細(xì)胞內(nèi)吞檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)吞檢測(cè)服務(wù)(DH0013)一、服務(wù)介紹1)無菌條件下,將DiI-LDL用細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋至25-50μg/ml。2)加入活細(xì)胞內(nèi),37℃培養(yǎng)4-5小時(shí)。3)孵育結(jié)束,吸去含有HumanDiI-LDL的培養(yǎng)基,并用無探針的培養(yǎng)基洗幾次。4)細(xì)胞固定5)熒光顯微鏡拍照二、服務(wù)內(nèi)容及價(jià)格服務(wù)編號(hào)服務(wù)內(nèi)容服務(wù)價(jià)格服務(wù)周期(工作日)DH0013細(xì)胞內(nèi)吞檢測(cè)服務(wù)(DIL-Ac-LDL)咨詢咨詢?nèi)?、客戶提?.符合實(shí)驗(yàn)要求的細(xì)胞藥品(包括說明書)(可代為購買),若無任何說明,默認(rèn)由本公司提供。四、提交給客戶結(jié)果1、完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告一份,包括實(shí)驗(yàn)流程、數(shù)據(jù)和圖片等2、結(jié)果分析報(bào)告五、服務(wù)項(xiàng)目說明1...
把培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下觀察,如大部分細(xì)胞變圓,立即移除胰酶消化液(如大部分細(xì)胞飄起,可不移除胰酶消化液),加入5ml預(yù)熱完全培養(yǎng)基,用吸管取培養(yǎng)液吹打瓶壁細(xì)胞,使其脫離瓶壁形成單細(xì)胞懸液,離心,小心移除上清;3、加入適量(消化前預(yù)估細(xì)胞的數(shù)量,1-2*10E6/ml凍存液)凍存液并吹打混勻,分裝至凍存管中,標(biāo)記凍存細(xì)胞的名稱、冷凍日期、操作者姓名拼音簡寫,然后放入梯度降溫盒(提前復(fù)溫至室溫),置于-80℃過夜,次晨置于液氮罐中保存。注意事項(xiàng)1.密切觀察細(xì)胞的生長密度,當(dāng)細(xì)胞密度即將達(dá)到其生長密度極限時(shí)進(jìn)行換液,以便第二天進(jìn)行保種;2.消化前進(jìn)行凍存液配制,切勿用培養(yǎng)基和血清重懸細(xì)胞后再加入D...
原代細(xì)胞是指在機(jī)體或組織中直接從生物體分離出來的、未經(jīng)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞。這種細(xì)胞保持著其原始的生物學(xué)特性,具有高度的活性和分裂能力。原代細(xì)胞在許多生物醫(yī)學(xué)研究中具有重要地位,包括藥物篩選、疾病模型的建立以及疫苗研發(fā)等。原代細(xì)胞的獲得通常是通過組織剪切、消化或酶解等方式從機(jī)體或組織中分離出來。這些細(xì)胞脫離了它們?cè)谏矬w中的環(huán)境,但是仍然保持著其基本的生物學(xué)特性,包括細(xì)胞膜、細(xì)胞核、細(xì)胞器以及其他重要的生物分子。原代細(xì)胞在未經(jīng)過傳代培養(yǎng)的情況下,保持著其原始的生物學(xué)特性,因此,它們常常被用于藥物篩選、毒理學(xué)研究等。同時(shí),由于原代細(xì)胞具有高度活性和分裂能力,它們也被用于組織工程和再生醫(yī)學(xué)中,如皮膚移植...
實(shí)驗(yàn)介紹細(xì)胞遷移與侵襲實(shí)驗(yàn)將Transwel小室放入培養(yǎng)板中,小室內(nèi)稱上室,培養(yǎng)板內(nèi)稱下室,上下層培養(yǎng)液以聚磚酸甜膜相隔,將研究的細(xì)胞種在上室內(nèi),由于聚碳酸脂膜有通透性,下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細(xì)跑,應(yīng)用不同孔徑和經(jīng)過不同處理的聚碳酸脂膜,就可以進(jìn)行共培養(yǎng)、細(xì)胞趨化、細(xì)胞遷移、細(xì)胞侵襲等多種方面的研究。一、實(shí)驗(yàn)步驟:材料準(zhǔn)備可拍照顯微鏡,Transwel小室,孔徑8um,沒包被膠的(Coste和Corning公司的也較常用),Transwel遷移實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞培養(yǎng)板24孔板。細(xì)胞培養(yǎng)板應(yīng)當(dāng)與購買的Transwel小室相配套,BD公司的Matiael,無血清DMEM,(1%胎生血清)DM...
流式細(xì)胞檢測(cè)工作原理是在細(xì)胞分子水平上通過單克隆抗體對(duì)單個(gè)細(xì)胞或其他生物粒子進(jìn)行多參數(shù)、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個(gè)細(xì)胞,并能同時(shí)從一個(gè)細(xì)胞中測(cè)得多個(gè)參數(shù),具有速度快、精度高、準(zhǔn)確性好的優(yōu)點(diǎn),是當(dāng)代先進(jìn)的細(xì)胞定量分析技術(shù)之一,下面就由上海東寰給大家簡要介紹。光源、液流通路、信號(hào)檢測(cè)傳輸和數(shù)據(jù)的分析系統(tǒng)是流式細(xì)胞儀的主要組成。目前臨床中運(yùn)用流式細(xì)胞儀進(jìn)行外周血白細(xì)胞、骨髓細(xì)胞等檢測(cè)是臨床檢測(cè)的重要組成部分。流式細(xì)胞儀主要由四部分組成。它們是:流動(dòng)室和液流系統(tǒng);激光源和光學(xué)系統(tǒng);光電管和檢測(cè)系統(tǒng);計(jì)算機(jī)和分析系統(tǒng)。上圖為其結(jié)構(gòu)示意圖。流動(dòng)室由樣品管、鞘液管和噴嘴等組成,常用光學(xué)玻璃、石英等...
食品中的大腸桿菌進(jìn)行快速準(zhǔn)確的檢測(cè)已成為了人們經(jīng)常關(guān)注的問題。下面闡述食品中的大腸桿菌檢測(cè)的方法及分析。發(fā)酵法這種方法主要是在℃下的培養(yǎng)基上進(jìn)行大腸桿菌的培養(yǎng),該培養(yǎng)基含有熒光底物,需要培養(yǎng)24h。然后對(duì)熒光底物進(jìn)行釋放,需要采用葡萄糖醛酸進(jìn)行,讓培養(yǎng)基能夠在紫外光的照射下發(fā)出熒光。采用這樣的方式方法,還可以進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)估計(jì)原來樣品中的菌落。主要步驟包括發(fā)酵、分離培養(yǎng)、二次發(fā)酵、顯微鏡觀察等。濾膜法該方法主要過程:加入10mL左右的無菌水于濾器中,然后摻入一些無菌水進(jìn)行清潔濾器的內(nèi)壁,再進(jìn)行過濾,將濾膜放在M-FC培養(yǎng)基中,兩者之間不能夠有氣泡,然后進(jìn)行密封,存放溫度為℃,存放時(shí)間約24h,直到...
在溫度37℃中培養(yǎng)24h左右,然后觀察其形態(tài),顏色等變化。除此之外,平行設(shè)置兩個(gè)稀釋度培養(yǎng)基,步驟是先稀釋樣本,通過稀釋后,微生物可以分散為單個(gè)細(xì)胞,然后進(jìn)行一定環(huán)境條件下培養(yǎng),直到其長成菌落為止,然后進(jìn)行計(jì)算大腸桿菌的數(shù)量,通過稀釋度和樣本數(shù)量進(jìn)行計(jì)算。免疫磁珠法該分離技術(shù)的主要原理是以磁珠為載體和抗體,進(jìn)行抗體和磁珠的結(jié)合,然后通過磁力技術(shù)完成力學(xué)的移動(dòng),進(jìn)而分離大腸桿菌。與其他方式相比,這樣的方式方法具有一定的優(yōu)點(diǎn),該技術(shù)可以提升樣本中病原性弧菌的檢測(cè)成功率,并且免疫磁珠技術(shù)可以于不同菌種中對(duì)不同的微生物進(jìn)行處理,進(jìn)而在很大程度上提高檢測(cè)效率。自動(dòng)化儀器檢測(cè)法主要是運(yùn)用免疫自動(dòng)化分析儀,...
1、取細(xì)胞縣液100u加入Transwel小室。2、24孔板下室一般加入600u含20S的培養(yǎng)基,特別注意的是,下層培養(yǎng)液和小室間常會(huì)有氣泡產(chǎn)生,一旦產(chǎn)生氣泡,下層培養(yǎng)液的趨化作用就減弱其至消失了,在種板的時(shí)候要特別留心,一旦出現(xiàn)氣泡,要將小室提起,去除氣泡,再將小室放進(jìn)培養(yǎng)板。3、培養(yǎng)細(xì)胞:常規(guī)培養(yǎng)12-48h(主要依細(xì)胞侵襲能力而定)。24h較常見,時(shí)間點(diǎn)的選擇除了要考慮到細(xì)胞細(xì)胞侵襲力外,處理因素對(duì)細(xì)胞數(shù)目的影響也不可忽視。直接計(jì)數(shù)法貼壁”細(xì)胞計(jì)數(shù),這里所謂的“貼“是指細(xì)胞穿過膜后,可以附著在膜的下室側(cè)而不會(huì)掉到下室里面去,通討給細(xì)胞染色可在鏡下計(jì)數(shù)細(xì)胞。取出Transwel小室,棄去孔...
流式細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒是一種用于研究細(xì)胞周期的重要工具。接下來就跟著上海東寰一起來看看吧~細(xì)胞周期是細(xì)胞生命周期中的一個(gè)重要階段,它包括細(xì)胞的生長、DNA復(fù)制和細(xì)胞分裂等過程。了解細(xì)胞周期對(duì)于研究細(xì)胞生物學(xué)以及藥物篩選等方面具有重要意義。流式細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒通過染色劑與細(xì)胞中的DNA結(jié)合,可以快速、準(zhǔn)確地分析細(xì)胞周期的不同階段。流式細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒的原理是利用細(xì)胞中DNA的含量來判斷細(xì)胞所處的周期階段。在細(xì)胞周期的不同階段,細(xì)胞中的DNA含量也會(huì)有所變化。通過染色劑與細(xì)胞中的DNA結(jié)合,可以將細(xì)胞分為G1期、S期和G2/M期等不同階段。這些染色劑可以通過流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè),通過分析細(xì)胞的D...
含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,需在1周內(nèi)用完;5.增加接種細(xì)胞起始濃度;6.換用新的保種細(xì)胞;7.分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。培養(yǎng)細(xì)胞生長不好可能原因細(xì)胞本身的狀態(tài)1.細(xì)胞傳代次數(shù)多,細(xì)胞老化;2.細(xì)胞的接種量:接種量過低,細(xì)胞生長緩慢;3.細(xì)胞傳代時(shí)間過晚:細(xì)胞中毒,影響傳代后的細(xì)胞生長;4.胰酶消化時(shí)間過長或過短:時(shí)間過長,細(xì)胞死亡;時(shí)間過短,細(xì)胞未完全分離而成團(tuán),細(xì)胞死亡;5.細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇:慢凍速溶。污染1.支原體污染;2.霉菌污染。培養(yǎng)基或血清1.更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證;2.選擇的培養(yǎng)基是否合適;3.培養(yǎng)基配制是否合適;4.培養(yǎng)...
含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,需在1周內(nèi)用完;5.增加接種細(xì)胞起始濃度;6.換用新的保種細(xì)胞;7.分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。培養(yǎng)細(xì)胞生長不好可能原因細(xì)胞本身的狀態(tài)1.細(xì)胞傳代次數(shù)多,細(xì)胞老化;2.細(xì)胞的接種量:接種量過低,細(xì)胞生長緩慢;3.細(xì)胞傳代時(shí)間過晚:細(xì)胞中毒,影響傳代后的細(xì)胞生長;4.胰酶消化時(shí)間過長或過短:時(shí)間過長,細(xì)胞死亡;時(shí)間過短,細(xì)胞未完全分離而成團(tuán),細(xì)胞死亡;5.細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇:慢凍速溶。污染1.支原體污染;2.霉菌污染。培養(yǎng)基或血清1.更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證;2.選擇的培養(yǎng)基是否合適;3.培養(yǎng)基配制是否合適;4.培養(yǎng)...
一、原理在體外培養(yǎng)皿或平板培養(yǎng)的單層貼壁細(xì)胞上,用微量頭或其它硬物在細(xì)胞生長的區(qū)域劃線,去除部分的細(xì)胞,然后繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞至實(shí)驗(yàn)設(shè)定的時(shí)間,取出細(xì)胞培養(yǎng)板,在顯微鏡下觀察并拍照記錄特定位置細(xì)胞的生長遷移能力。通過不同分組之間的細(xì)胞對(duì)于劃痕區(qū)修復(fù)能力的不同,可以判斷各組細(xì)胞的遷移與修復(fù)能力的差別。二、步驟1、準(zhǔn)備:所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺(tái)內(nèi))2、流程:1.培養(yǎng)板劃線:先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻得劃橫線,大約每隔cm一道,橫穿過孔,每孔至少穿過5條線;2.鋪細(xì)胞:在孔中加入約5×105個(gè)細(xì)胞,具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同,掌握...
然后將感興趣的藥物通過電穿孔或脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染等方法裝入純化的外泌體。外泌體內(nèi)可裝載的藥物包括小分子化學(xué)藥物、蛋白質(zhì)和多肽、核酸藥物、天然產(chǎn)物等。外泌體的抑制作用外泌體水平升高通常與不同類型的惡化相關(guān),一些研究人員希望能通過降低外泌體到正常水平來防止不良預(yù)后。從這個(gè)角度出發(fā),許多正在進(jìn)行的研究旨在通過調(diào)節(jié)外泌體生成分泌的過程或通過特異性靶向其成分抑制其與靶細(xì)胞的相互作用來調(diào)節(jié)外泌體的產(chǎn)生。如今我們對(duì)外泌體機(jī)制和不同生理和病理?xiàng)l件下的功能的理解呈指數(shù)級(jí)增長,雖然目前其生物學(xué)功能還未完全解析清楚,但研究者們?cè)谠S多領(lǐng)域均已對(duì)其進(jìn)行了深入探索。外泌體不是廢物顆粒,而是細(xì)胞間通訊的關(guān)鍵介質(zhì),作為宿主細(xì)胞的衛(wèi)星...
培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁可能原因1.胰蛋白酶消化過度;2.支原體污染;3.培養(yǎng)基pH值過堿(NaHCO3分解);4.細(xì)胞老化;5.接種細(xì)胞起始濃度太低或太高。解決方法1.縮短胰蛋白酶消化時(shí)間或降低胰蛋白酶濃度;2.分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。清潔支架或培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物;3.使用無菌醋酸溶液調(diào)整pH值或充入無菌CO2;4.啟用新的保種細(xì)胞;5.調(diào)節(jié)接種細(xì)胞濃度。懸浮細(xì)胞成簇可能原因1.培養(yǎng)液中含鈣,鎂離子;2.支原體污染;3.蛋白酶過度消化使得細(xì)胞裂解;。解決方法1.用無鈣鎂平衡鹽溶液洗滌細(xì)胞,輕巧吹吸2.細(xì)胞獲得單細(xì)胞懸液;3.分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體;。培養(yǎng)細(xì)胞生長緩慢可能原因1.由于更...
細(xì)胞遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)細(xì)胞遷移和侵襲技術(shù)服務(wù)(DH0004)一、服務(wù)介紹細(xì)胞遷移\侵襲是指細(xì)胞在接收到信號(hào)或感受到某些物質(zhì)的梯度后而產(chǎn)生的移動(dòng),常采用Transwell的方法。Transwell實(shí)驗(yàn)主要材料是transwell小室,嵌套的底層為一張帶著微孔的膜,孔徑大小為8-12um。細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)需在膜孔上覆蓋基質(zhì)膠(Matrigel),細(xì)胞遷移則不需鋪膠,通過結(jié)晶紫染色計(jì)算穿過濾膜細(xì)胞數(shù)量,分析細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)能力。二、服務(wù)內(nèi)容及價(jià)格服務(wù)編號(hào)服務(wù)內(nèi)容服務(wù)價(jià)格服務(wù)周期(工作日)DH0004-1劃痕法檢測(cè)細(xì)胞遷移能力(含細(xì)胞培養(yǎng)處理)面議7-10DH0004-2transwell法檢測(cè)細(xì)胞遷移能力(含細(xì)胞...
流式細(xì)胞檢測(cè)是一種應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷的技術(shù)。接下來就由上海東寰為您介紹。它通過將細(xì)胞懸浮液通過流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析,可以快速、準(zhǔn)確地獲取大量細(xì)胞的信息,包括細(xì)胞數(shù)量、大小、形態(tài)、表面標(biāo)記物等。流式細(xì)胞檢測(cè)已經(jīng)成為細(xì)胞生物學(xué)和免疫學(xué)領(lǐng)域的重要工具,為科學(xué)家們提供了更深入的了解細(xì)胞的機(jī)制和功能。流式細(xì)胞檢測(cè)的原理是利用流式細(xì)胞儀的流動(dòng)系統(tǒng)將細(xì)胞懸浮液以單個(gè)細(xì)胞的形式通過激光束進(jìn)行檢測(cè)。激光束照射到細(xì)胞上時(shí),細(xì)胞會(huì)發(fā)出散射光和熒光信號(hào)。散射光可以提供有關(guān)細(xì)胞的大小和形態(tài)信息,而熒光信號(hào)則可以用于檢測(cè)細(xì)胞表面標(biāo)記物或內(nèi)部分子的表達(dá)水平。通過分析這些信號(hào),可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分類、計(jì)數(shù)和定量分析。流式...
細(xì)胞內(nèi)吞檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)吞檢測(cè)服務(wù)(DH0013)一、服務(wù)介紹1)無菌條件下,將DiI-LDL用細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋至25-50μg/ml。2)加入活細(xì)胞內(nèi),37℃培養(yǎng)4-5小時(shí)。3)孵育結(jié)束,吸去含有HumanDiI-LDL的培養(yǎng)基,并用無探針的培養(yǎng)基洗幾次。4)細(xì)胞固定5)熒光顯微鏡拍照二、服務(wù)內(nèi)容及價(jià)格服務(wù)編號(hào)服務(wù)內(nèi)容服務(wù)價(jià)格服務(wù)周期(工作日)DH0013細(xì)胞內(nèi)吞檢測(cè)服務(wù)(DIL-Ac-LDL)咨詢咨詢?nèi)?、客戶提?.符合實(shí)驗(yàn)要求的細(xì)胞藥品(包括說明書)(可代為購買),若無任何說明,默認(rèn)由本公司提供。四、提交給客戶結(jié)果1、完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告一份,包括實(shí)驗(yàn)流程、數(shù)據(jù)和圖片等2、結(jié)果分析報(bào)告五、服務(wù)項(xiàng)目說明1...
而且因?yàn)橛?條定位線,與劃痕相交,這樣就有10個(gè)可固定監(jiān)測(cè)點(diǎn),不作重復(fù),誤差也很小。2、如果你連續(xù)監(jiān)測(cè)24小時(shí),你需要考慮到劃痕縮小是細(xì)胞遷移和細(xì)胞繁殖共同作用的結(jié)果,而不是單純的細(xì)胞遷移。如果你要單純的考慮細(xì)胞遷移,你可以先用絲裂霉素(1ug/ml)處理一小時(shí),抑制細(xì)胞的分裂,這樣你的結(jié)果就是細(xì)胞遷移的作用了。另外,使用無血清培養(yǎng)基也可以降低增殖對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。3、照片拍完之后,可以用ImageJ來測(cè)量劃痕區(qū)域的像素定量比較細(xì)胞遷移的速度。4、雖然無血清培養(yǎng)可以忽略細(xì)胞增殖的影響,但是由于細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)整體性的下調(diào)節(jié),細(xì)胞遷移的速度也會(huì)慢很多。5、應(yīng)盡量清洗掉散落的細(xì)胞,對(duì)于一些細(xì)胞,...
細(xì)胞生命的終結(jié)有許多種方式,凋亡只是其中一種,所以要確保自己檢測(cè)到的的確是凋亡信號(hào)。上海東寰為您分析細(xì)胞凋亡的檢測(cè)方法!細(xì)胞凋亡的檢測(cè)方法也有多種,如形態(tài)學(xué)檢測(cè)、磷脂酰絲氨酸外翻分析(AnnexinV法)、線粒體膜勢(shì)能檢測(cè)、DN***斷化檢測(cè)、TUNEL法及Caspase-3活性檢測(cè)等,可根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的方法。這里我們主要了解AnnexinV法。AnnexinV是一種分子量為35~36KD的豐富的胞內(nèi)蛋白。AnnexinV屬于Ca2+結(jié)合蛋白家族,可與磷脂(PL)發(fā)生可逆的Ca2+依賴性結(jié)合,對(duì)磷脂酰絲氨酸(PS)具有高親和力。在健康細(xì)胞中,PS主要位于質(zhì)膜的胞質(zhì)側(cè),而在早期凋亡細(xì)...
而且因?yàn)橛?條定位線,與劃痕相交,這樣就有10個(gè)可固定監(jiān)測(cè)點(diǎn),不作重復(fù),誤差也很小。2、如果你連續(xù)監(jiān)測(cè)24小時(shí),你需要考慮到劃痕縮小是細(xì)胞遷移和細(xì)胞繁殖共同作用的結(jié)果,而不是單純的細(xì)胞遷移。如果你要單純的考慮細(xì)胞遷移,你可以先用絲裂霉素(1ug/ml)處理一小時(shí),抑制細(xì)胞的分裂,這樣你的結(jié)果就是細(xì)胞遷移的作用了。另外,使用無血清培養(yǎng)基也可以降低增殖對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。3、照片拍完之后,可以用ImageJ來測(cè)量劃痕區(qū)域的像素定量比較細(xì)胞遷移的速度。4、雖然無血清培養(yǎng)可以忽略細(xì)胞增殖的影響,但是由于細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)整體性的下調(diào)節(jié),細(xì)胞遷移的速度也會(huì)慢很多。5、應(yīng)盡量清洗掉散落的細(xì)胞,對(duì)于一些細(xì)胞,...
血管生成實(shí)驗(yàn)血管生成實(shí)驗(yàn)(DH0011)一、服務(wù)介紹應(yīng)用Matrigel模擬機(jī)體環(huán)境,上面接種**細(xì)胞,觀察血管生成情況。二、服務(wù)內(nèi)容及價(jià)格服務(wù)編號(hào)服務(wù)內(nèi)容服務(wù)價(jià)格服務(wù)周期(工作日)DH0011-1血管生成咨詢咨詢?nèi)?、客戶提?.客戶需提供生長狀態(tài)良好的細(xì)胞株及相關(guān)處理藥物2.實(shí)驗(yàn)前,客戶需告知具體的細(xì)胞處理方式及詳細(xì)要求。注:若有特殊處理的樣品,請(qǐng)盡可能出示相關(guān)材料(具有保密性的材料除外)。四、服務(wù)流程1:細(xì)胞培養(yǎng)2:細(xì)胞轉(zhuǎn)染或藥物處理3:鋪Matrigel膠4:接種細(xì)胞5:觀察血管生成情況五、提交給客戶結(jié)果1、完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告2、細(xì)胞培養(yǎng)圖片3、血管生成圖片六、服務(wù)項(xiàng)目說明1.實(shí)驗(yàn)周期:具體需...
如何判斷是否加入了合適體積的Matrigel:我們只需用一張格子紙就能知道自己的移液調(diào)整到多少能正好把下孔填滿。如上圖所示,垂直透過每個(gè)孔看下面的格子紙,如果格子被縮小了,那么就說明膠沒加滿,格子被放大了,那么膠就加多了,格子沒發(fā)生什么變形,這才是剛剛加滿下孔的狀態(tài)。2、凝膠1)蓋上ibidi血管生成載玻片的蓋子。2)準(zhǔn)備一個(gè)10cm的培養(yǎng)皿,放入浸過水的紙巾,制成一個(gè)濕盒。3)將ibidi血管生成載玻片放入培養(yǎng)皿中,蓋上培養(yǎng)皿蓋。4)將整個(gè)培養(yǎng)皿放入培養(yǎng)箱中,靜置30分鐘左右,等待膠凝結(jié)。5)等待同時(shí)準(zhǔn)備細(xì)胞懸液。3.鋪細(xì)胞加入細(xì)胞的量直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,所以在正式實(shí)驗(yàn)開始之前,要對(duì)不同類型的...
防止有Matrigel流經(jīng)上孔而留下殘留膠;3、需要按照細(xì)胞的生長速度定時(shí)采集圖像,并且對(duì)其成管長度、覆蓋面積、成環(huán)數(shù)和結(jié)點(diǎn)進(jìn)行測(cè)量和記錄,并且對(duì)其進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析;4、分上下孔的ibidi血管生成載玻片能去除凹液面,使成像效果更好。(Matrigel鋪在下孔,細(xì)胞鋪在Matrigel上,上孔充滿培養(yǎng)基)2、數(shù)據(jù)分析(在特定的時(shí)間點(diǎn)采集圖片,并且進(jìn)行圖像分析(Wimasis全自動(dòng)分析)測(cè)量小管長度,成環(huán)數(shù),細(xì)胞覆蓋面積和結(jié)點(diǎn)。之后在對(duì)測(cè)量結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析以說明實(shí)驗(yàn)結(jié)果。)三、實(shí)驗(yàn)具體步驟1、準(zhǔn)備基質(zhì)膠1)實(shí)驗(yàn)前一天將Matrigel置于冰盒中,放入4度冰箱,使膠能過夜緩慢融化。(注意:同樣要準(zhǔn)備一...
原代細(xì)胞是指在機(jī)體或組織中直接從生物體分離出來的、未經(jīng)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞。這種細(xì)胞保持著其原始的生物學(xué)特性,具有高度的活性和分裂能力。原代細(xì)胞在許多生物醫(yī)學(xué)研究中具有重要地位,包括藥物篩選、疾病模型的建立以及疫苗研發(fā)等。原代細(xì)胞的獲得通常是通過組織剪切、消化或酶解等方式從機(jī)體或組織中分離出來。這些細(xì)胞脫離了它們?cè)谏矬w中的環(huán)境,但是仍然保持著其基本的生物學(xué)特性,包括細(xì)胞膜、細(xì)胞核、細(xì)胞器以及其他重要的生物分子。原代細(xì)胞在未經(jīng)過傳代培養(yǎng)的情況下,保持著其原始的生物學(xué)特性,因此,它們常常被用于藥物篩選、毒理學(xué)研究等。同時(shí),由于原代細(xì)胞具有高度活性和分裂能力,它們也被用于組織工程和再生醫(yī)學(xué)中,如皮膚移植...
細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)服務(wù)細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)(DH0002)一、服務(wù)介紹細(xì)胞轉(zhuǎn)染(Transfection)是指將DNA或者RNA導(dǎo)入真核細(xì)胞中的過程。轉(zhuǎn)染的目的是產(chǎn)生重組蛋白,或特異性增強(qiáng)或控制轉(zhuǎn)染細(xì)胞中的基因表達(dá)。常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可以分為兩大類,一類為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,一類為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染(構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞株)。二、服務(wù)內(nèi)容及價(jià)格服務(wù)編號(hào)服務(wù)內(nèi)容服務(wù)價(jià)格服務(wù)周期(工作日)DH0002-1瞬時(shí)轉(zhuǎn)染詢價(jià)7-10DH0002-2穩(wěn)定轉(zhuǎn)染(構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞株)詢價(jià)7-10注:瞬時(shí)轉(zhuǎn)染:是指外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞后,存在于游離的載體上,不整合到細(xì)胞的染色體上,在外源基因?qū)爰?xì)胞1-4天后收獲細(xì)胞對(duì)目的基因的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。特點(diǎn)是周期短、...
在溫度37℃中培養(yǎng)24h左右,然后觀察其形態(tài),顏色等變化。除此之外,平行設(shè)置兩個(gè)稀釋度培養(yǎng)基,步驟是先稀釋樣本,通過稀釋后,微生物可以分散為單個(gè)細(xì)胞,然后進(jìn)行一定環(huán)境條件下培養(yǎng),直到其長成菌落為止,然后進(jìn)行計(jì)算大腸桿菌的數(shù)量,通過稀釋度和樣本數(shù)量進(jìn)行計(jì)算。免疫磁珠法該分離技術(shù)的主要原理是以磁珠為載體和抗體,進(jìn)行抗體和磁珠的結(jié)合,然后通過磁力技術(shù)完成力學(xué)的移動(dòng),進(jìn)而分離大腸桿菌。與其他方式相比,這樣的方式方法具有一定的優(yōu)點(diǎn),該技術(shù)可以提升樣本中病原性弧菌的檢測(cè)成功率,并且免疫磁珠技術(shù)可以于不同菌種中對(duì)不同的微生物進(jìn)行處理,進(jìn)而在很大程度上提高檢測(cè)效率。自動(dòng)化儀器檢測(cè)法主要是運(yùn)用免疫自動(dòng)化分析儀,...
實(shí)驗(yàn)介紹細(xì)胞遷移與侵襲實(shí)驗(yàn)將Transwel小室放入培養(yǎng)板中,小室內(nèi)稱上室,培養(yǎng)板內(nèi)稱下室,上下層培養(yǎng)液以聚磚酸甜膜相隔,將研究的細(xì)胞種在上室內(nèi),由于聚碳酸脂膜有通透性,下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細(xì)跑,應(yīng)用不同孔徑和經(jīng)過不同處理的聚碳酸脂膜,就可以進(jìn)行共培養(yǎng)、細(xì)胞趨化、細(xì)胞遷移、細(xì)胞侵襲等多種方面的研究。一、實(shí)驗(yàn)步驟:材料準(zhǔn)備可拍照顯微鏡,Transwel小室,孔徑8um,沒包被膠的(Coste和Corning公司的也較常用),Transwel遷移實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞培養(yǎng)板24孔板。細(xì)胞培養(yǎng)板應(yīng)當(dāng)與購買的Transwel小室相配套,BD公司的Matiael,無血清DMEM,(1%胎生血清)DM...
1.甲醛(HCOH)毒性級(jí)別:★★★★實(shí)驗(yàn)場景:免疫組化實(shí)驗(yàn)中,取材后的組織或細(xì)胞需立刻投于固定劑中,使組織和細(xì)胞的蛋白質(zhì)凝固,終止內(nèi)源性或外源性酶反應(yīng),防止組織自溶或異溶,以保持原有結(jié)構(gòu)和形態(tài)。防護(hù)攻略:甲醛(福爾馬林)有很大的毒性并易揮發(fā),也是一種致劑(不做科研的人都知道)。很容易通過皮膚吸收,對(duì)眼睛、黏膜和上呼吸道有刺激和損傷。避免吸入其揮發(fā)的汽霧。要戴合適的手套和護(hù)目鏡,始終在化學(xué)通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行操作,遠(yuǎn)離熱源、火花及明火。2.二甲苯毒性級(jí)別:★★★★實(shí)驗(yàn)場景:用于免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)中組織的透明和石蠟切片的脫蠟。防護(hù)攻略:二甲苯對(duì)眼及上呼吸道有刺激作用,高濃度時(shí),對(duì)中樞系統(tǒng)有麻醉作用。急性中...
1.甲醛(HCOH)毒性級(jí)別:★★★★實(shí)驗(yàn)場景:免疫組化實(shí)驗(yàn)中,取材后的組織或細(xì)胞需立刻投于固定劑中,使組織和細(xì)胞的蛋白質(zhì)凝固,終止內(nèi)源性或外源性酶反應(yīng),防止組織自溶或異溶,以保持原有結(jié)構(gòu)和形態(tài)。防護(hù)攻略:甲醛(福爾馬林)有很大的毒性并易揮發(fā),也是一種致劑(不做科研的人都知道)。很容易通過皮膚吸收,對(duì)眼睛、黏膜和上呼吸道有刺激和損傷。避免吸入其揮發(fā)的汽霧。要戴合適的手套和護(hù)目鏡,始終在化學(xué)通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行操作,遠(yuǎn)離熱源、火花及明火。2.二甲苯毒性級(jí)別:★★★★實(shí)驗(yàn)場景:用于免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)中組織的透明和石蠟切片的脫蠟。防護(hù)攻略:二甲苯對(duì)眼及上呼吸道有刺激作用,高濃度時(shí),對(duì)中樞系統(tǒng)有麻醉作用。急性中...
上海東寰生物科技有限公司是依托中國科學(xué)院上海生命科學(xué)學(xué)院生化細(xì)胞所而組建起來的高新的技術(shù)企業(yè),是集生物科研技術(shù)服務(wù)和生物科研用試劑研發(fā)、生產(chǎn)、銷售于一體的實(shí)業(yè)公司。在過去的幾十年里,隨著醫(yī)學(xué)和生物科學(xué)的快速發(fā)展,人類對(duì)許多疾病的了解和掌握程度有了明顯的提高。其中,動(dòng)物疾病模型作為研究工具,在探索疾病發(fā)展和檢查的過程中發(fā)揮了巨大的作用。它們不僅幫助科研人員深入理解疾病的共同性,還為新藥研發(fā)、疫苗測(cè)試等提供了有效的平臺(tái)。動(dòng)物疾病模型在科研中有著普遍的應(yīng)用。首先,它們可以幫助科研人員深入理解疾病的共同性,即不同物種之間存在的共有病理變化過程。通過對(duì)動(dòng)物模型的研究,科研人員可以更清楚地了解疾病的發(fā)展過...