上海楚知代理的常州天地人和試劑,GST(標(biāo)簽)蛋白親和純化產(chǎn)品可以純化各種表達(dá)系統(tǒng)融合表達(dá)的谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶的目的蛋白,谷胱甘肽依賴性蛋白和谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶的重組衍生物,Glutathione Beads ,Glutathione Beads 4FF 是通過12個(gè)原子的間隔臂,用化學(xué)方法共價(jià)結(jié)合了還原型谷胱甘肽制作而成,這種特別涉及使樹脂的純化效率得到了提高, GSTPur Glutathione Kit提供了3ml Glutathione Beads重力預(yù)裝柱,GST標(biāo)簽蛋白純化所需的緩沖液,方便客戶使用,操作簡單,純化率高預(yù)制膠的使用注意事項(xiàng)。河南定制試劑規(guī)格 抗體純化磁珠 1.抗體...
蛋白純化試劑,上海楚知生物代理天地人和,1.產(chǎn)品介紹NiIDABeads可以用于各種表達(dá)來源(如大腸桿菌、酵母、昆蟲細(xì)胞和哺乳動(dòng)物細(xì)胞)的組氨酸標(biāo)簽(6xHis-tagged)蛋白的純化。它是以4%瓊脂糖凝膠為基質(zhì),通過化學(xué)方法偶聯(lián)了三配位的亞氨基二乙酸(IDA),螯合鎳離子(Ni2+)后,可以形成比較穩(wěn)定的平面四邊形結(jié)構(gòu),從而有更多的位點(diǎn)與組氨酸標(biāo)簽上的咪唑環(huán)繼續(xù)配位,達(dá)到結(jié)合目的蛋白的效果(產(chǎn)品化學(xué)結(jié)構(gòu)見圖1所示)。但是,這樣的結(jié)構(gòu)比較容易受到其他小分子的進(jìn)攻,鎳離子易被還原或者被螯合,從而破壞其化學(xué)結(jié)構(gòu),無法結(jié)合目的蛋白。NiIDABeads具有載量高,性價(jià)比高的優(yōu)點(diǎn)GFP標(biāo)簽蛋白的表達(dá)...
上海楚知生物科技有限公司是一家專注于生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)儀器、試劑和耗材的一站式服務(wù)公司。致力于為高校、科研院所和企業(yè)等系統(tǒng)客戶提供完整的解決方案和售后服務(wù)。 其代理的蛋白純化試劑常州天地人和,常州天地人和生物科技有限公司公司坐落于經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)的長三角重心城市-----美麗的龍城常州市,受到**產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)型、升級換代政策支持的****。公司擁有具有國際視野的研發(fā)團(tuán)隊(duì),經(jīng)驗(yàn)豐富的生產(chǎn)團(tuán)隊(duì)和技術(shù)支持團(tuán)隊(duì)。常州天地人和生物(Smart-Lifesciences)是一家專業(yè)于生物填料研發(fā)、生產(chǎn)及銷售的****。公司受到了江蘇省和常州**的大力支持,并榮獲''江蘇省雙創(chuàng)企業(yè)”、"龍城英才“等殊榮。上海楚知生物致...
蛋白質(zhì)純化注意事項(xiàng):在進(jìn)行任何一種蛋白質(zhì)純化的時(shí)候,都要時(shí)刻注意維護(hù)它的穩(wěn)定性,保護(hù)它的活性,有一些通用的注意事項(xiàng)需要牢記,它們包括:1、操作盡可能置于冰上或者在冷庫內(nèi)進(jìn)行。2、不要太稀,蛋白濃度維持在μg/mL~mg/mL。3、合適的pH,除非是進(jìn)行聚焦層析,所使用的緩沖溶液pH避免與pI相同,防止蛋白質(zhì)的沉淀。4、使用蛋白酶抑制劑,防止蛋白酶對目標(biāo)蛋白的降解;在純化細(xì)胞中的蛋白質(zhì)時(shí),加入DNA酶,降解DNA,防止DNA對蛋白的污染。5、避免樣品反復(fù)凍融和劇烈攪動(dòng),以防蛋白質(zhì)的變性。6、緩沖溶液成分盡量模擬細(xì)胞內(nèi)環(huán)境。7、在緩沖溶液中加入0.1~1mmol/LDTT(二硫蘇糖醇)(或β-巰基...
蛋白純化試劑NiSmartBeads是一種新型IMAC填料,螯合有非常牢固的Ni離子,具體性能見表1。NiSmartBeads主要應(yīng)用于分泌到真核培養(yǎng)液上清中的組氨酸標(biāo)記蛋白的捕獲和純化,可以在含有EDTA及DTT的情況下進(jìn)行目的蛋白高效的純化。NiSmartBeads有很強(qiáng)的組分兼容性,適用于***底物及鹽濃度的緩沖條件2.純化流程2.1緩沖液的準(zhǔn)備可使用下列推薦緩沖液,也可根據(jù)自己的使用習(xí)慣配置不同的緩沖液體系,基本原理就是低咪唑上樣,高咪唑洗脫,或者高pH上樣,低pH洗脫。緩沖液在使用前比較好用0.22μm或者0.45μm濾膜過濾除菌。常州天地人和試劑經(jīng)銷商。河南多肽試劑哪種品牌好蛋白純...
生物試劑試劑的取用規(guī)則 , 固體粉末試劑可用潔凈的牛角勺取用。要取一定量的固體時(shí),可把固體放在紙上或表面皿上在臺秤上稱量。要準(zhǔn)確稱量時(shí),則用稱量瓶在天平上進(jìn)行稱量。液體試劑常用量筒量取,量筒的容量為:5mL、10mL、50mL、500mL等數(shù)種,使用時(shí)要把量取的液體注入量筒中,使視線與量筒內(nèi)液體凹面的比較低處保持水平,然后讀出量筒上的刻度,即得液體的體積。 如需少量液體試劑則可用滴管取用,取用時(shí)應(yīng)注意不要將滴管碰到或插入接收容器的壁上或里面。 為了達(dá)到準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,取用試劑時(shí)應(yīng)遵守以下規(guī)則,以保證試劑不受污染和不變質(zhì): (1)試劑不能與手接觸。 (2)要用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,**...
蛋白純化試劑產(chǎn)品介紹,Strep-tag是一種在蛋白純化系統(tǒng)中應(yīng)用***的親和標(biāo)簽。它包括兩種類型Strep-tagII和TwinStrep-tagII。Strep-tagII是一個(gè)短肽標(biāo)簽,由8個(gè)氨基酸(WSHPQFEK)組成,可以作為N端或C端標(biāo)簽與蛋白質(zhì)融合,對重組蛋白的影響很小。進(jìn)一步改進(jìn)的TwinStrep-tagII是一個(gè)順序排列的兩個(gè)Strep-tagII序列(通過內(nèi)部氨基酸連接),該標(biāo)簽?zāi)軌蛳馭trep-tagII一樣進(jìn)行溫和、快速的純化。這兩個(gè)標(biāo)簽可以自由結(jié)合Streptactin和STarmSterptactin中的任一配體。標(biāo)簽/配體的結(jié)合取決于所需的結(jié)合強(qiáng)度和應(yīng)用。這兩...
rProteinA/GBeads4FF是將rProteinA/G高密度定向偶聯(lián)到高度交聯(lián)的瓊脂糖凝膠微球表面,該產(chǎn)品具有更高的抗體結(jié)合能力和較低的蛋白非特異吸附率,洗脫條件更均一,一步純化即可從血清樣品中分離出純度大于90%的抗體。產(chǎn)品性能見表1。本產(chǎn)品主要用于免疫沉淀(IP)以及免疫共沉淀(Co-IP)研究,也可用于抗體固定及其它相關(guān)研究。用戶可根據(jù)目標(biāo)抗體的種屬來源及亞型選擇微球的類別,純化流程本產(chǎn)品主要應(yīng)用于免疫沉淀(IP)以及免疫共沉淀(Co-IP)研究。2.1緩沖液的準(zhǔn)備所用水和緩沖液在使用之前建議用0.22μm或0.45μm濾膜過濾。平衡/洗雜液:0.15MNaCl,20mMNa2...
上海楚知生物蛋白純化試劑,DYKDDDDK(Flag)標(biāo)簽是由8個(gè)氨基酸組成的短肽,親水性強(qiáng),不會占據(jù)其他表位與結(jié)合域,因此更易與抗體結(jié)合。Anti-DYKDDDDKAntibody為小鼠IgG2B重組單克隆抗體,能特異性識別融合蛋白N端、C端的DYKDDDDK標(biāo)簽,***用于融合蛋白的純化、檢測和鑒定??贵w來源:小鼠交叉反應(yīng):DYKDDDDK標(biāo)簽融合蛋白克隆類型:單克隆抗體亞型:IgG2B來源:293細(xì)胞表達(dá)的重組抗體純化方式:rProteinA親和純化產(chǎn)品純度:≥95%,SDS-PAGE檢測儲存緩沖液:1×PBS(pH7.4),0.02%疊氮鈉,50%甘油儲存條件:干冰運(yùn)輸,-20℃可保存...
蛋白純化試劑抗體純化rProtein A/G Beads 4FF純化流程,樣品準(zhǔn)備上柱之前要確保樣品溶液有合適的離子強(qiáng)度和pH值,可以用平衡/洗雜液對血清樣品、腹水或細(xì)胞培養(yǎng)液稀釋,或者樣品用平衡/洗雜液透析。對于100mm培養(yǎng)皿中的貼壁細(xì)胞,吸除細(xì)胞培養(yǎng)液,使用預(yù)冷PBS洗滌一次后加入2ml細(xì)胞裂解液裂解細(xì)胞。對于懸浮細(xì)胞,離心收集細(xì)胞后,PBS洗滌一次后參考貼壁細(xì)胞的裂解方法進(jìn)行裂解。植物或動(dòng)物組織樣品可以使用液氮研磨方法裂解。具體的裂解方法請參考不同裂解液的使用說明,裂解液**終總蛋白濃度選擇在0.5-1μg/μl范圍內(nèi)較為合適。通常針對目標(biāo)蛋白的表達(dá)量不同,需要對總蛋白濃度進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)調(diào)...
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細(xì)菌被***用于表達(dá)不同的蛋白質(zhì)。然而,通過重組技術(shù)在細(xì)菌中表達(dá)的70-80%的蛋白通常包含在不溶性包涵體中(即蛋白質(zhì)聚集體)中。由于折疊錯(cuò)誤,在這些亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)中發(fā)現(xiàn)的蛋白質(zhì)通常是無活性的。包涵體中重組蛋白的產(chǎn)率始終高于可溶性蛋白。這背后的原因被認(rèn)為是不溶性蛋白質(zhì)對細(xì)胞酶的蛋白水解的抗性。此外,不溶性重組蛋白在包涵體中的分離要比可溶性蛋白容易得多。這些因素有利于使用細(xì)菌發(fā)酵來擴(kuò)大高價(jià)值蛋白質(zhì)的獲取。什么是包涵體?重組蛋白在宿主系統(tǒng)中高水平表達(dá)時(shí),很容易形成不可溶、無生物活性的蛋白聚集體--包涵體。包涵體須經(jīng)過變性溶解后,在適當(dāng)條件下復(fù)性形成天然的構(gòu)象,才能得到有生物活性蛋白。目前,大腸...
純化試劑篇1:分離純化某一特定蛋白質(zhì)的一般程序可以分為前處理、粗分級、細(xì)分級三步。前處理分離純化某種蛋白質(zhì),首先要把蛋白質(zhì)從原來的組織或細(xì)胞中以溶解的狀態(tài)釋放出來并保持原來的天然狀態(tài),不丟失生物活性。為此,動(dòng)物材料應(yīng)先剔除結(jié)締組織和脂肪組織,種子材料應(yīng)先去殼甚至去種皮以免受單寧等物質(zhì)的污染,油料種子比較好先用低沸點(diǎn)的有機(jī)溶劑如**等脫脂。然后根據(jù)不同的情況,選擇適當(dāng)?shù)姆椒?,將組織和細(xì)胞破碎。動(dòng)物組織和細(xì)胞可用電動(dòng)搗碎機(jī)或勻漿機(jī)破碎或用超聲波處理破碎。植物組織和細(xì)胞由于具有纖維素、半纖維素和果膠等物質(zhì)組成的細(xì)胞壁,一般需要用石英砂或玻璃粉和適當(dāng)?shù)奶崛∫阂黄鹧心サ姆椒ɑ蛴美w維素酶處理也能達(dá)到目的。...
上海楚知生物蛋白純化試劑產(chǎn)品介紹:c-Myc蛋白含有bHLH結(jié)構(gòu)域,該蛋白在正常機(jī)體發(fā)育和**發(fā)生過程中起著非常重要的作用,c-Myc是一個(gè)重要的轉(zhuǎn)錄因子,其異常表達(dá)能促進(jìn)多種**的的發(fā)生和發(fā)展。將人p62c-Myc蛋白的410-419這段氨基酸序列(EQKLISEEDL)融合至目的蛋白的N端或者是C端,可以對目的蛋白進(jìn)行準(zhǔn)確的檢測、定位和純化??贵w來源:小鼠交叉反應(yīng):c-Myc標(biāo)簽融合蛋白克隆類型:單克隆抗體亞型:IgG2A來源:293細(xì)胞表達(dá)的重組抗體純化方式:rProteinA親和純化產(chǎn)品純度:≥95%,SDS-PAGE檢測儲存緩沖液:1×PBS(pH7.4),0.02%疊氮鈉,50%甘...
蛋白純化方法有幾種?4。疏水相互作用層析。依據(jù)生物分子間疏水性差別實(shí)現(xiàn)分離的一種層析方式。高離子強(qiáng)度下,增進(jìn)蛋白質(zhì)中的疏水性氨基酸與層析介質(zhì)間的疏水性相互作用,削弱其靜電作用力。洗脫時(shí),降低流動(dòng)相離子強(qiáng)度,削弱蛋白質(zhì)分子與層析介質(zhì)間的疏水作用,實(shí)現(xiàn)目的蛋白的純化和收集。疏水作用層析也屬于吸附性分離方式,對具有疏水特性的目的蛋白具有高選擇性和濃縮等特點(diǎn)。5。反相層析技術(shù)。 買蛋白純化填料選上海楚知生物天地人和純化試劑較低的蛋白非特異性吸附。湖南天地人和試劑代理銷售價(jià)格試劑篇3:細(xì)分離樣品經(jīng)粗分級分離以后,一般體積較小,雜蛋白大部分已被除去。進(jìn)一步純化,一般使用層析法包括凝膠過濾、離子交換層析、...
抗體純化磁珠 1.抗體純化磁珠試劑盒是否可以重復(fù)使用? 答:不推薦重復(fù)使用,不同樣本之間容易造成污染。 2.若體系中含有木瓜蛋白酶,是否影響磁珠的使用? 答:木瓜蛋白酶是一種蛋白水解酶,目前對protein A的影響未知,建議客戶慎用。 3.1mL抗體純化磁珠能夠用多少次? 答:1mL磁珠能夠結(jié)合1.5-2.0mg抗體,客戶需要根據(jù)結(jié)合抗體的量來確定使用磁珠的量。 4.試劑盒中的緩沖液用完后,能否告知配方? 答:試劑盒中緩沖液的成分都是保密的??梢圆捎靡韵碌木彌_液進(jìn)行替代。 結(jié)合緩沖液:PBST 150mM PBS,150mM NaCl,0.1% (v/v) Tween-20,pH7.2 ...
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細(xì)菌被***用于表達(dá)不同的蛋白質(zhì)。然而,通過重組技術(shù)在細(xì)菌中表達(dá)的70-80%的蛋白通常包含在不溶性包涵體中(即蛋白質(zhì)聚集體)中。由于折疊錯(cuò)誤,在這些亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)中發(fā)現(xiàn)的蛋白質(zhì)通常是無活性的。包涵體中重組蛋白的產(chǎn)率始終高于可溶性蛋白。這背后的原因被認(rèn)為是不溶性蛋白質(zhì)對細(xì)胞酶的蛋白水解的抗性。此外,不溶性重組蛋白在包涵體中的分離要比可溶性蛋白容易得多。這些因素有利于使用細(xì)菌發(fā)酵來擴(kuò)大高價(jià)值蛋白質(zhì)的獲取。什么是包涵體?重組蛋白在宿主系統(tǒng)中高水平表達(dá)時(shí),很容易形成不可溶、無生物活性的蛋白聚集體--包涵體。包涵體須經(jīng)過變性溶解后,在適當(dāng)條件下復(fù)性形成天然的構(gòu)象,才能得到有生物活性蛋白。目前,大腸...
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蛋白純化試劑純化流程5)依次使用3倍柱體積的平衡液和5倍柱體積的去離子水平衡填料,***再用5倍柱體積的20%的乙醇平衡,然后保存在等體積的20%的乙醇中,置于4-30°C保存,防止填料被細(xì)菌污染。2.4SDS-PAGE檢測將使用純化產(chǎn)品得到的樣品(包括流出組分、洗雜組分和洗脫組分)以及原始樣品使用SDS-PAGE檢測純化效果。3.在位清洗當(dāng)填料使用過程中發(fā)現(xiàn)反壓過高或者填料上面出現(xiàn)明顯的污染時(shí),需要進(jìn)行在位清洗操作(Cleaning-in-Place,CIP)。建議按照下面操作去除填料上殘留的污染物,如沉淀蛋白、疏水蛋白和脂蛋白等。去除強(qiáng)疏水結(jié)合的蛋白,脂蛋白和脂類通過使用30%異丙醇清洗5...
市場上尚有:基準(zhǔn)試劑(PT:Primary Reagent):專門作為基準(zhǔn)物用,可直接配制標(biāo)準(zhǔn)溶液。光譜純試劑(SP:Spectrum pure):表示光譜純凈。但由于有機(jī)物在光譜上顯示不出,所以有時(shí)主成分達(dá)不到99.9%以上,使用時(shí)必須注意,特別是作基準(zhǔn)物時(shí),必須進(jìn)行標(biāo)定。純度遠(yuǎn)高于優(yōu)級純的試劑叫做高純試劑(≥ 99.99%)。 生物試劑試劑的包裝 編輯 固體試劑一般裝在帶膠木塞的廣口瓶中,液體試劑則盛在細(xì)口瓶中(或滴瓶中),見光易分解的試劑(如硝酸銀)應(yīng)裝在棕色瓶中,每一種試劑都貼有標(biāo)簽以表明試劑的名稱、濃度、純度。(實(shí)驗(yàn)室分裝時(shí),固體只標(biāo)明試劑名稱,液體還須注名明濃度)。 6X組氨酸標(biāo)記...
Ni NTA Beads是以4%瓊脂糖凝膠為基質(zhì),通過化學(xué)方法偶聯(lián)了四配位的氮川三乙酸(NTA),螯合鎳離子(Ni2+)后,可以形成非常穩(wěn)定的八面體結(jié)構(gòu),鎳離子處于八面體的中心,這樣的結(jié)構(gòu)很有效的保護(hù)了鎳離子免受小分子的進(jìn)攻(產(chǎn)品結(jié)構(gòu)見圖1所示,三種產(chǎn)品結(jié)構(gòu)的區(qū)別),更加穩(wěn)定,具體性能見表1。Ni NTA Beads可以耐受一定濃度的還原劑、變性劑或耦合劑等苛刻條件(見表2),適用性更廣,配體更穩(wěn)定,選擇性更高。 選蛋白純化試劑iu選上海楚知-天地人和6X組氨酸標(biāo)記(His-tag)蛋白純化試劑說明。福建離子交換試劑哪里買蛋白純化試劑Anti-HisAntibody產(chǎn)品介紹:His標(biāo)簽是一種分...
試劑篇4:離子層析法當(dāng)被分離的蛋白質(zhì)溶液流經(jīng)離子交換層析柱時(shí),帶有與離子交換劑相反電荷的蛋白質(zhì)被吸附在離子交換劑上,隨后用改變pH等辦法將吸附的蛋白質(zhì)洗脫下來。有機(jī)溶劑提取蛋白質(zhì)純化有機(jī)溶劑提取的原理是:與水互溶的有機(jī)溶劑(如甲醇、乙醇)能使一些蛋白質(zhì)在水中的溶解度***降低;而且在一定溫度、pH值和離子強(qiáng)度下,引起蛋白質(zhì)沉淀的有機(jī)溶劑的濃度不同,因此,控制有機(jī)溶劑的濃度可以分離純化蛋白質(zhì)。例如,在冰浴中磁力攪拌下,在4℃預(yù)冷的培養(yǎng)液中緩慢加入乙醇(-25℃),可以使冰**白析出,從而純化冰**白。由于在室溫下,有機(jī)溶劑不僅能引起蛋白質(zhì)的沉淀,而且伴隨著變性。因此,通常要將有機(jī)溶劑冷卻,然后在...
蛋白純化試劑,rProteinA/GBeads4FF加抗體純化流程3)抗原洗脫:提供以下兩種抗原洗脫方案,可根據(jù)后期檢測的需要選擇不同的抗原洗脫方法。變性洗脫法:此方法洗脫的樣品適用于SDS-PAGE檢測。向離心管中加入25μl1×SDS-PAGELoadingBuffer混合均勻,95℃加熱5min。然后進(jìn)行離心,800rpm離心1min,收集上清液,進(jìn)行SDS-PAGE電泳,轉(zhuǎn)膜后進(jìn)行Western分析。非變性洗脫法:此方法洗脫的樣品保持原有的生物活性,可用于后期功能分析。向離心管中加入5倍柱體積的洗脫液,用移液器吹打5次,混勻,然后在室溫下置于翻轉(zhuǎn)混合儀或者手工輕輕翻轉(zhuǎn)離心管,10min...
蛋白純化方法有幾種?4。疏水相互作用層析。依據(jù)生物分子間疏水性差別實(shí)現(xiàn)分離的一種層析方式。高離子強(qiáng)度下,增進(jìn)蛋白質(zhì)中的疏水性氨基酸與層析介質(zhì)間的疏水性相互作用,削弱其靜電作用力。洗脫時(shí),降低流動(dòng)相離子強(qiáng)度,削弱蛋白質(zhì)分子與層析介質(zhì)間的疏水作用,實(shí)現(xiàn)目的蛋白的純化和收集。疏水作用層析也屬于吸附性分離方式,對具有疏水特性的目的蛋白具有高選擇性和濃縮等特點(diǎn)。5。反相層析技術(shù)。 買蛋白純化填料選上海楚知生物天地人和純化試劑常州天地人和試劑經(jīng)銷商。廣東核酸提取試劑哪里買上海楚知生物蛋白純化試劑,DYKDDDDK(Flag)標(biāo)簽是由8個(gè)氨基酸組成的短肽,親水性強(qiáng),不會占據(jù)其他表位與結(jié)合域,因此更易與抗體...
上海楚知生物科技有限公司是一家專注于生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)儀器、試劑和耗材的一站式服務(wù)公司。致力于為高校、科研院所和企業(yè)等系統(tǒng)客戶提供完整的解決方案和售后服務(wù)。 其代理的蛋白純化試劑常州天地人和,常州天地人和生物科技有限公司公司坐落于經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)的長三角重心城市-----美麗的龍城常州市,受到**產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)型、升級換代政策支持的****。公司擁有具有國際視野的研發(fā)團(tuán)隊(duì),經(jīng)驗(yàn)豐富的生產(chǎn)團(tuán)隊(duì)和技術(shù)支持團(tuán)隊(duì)。常州天地人和生物(Smart-Lifesciences)是一家專業(yè)于生物填料研發(fā)、生產(chǎn)及銷售的****。公司受到了江蘇省和常州**的大力支持,并榮獲''江蘇省雙創(chuàng)企業(yè)”、"龍城英才“等殊榮。上海楚知生物致...
蛋白純化試劑ChelatingBeads6FF是以高度交聯(lián)的6%瓊脂糖凝膠為基質(zhì),配體為亞氨基二乙酸(IDA),結(jié)構(gòu)如圖1所示。ChelatingBeads6FF可以用于螯合各種金屬離子,如Cu2+,Zn2+,Co2+,Ni2+和Fe3+,可根據(jù)金屬離子對標(biāo)簽蛋白的結(jié)合力來選擇需要螯合的金屬離子。通常優(yōu)先Ni2+,因?yàn)殒囯x子螯合填料可以很好的從各種表達(dá)體系中一步純化his標(biāo)簽蛋白。Cu2+,Zn2+,結(jié)合力很強(qiáng),可以用于純化結(jié)合力弱的蛋白。Co2+和Fe3+對標(biāo)簽蛋白的特異性更強(qiáng),純度更高。His ,gst,strep標(biāo)簽蛋白純化及檢測。湖北蛋白檢測試劑哪種品牌好常州天地人和純化試劑CoSma...
蛋白純化試劑 Dextrin Beads 6FF是一種純化帶有麥芽糖結(jié)合蛋白(MBP)標(biāo)簽蛋白的親和層析介質(zhì),具體性能見表1。MBP可促進(jìn)連接蛋白的正確折疊,增加在細(xì)菌中過量表達(dá)的融合蛋白的溶解性,尤其是真**白。Dextrin Beads 6FF可以一步純化MBP融合蛋白,結(jié)合的融合蛋白可以用10mM麥芽糖進(jìn)行溫和洗脫,保護(hù)了標(biāo)簽蛋白的活性。如果要去除MBP融合部分可用位點(diǎn)特異性蛋白酶切除。問題及解決方案柱子反壓過高 填料被堵塞按照第3部分進(jìn)行樹脂清洗。裂解液中含有微小的固體顆粒,建議上柱前使用濾膜 (0.22或 0.45μm) 過濾,或者離心去除。目的蛋白沒有吸附目的蛋白未表達(dá)確保目的蛋白...
金屬螯合親合層析,是一種新型的應(yīng)用于原**白純化的技術(shù)。該方法通過蛋白質(zhì)表面的一些特殊的氨基酸,使之與金屬離子發(fā)生相互作用,從而對蛋白質(zhì)進(jìn)行親和純化。這些作用包括配價(jià)鍵結(jié)合、靜電吸附、共價(jià)鍵結(jié)合等,其中以6個(gè)組氨酸殘基組合的融合標(biāo)簽(His-Tag)在原**白表達(dá)中的應(yīng)用**為***。His-Tag可結(jié)合在目的蛋白的C末端或N末端,形成特殊的結(jié)構(gòu),以便于進(jìn)行下一步的純化及檢測。由于金屬螯合親合層析具有配體簡單、吸附量大、分離條件溫和、通用性強(qiáng)等特點(diǎn),所以可選擇范圍廣,高鹽,存在變性劑以及去垢劑的上樣條件下進(jìn)行純化,His-Tag正逐漸成為分離純化蛋白質(zhì)等生物工程產(chǎn)品***的技術(shù)之一。選試劑到楚...