肝損傷模型肝損傷主要指肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞的功能損傷或壞死。臨床肝損傷主要由飲酒、食物中毒、藥物毒性、病毒性肝炎、脂肪肝、肝硬化及膽汁淤積癥等引起。嚴(yán)重的急性肝損傷可發(fā)展為肝衰竭,危及生命;慢性肝損傷則可能向肝硬化、的終末期發(fā)展。而肝損傷小鼠模型模型可以用于肝損傷-修復(fù)...
動(dòng)物本模型可用大、小鼠、兔等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造模,本文小蟲(chóng)主要介紹在小鼠上的造模過(guò)程。8周齡,24g體重的C57BL/6小鼠(二)試劑耗材1、實(shí)驗(yàn)試劑TNBS、橄欖油、無(wú)水乙醇、1mL注射器、軟管(可用膽汁插管的軟管)、渦旋儀2、試劑配制首先將TNBS溶于水,配制成5...
在大鼠和小鼠篩選帶有雌活性的藥物時(shí),常常會(huì)發(fā)現(xiàn)這些藥物能終止妊娠,似乎可能是有效的避孕藥,但一旦用于人則并不成功。所以,如果知道一個(gè)化合物具有雌活,用這個(gè)化合物在大鼠或小鼠觀(guān)察終止妊娠的作用是沒(méi)有意義的。又如選用大小鼠作作實(shí)驗(yàn)性腹膜炎就不適用,因?yàn)樗鼈儗?duì)革蘭氏...
造模方式:1、將大鼠隨機(jī)分配至2組中,每組5只,正常喂食喂水7d后進(jìn)行試驗(yàn);2、大鼠體重為200g±10g,按組別給予藥物:生理鹽水組每只腹腔注射1ml生理鹽水、模型組每只按5ml/kg背部皮下注射四氯化碳3、各組藥物注射24h后取材進(jìn)行相關(guān)檢測(cè)生化結(jié)果顯示:...
動(dòng)物模型是醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中按特定設(shè)計(jì)用動(dòng)物模擬人體的一種模型。一般用于毒理、藥理、病理、生理甚至心理的實(shí)驗(yàn)研究。醫(yī)學(xué)的許多實(shí)驗(yàn)研究不允許或沒(méi)有必要直接在人體上進(jìn)行,可以根據(jù)需要,在實(shí)驗(yàn)控制條件下,在動(dòng)物身上制造出類(lèi)似人體上的毒理、藥理、清理、生理過(guò)程以研究其機(jī)制和規(guī)...
動(dòng)物模型常用的HBV小鼠模型:可簡(jiǎn)單分為5類(lèi):(1)轉(zhuǎn)基因小鼠,將HBV基因組片段直接轉(zhuǎn)入小鼠胚胎中,小鼠模型可終生表達(dá)HBV;(2)水動(dòng)力注射模型,將HBV質(zhì)粒DNA高壓注射到小鼠體內(nèi);(3)AAV載體轉(zhuǎn)染模型,通過(guò)腺相關(guān)病毒攜帶HBV基因組進(jìn)入小鼠的細(xì)胞中...
肝損傷模型肝損傷主要指肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞的功能損傷或壞死。臨床肝損傷主要由飲酒、食物中毒、藥物毒性、病毒性肝炎、脂肪肝、肝硬化及膽汁淤積癥等引起。嚴(yán)重的急性肝損傷可發(fā)展為肝衰竭,危及生命;慢性肝損傷則可能向肝硬化、的終末期發(fā)展。而肝損傷小鼠模型模型可以用于肝損傷-修復(fù)...
實(shí)驗(yàn)介紹細(xì)胞遷移與侵襲實(shí)驗(yàn)將Transwel小室放入培養(yǎng)板中,小室內(nèi)稱(chēng)上室,培養(yǎng)板內(nèi)稱(chēng)下室,上下層培養(yǎng)液以聚磚酸甜膜相隔,將研究的細(xì)胞種在上室內(nèi),由于聚碳酸脂膜有通透性,下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細(xì)跑,應(yīng)用不同孔徑和經(jīng)過(guò)不同處理的聚碳酸脂膜,就可以進(jìn)...
動(dòng)物模型之炎癥性腸病模型的構(gòu)建及選擇下文章來(lái)源于,.解構(gòu)探索歷程,培養(yǎng)科研思維,傳遞科研資訊,助力項(xiàng)目申報(bào)。炎癥性腸病是基因、免疫、飲食、環(huán)境等多種因素參與的一種慢性疾病,隨著現(xiàn)代生活方式的改變,炎癥性腸病已經(jīng)越來(lái)越普遍,炎癥性腸病簡(jiǎn)單的可以分為潰瘍性結(jié)腸炎(...
染方法大致可分為物理介導(dǎo)(如電穿孔法、顯微注射和基因等)、化學(xué)介導(dǎo)(脂質(zhì)體及其代替物、磷酸鈣等)和生物介導(dǎo)(各類(lèi)病毒,包括腺病毒、慢病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒、腺相關(guān)病毒等)三類(lèi)途徑。細(xì)胞轉(zhuǎn)染又分為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,瞬時(shí)轉(zhuǎn)染是指外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞后,存在于游離的載體...
細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死不同,細(xì)胞凋亡不是一件被動(dòng)的過(guò)程,而是主動(dòng)過(guò)程,它涉及一系列基因的ji活、表達(dá)以及調(diào)控等的作用,它并不是bing理?xiàng)l件下,自體損傷的一種現(xiàn)象,而是為更好地適應(yīng)生存環(huán)境而主動(dòng)爭(zhēng)取的一種死亡過(guò)程。上海東寰為您分享細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死的區(qū)別。細(xì)胞凋亡...
鼠、癲癇大鼠、大鼠、無(wú)脾小鼠和青光眼兔等。它們?yōu)樯镝t(yī)學(xué)研究提供了許多有價(jià)值的動(dòng)物模型。近交系的模型隨實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬、品系的不同,其的發(fā)生類(lèi)型和發(fā)病率有很大差異。很多自發(fā)性動(dòng)物模型在研究人類(lèi)疾病時(shí)具有重要的價(jià)值,如自發(fā)性大鼠,中國(guó)地鼠的自發(fā)性真性糖尿病,小鼠的各...
日久天長(zhǎng),易發(fā)生如下變化:分化現(xiàn)象減弱;形態(tài)功能趨于單一化或生存一定時(shí)間后衰退死亡;或發(fā)生轉(zhuǎn)化獲得不死性,變成可無(wú)限生長(zhǎng)的連續(xù)細(xì)胞系或惡性細(xì)胞系。因此,培養(yǎng)中的細(xì)胞可視為一種在特定的條件下的細(xì)胞群體,它們既保持著與體內(nèi)細(xì)胞相同的基本結(jié)構(gòu)和功能,也有一些不同于體...
而且因?yàn)橛?條定位線(xiàn),與劃痕相交,這樣就有10個(gè)可固定監(jiān)測(cè)點(diǎn),不作重復(fù),誤差也很小。2、如果你連續(xù)監(jiān)測(cè)24小時(shí),你需要考慮到劃痕縮小是細(xì)胞遷移和細(xì)胞繁殖共同作用的結(jié)果,而不是單純的細(xì)胞遷移。如果你要單純的考慮細(xì)胞遷移,你可以先用絲裂霉素(1ug/ml)處理一小...
建議按照2×106每孔的數(shù)量將293T細(xì)胞均勻鋪入。(2)第二天:在24小時(shí)之內(nèi),觀(guān)察293T細(xì)胞的匯合度在90%~95%之間時(shí),向其中加入DNA-脂質(zhì)體復(fù)合體,DNA-脂質(zhì)體復(fù)合體制備方法如下:a)輕輕混勻LipoMax,根據(jù)說(shuō)明書(shū)加入相應(yīng)量于500μlOp...
實(shí)驗(yàn)介紹細(xì)胞遷移與侵襲實(shí)驗(yàn)將Transwel小室放入培養(yǎng)板中,小室內(nèi)稱(chēng)上室,培養(yǎng)板內(nèi)稱(chēng)下室,上下層培養(yǎng)液以聚磚酸甜膜相隔,將研究的細(xì)胞種在上室內(nèi),由于聚碳酸脂膜有通透性,下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細(xì)跑,應(yīng)用不同孔徑和經(jīng)過(guò)不同處理的聚碳酸脂膜,就可以進(jìn)...
1.甲醛(HCOH)毒性級(jí)別:★★★★實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景:免疫組化實(shí)驗(yàn)中,取材后的組織或細(xì)胞需立刻投于固定劑中,使組織和細(xì)胞的蛋白質(zhì)凝固,終止內(nèi)源性或外源性酶反應(yīng),防止組織自溶或異溶,以保持原有結(jié)構(gòu)和形態(tài)。防護(hù)攻略:甲醛(福爾馬林)有很大的毒性并易揮發(fā),也是一種致劑(不...
使其形成利于核酸進(jìn)入的微孔。C.逆轉(zhuǎn)錄病毒(RNA):通過(guò)病毒中膜糖蛋白和宿主細(xì)胞表面的受體相互作用進(jìn)入宿主細(xì)胞,之后反轉(zhuǎn)錄酶啟動(dòng)合成DNA并隨機(jī)整合到宿主基因組中。特點(diǎn):穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,可用于難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞、原代細(xì)胞,體內(nèi)細(xì)胞等,但攜帶基因不能太大。D.腺病毒(雙鏈...
原代細(xì)胞是指在機(jī)體或組織中直接從生物體分離出來(lái)的、未經(jīng)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞。這種細(xì)胞保持著其原始的生物學(xué)特性,具有高度的活性和分裂能力。原代細(xì)胞在許多生物醫(yī)學(xué)研究中具有重要地位,包括藥物篩選、疾病模型的建立以及疫苗研發(fā)等。原代細(xì)胞的獲得通常是通過(guò)組織剪切、消化或酶解...
病毒包裝技術(shù)服務(wù)病毒包裝技術(shù)服務(wù)(DH0010)一、服務(wù)介紹重組病毒以其高效和多樣性,是非常有效的將外源基因?qū)爰?xì)胞的方法。慢病毒腺病毒腺病毒相關(guān)表達(dá)特點(diǎn)穩(wěn)定表達(dá)瞬時(shí)表達(dá)瞬時(shí)表達(dá)是否整合到基因組是否否免疫原性弱強(qiáng)弱病毒**力高很高高注:高濃度時(shí)可能有極少量整合...
原理以慢病毒包裝為例,主要包括3個(gè)質(zhì)粒:質(zhì)粒DNA可以轉(zhuǎn)錄出慢病毒遺傳物質(zhì)(RNA),但不能翻譯出慢病毒的外殼及蛋白成分的載體質(zhì)粒,其同時(shí)含有目的基因和報(bào)告基因,psPAX2是可以表達(dá)慢病毒外殼的質(zhì)粒,其表達(dá)產(chǎn)物可通過(guò)粘附機(jī)制更易穿過(guò)細(xì)胞膜。為慢病毒的膜蛋白質(zhì)...
動(dòng)物模型NASH和HCC大小鼠模型的研究進(jìn)展動(dòng)物模型在闡明NAFLD、NASH和HCC病理生理機(jī)制以及新藥的開(kāi)發(fā)中起著重要的作用。(1)肝臟細(xì)胞特異性啟動(dòng)子轉(zhuǎn)基因,或者突變與肥胖等相關(guān)的基因;(2)肝特異病毒質(zhì)粒注射;如AAV-HBV注射;(3)高壓水動(dòng)力注射...
具體選用何種培養(yǎng)器皿取決于細(xì)胞生長(zhǎng)密度需求(啟動(dòng)正常生長(zhǎng)所需的密度)。二.細(xì)胞換液培養(yǎng)1、全量換液:把所有的舊培養(yǎng)液移除,加入新的培養(yǎng)液(加入培養(yǎng)基的量根據(jù)細(xì)胞的密度和生長(zhǎng)速度);2、半量換液:把舊培養(yǎng)液移至15ml離心管中,然后在培養(yǎng)器皿中加入適量新培養(yǎng)基(...
使每條染色體的著絲點(diǎn)排列在細(xì)胞中間的一個(gè)平面上。這個(gè)平面與紡錘體的中軸相垂直,類(lèi)似于地球上赤道的位置,所以叫做赤道板。分裂中期的細(xì)胞,染色體的形態(tài)比較固定,數(shù)目比較清晰,便于觀(guān)察清楚。后期細(xì)胞分裂的后期,每一個(gè)著絲點(diǎn)分裂成兩個(gè),原來(lái)連接在同一個(gè)著絲點(diǎn)上的兩條姐...
在溫度37℃中培養(yǎng)24h左右,然后觀(guān)察其形態(tài),顏色等變化。除此之外,平行設(shè)置兩個(gè)稀釋度培養(yǎng)基,步驟是先稀釋樣本,通過(guò)稀釋后,微生物可以分散為單個(gè)細(xì)胞,然后進(jìn)行一定環(huán)境條件下培養(yǎng),直到其長(zhǎng)成菌落為止,然后進(jìn)行計(jì)算大腸桿菌的數(shù)量,通過(guò)稀釋度和樣本數(shù)量進(jìn)行計(jì)算。免疫...
原理過(guò)表達(dá)穩(wěn)定細(xì)胞系(OverexpressionStableCellLines)的構(gòu)建利用慢病毒轉(zhuǎn)染、電轉(zhuǎn)等技術(shù)手段將特定的基因序列整合到宿主細(xì)胞的染色體上,使得目的基因能夠在宿主細(xì)胞內(nèi)長(zhǎng)期且穩(wěn)定的表達(dá)。用途基因功能研究、免疫/殺傷/增殖等、抗體藥物的活性篩...
1、取新鮮抗凝全血(EDTA、枸櫞酸鈉或肝素抗凝血均可)或者去纖維蛋白血液,用等體積的全血及組織稀釋液或者PBS稀釋全血。2、取一支無(wú)菌離心管,先加入試劑A,再加入試劑D,使兩者形成梯度界面(試劑A:試劑D的體積比為3:2,如稀釋后的血液樣本小于5ml,則先后...
具體選用何種培養(yǎng)器皿取決于細(xì)胞生長(zhǎng)密度需求(啟動(dòng)正常生長(zhǎng)所需的密度)。二.細(xì)胞換液培養(yǎng)1、全量換液:把所有的舊培養(yǎng)液移除,加入新的培養(yǎng)液(加入培養(yǎng)基的量根據(jù)細(xì)胞的密度和生長(zhǎng)速度);2、半量換液:把舊培養(yǎng)液移至15ml離心管中,然后在培養(yǎng)器皿中加入適量新培養(yǎng)基(...
具體選用何種培養(yǎng)器皿取決于細(xì)胞生長(zhǎng)密度需求(啟動(dòng)正常生長(zhǎng)所需的密度)。二.細(xì)胞換液培養(yǎng)1、全量換液:把所有的舊培養(yǎng)液移除,加入新的培養(yǎng)液(加入培養(yǎng)基的量根據(jù)細(xì)胞的密度和生長(zhǎng)速度);2、半量換液:把舊培養(yǎng)液移至15ml離心管中,然后在培養(yǎng)器皿中加入適量新培養(yǎng)基(...
培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁可能原因1.胰蛋白酶消化過(guò)度;2.支原體污染;3.培養(yǎng)基pH值過(guò)堿(NaHCO3分解);4.細(xì)胞老化;5.接種細(xì)胞起始濃度太低或太高。解決方法1.縮短胰蛋白酶消化時(shí)間或降低胰蛋白酶濃度;2.分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。清潔支架或培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污...