(cè)

檢測(cè)波長(zhǎng)450-490nm,參比波長(zhǎng)600-650nm。實(shí)驗(yàn)二:細(xì)胞毒性分析1、制備細(xì)胞懸液:細(xì)胞計(jì)數(shù)2、接種到96孔板中:根據(jù)合適的鋪板細(xì)胞數(shù),每孔約100ul細(xì)胞懸液,同樣的樣本可做3個(gè)重復(fù)。3、37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng):細(xì)胞接種后貼壁大約需要培養(yǎng)2-4小時(shí),如果不需要貼壁,這步可以省去。4、加入不同濃度的毒性物質(zhì)5、37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng):加入毒性物質(zhì)的培養(yǎng)時(shí)間,要看毒性物質(zhì)的性質(zhì)和細(xì)胞的敏感性,一般要根據(jù)細(xì)胞周期來(lái)決定,起碼要一代以上的時(shí)間。6、加入10ulCCK8:由于每孔加入CCK8量比較少,有可能因試劑沾在孔壁上而帶來(lái)誤差,建議在加完試劑后輕輕敲擊培養(yǎng)板以幫助混勻。7、培養(yǎng)1-4小時(shí):細(xì)胞種類(lèi)不同,形成的Formazan的量也不一樣。如果顯色不夠的話(huà),可以繼續(xù)培養(yǎng),以確認(rèn)比較好條件。特別是血液細(xì)胞形成的Formazan很少,需要較長(zhǎng)的顯色時(shí)間(5-6小時(shí))。8、測(cè)定450nm吸光度:建議采用雙波長(zhǎng)進(jìn)行測(cè)定,檢測(cè)波長(zhǎng)450-490nm,參比波長(zhǎng)600-650nm。注:若暫時(shí)不測(cè)定OD值,可以向每孔中加入10μLw/vSDS溶液,并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。24小時(shí)內(nèi)測(cè)定,吸光度不會(huì)發(fā)生變化。如果待測(cè)物質(zhì)有氧化性或還原性的話(huà),可在加CCK8之前更換新鮮培養(yǎng)基(除去培養(yǎng)基。成都心臟成纖維細(xì)胞增殖檢測(cè)

上海儒安生物科技有限公司位于真南路4268號(hào)2幢J1718室,擁有一支專(zhuān)業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)。致力于創(chuàng)造***的產(chǎn)品與服務(wù),以誠(chéng)信、敬業(yè)、進(jìn)取為宗旨,以建上海儒安生物產(chǎn)品為目標(biāo),努力打造成為同行業(yè)中具有影響力的企業(yè)。公司以用心服務(wù)為重點(diǎn)價(jià)值,希望通過(guò)我們的專(zhuān)業(yè)水平和不懈努力,將從事生物技術(shù)、物聯(lián)網(wǎng)技術(shù)、網(wǎng)絡(luò)技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)咨詢(xún)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)服務(wù),軟件開(kāi)發(fā),電子商務(wù)(不得從事增值電信、金融業(yè)務(wù)),化工產(chǎn)品及原料(除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、民用物品、易制毒化學(xué)品)、實(shí)驗(yàn)窒設(shè)備的銷(xiāo)售。等業(yè)務(wù)進(jìn)行到底。自公司成立以來(lái),一直秉承“以質(zhì)量求生存,以信譽(yù)求發(fā)展”的經(jīng)營(yíng)理念,始終堅(jiān)持以客戶(hù)的需求和滿(mǎn)意為重點(diǎn),為客戶(hù)提供良好的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細(xì)胞增殖,內(nèi)參抗體,從而使公司不斷發(fā)展壯大。