低IgG血清(貨號(hào):C2730-0100/0500)IgG是胎牛血清中發(fā)現(xiàn)的比較常見(jiàn)的抗體,低IgG血清主要通過(guò)A-Sepharose處理,使血清能夠保留原有的生物活性,同時(shí)降低血清的IgG含量,低于5μg/ml。低IgG胎牛血清適用于培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞。因此,低IgG胎牛血清有利于單克隆抗體的純化,用于研究抗體和病毒反應(yīng)、細(xì)胞表面抗原表位。//四環(huán)素血清(貨號(hào):C2720-0100/0500)普通胎牛血清中一般會(huì)含有四環(huán)素(Tet),當(dāng)使用非常敏感的Tet-誘導(dǎo)的基因表達(dá)系統(tǒng)時(shí),研究人員往往會(huì)遇到非預(yù)期的基因表達(dá)的問(wèn)題,為了確保精確地基因表達(dá),建議使用四環(huán)素調(diào)控系統(tǒng)胎牛血清,應(yīng)用于使用敏感四環(huán)素...
組份與比例不同胎牛血清和新生牛血清兩者所含的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子、及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同。03用途與用法不同某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長(zhǎng),而有些細(xì)胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。血清保存和使用須注意:血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超過(guò)一個(gè)月。解凍血清時(shí),應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱,并經(jīng)常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,一定不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,如放在37℃解凍,顏色加深,粘稠度也會(huì)增加,血清在解凍和熱滅活后,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,避免反復(fù)凍融。可以使血清分離快,分離血清多不易受外...
用于免疫的動(dòng)物作免疫用的動(dòng)物有哺乳類和禽類,主要為羊、馬、家兔、猴、豬、豚鼠、雞等,實(shí)驗(yàn)室常用者為家兔、山羊和豚鼠等。動(dòng)物種類的選擇主要根據(jù)抗原的生物學(xué)特性和所要獲得抗血清數(shù)量,如一般制備抗r-免疫球蛋白抗血清,多用家兔和山羊,因動(dòng)物反應(yīng)良好,而且能夠提供足夠數(shù)量的血清,用于免疫的動(dòng)物應(yīng)適齡,健壯,無(wú)感染性疾患,比較好為///雄性,此外還需十分注意動(dòng)物的飼養(yǎng),以消除動(dòng)物的個(gè)體差異以及在免疫過(guò)程中死亡的影響。若用兔,最好用純種新西蘭兔,一組三只,兔的體重以2~3kg為宜。二、免疫途徑免疫途徑有多種多樣,如靜脈內(nèi)、腹腔內(nèi)、肌肉內(nèi)、皮內(nèi)、皮下、淋巴結(jié)內(nèi)注射等,一般常用皮下或背部多點(diǎn)皮內(nèi)注射,每點(diǎn)注射0...
四環(huán)素血清應(yīng)用于使用敏感四環(huán)素誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)的細(xì)胞培養(yǎng)(Tet-on, Tet-off),以及其它對(duì)四環(huán)素敏感的實(shí)驗(yàn)中。IR (輻照)鈷60伽馬輻照劑量在3.5Mrad. 通過(guò)直接與間接作用將生物大分子(如核酸)鍵結(jié)破壞,人畜用藥物/疫苗,及對(duì)微生物負(fù)荷(Bioburden)要求比較高水平的實(shí)驗(yàn)。7HI (熱滅活)處理血清56℃, 30Min, 破壞補(bǔ)體,確保細(xì)胞與抗體結(jié)合不會(huì)發(fā)生裂解。胚胎干細(xì)胞(ES)特用血清是從多個(gè)批次的胎牛血清篩選出特定批號(hào),適用于人及小鼠胚胎干細(xì)胞、成體干細(xì)胞及原代細(xì)胞長(zhǎng)期培養(yǎng)。間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)特用血清從多個(gè)批次的胎牛血清篩選出特定批號(hào),經(jīng)過(guò)骨髓,脂肪組織及臍帶來(lái)...
不同類型血清比較的報(bào)道:2020年8月《生物學(xué)雜志》第4期刊登了一篇《不同類型牛血清對(duì)MDCK細(xì)胞培養(yǎng)效果研究》,研究了進(jìn)口胎牛血清、國(guó)產(chǎn)胎牛血清、國(guó)產(chǎn)新生牛血清對(duì)MDCK細(xì)胞的促生長(zhǎng)效果。作者在含10%不同類型牛血清的DMEM培養(yǎng)液中連續(xù)傳代培養(yǎng)MDCK細(xì)胞,比較了三種血清培養(yǎng)MDCK細(xì)胞的傳代穩(wěn)定性、比較大増殖密度、倍增時(shí)間、比生長(zhǎng)速率、貼壁率等指標(biāo)。結(jié)果顯示,在比較大增殖密度和倍增時(shí)間上,胎牛血清均優(yōu)于新生牛血清。在貼壁率方面[貼壁率(%)=(所形成集落數(shù)/接種細(xì)胞數(shù))×100%],進(jìn)口胎牛血清略高于國(guó)產(chǎn)胎牛血清,差異明顯;國(guó)產(chǎn)新生牛血清低于國(guó)產(chǎn)胎牛血清和進(jìn)口胎牛血清,差異極明顯。血清中...
血清的種類與類型根據(jù)培養(yǎng)的細(xì)胞類型不同,我們要選擇合適的血清類型。常見(jiàn)的血清類型如:特級(jí)胎牛血清、胚胎干細(xì)胞特用胎牛血清、間充質(zhì)干細(xì)胞特用胎牛血清等,還有新西蘭、澳洲來(lái)源的胎牛血清。此外,還有一些特殊加工工藝的血清如:四環(huán)素調(diào)控系統(tǒng)胎牛血清、低IgG胎牛血清、去外泌體胎牛血清、透析胎牛血清、碳吸附胎牛血清、去脂胎牛血清等。血清的解凍條件建議血清的解凍比較好方式為:-20℃冰柜到4℃冰箱融化,充分過(guò)夜解凍。不推薦-20℃冰柜到37℃水浴融化,會(huì)因溫度改變較大,導(dǎo)致蛋白析出,產(chǎn)生大量沉淀。解凍時(shí),可將血清無(wú)菌分裝至50ml離心管中。真正的胎牛血清凝血功能差,紅細(xì)胞容易破裂,一般表現(xiàn)出微紅色或橘紅色...
HI(熱滅活)處理血清血清熱滅活是通過(guò)提高血清溫度到56℃,并保持該溫度30Min完成,可以去除血清內(nèi)補(bǔ)體,確保細(xì)胞與抗體結(jié)合不會(huì)發(fā)生裂解。加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。煥活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,煥活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究中培養(yǎng)ES細(xì)胞、昆蟲(chóng)細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用熱滅活于血清。胚胎干細(xì)胞(ES)特用血清是從多個(gè)批次的胎牛血清經(jīng)過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)及其他測(cè)試篩選出特定批號(hào),適用于人及小鼠胚胎干細(xì)胞、成體干細(xì)胞及原代細(xì)胞長(zhǎng)期培養(yǎng)。間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)特用血清從多個(gè)批次的胎牛血清篩選出特定批號(hào),經(jīng)過(guò)骨髓,脂肪組織及臍帶來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞的細(xì)胞活性嚴(yán)格測(cè)試,通過(guò)...
★ 我們需要知道都有哪些種類的牛血清和它們的用途:1透析血清分子量小于10,000的分子如氨基酸、葡萄糖、鹽離子和未結(jié)合的蛋白均被移除。透析血清主要用在進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)成分優(yōu)化和標(biāo)定特定成分進(jìn)行研究的實(shí)驗(yàn)中。2碳吸附血清使用活性和右旋糖苷去除血清中的親脂類(lipophilic)物質(zhì),如某些、細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子等,去除作用對(duì)分子量大小并無(wú)區(qū)分。碳吸附胎牛血清常用于體外培養(yǎng)研究驗(yàn)證的作用效果。3去外泌體血清適用于收集細(xì)胞分泌的外泌體時(shí)使用。4低IgG血清用于研究抗體、病毒和病毒反應(yīng)、細(xì)胞表面抗原表位。畜禽采集血分離血清是疫病監(jiān)測(cè)、檢測(cè)、診斷和評(píng)估免疫效果的一項(xiàng)前提性工作。青海新生牛血清批發(fā)商如何進(jìn)行血清...
放射免疫法以不同稀釋度的抗血清與質(zhì)量標(biāo)記抗原混合,孵育24h后,測(cè)定其結(jié)合率。通常以結(jié)合率為50%的血清稀度和為效價(jià)。如某抗血清的結(jié)合率為50%時(shí)的稀釋度為1:15000,則該血清的效價(jià)就是1:15000。抗血清的效價(jià),除由抗血清本身的性質(zhì)決定外,還受標(biāo)記抗原的質(zhì)量、孵育時(shí)間,所用稀釋液的成分及其pH等因素的影響,在工作中必須引起注意。(2)雙向擴(kuò)散法利用大分子抗原和抗體在瓊脂平板上擴(kuò)散,兩者在相交處產(chǎn)生沉淀線,以觀察和判斷抗血清中是否有抗體及其濃度。球脂板的制備:100mlpH7.1的磷酸鹽緩沖液加到15g的瓊脂內(nèi),于水浴中加溫?cái)嚢?,使瓊脂完全溶解,趁熱用紗布過(guò)濾,待溶液冷卻到65°C左右時(shí)...
為什么存放于冰箱中的血清會(huì)出現(xiàn)沉淀?如何避免該現(xiàn)象?在2~8°C條件下存放,血清中的多種蛋白或脂蛋白會(huì)形成肉眼可見(jiàn)的沉淀,如血纖蛋白(fibrin),單體時(shí)處于溶解狀態(tài),在凍融過(guò)程中會(huì)發(fā)生聚集,形成肉眼可見(jiàn)的沉淀。但該現(xiàn)象一般不會(huì)影響血清的性能??梢?00g離心5分鐘,取上清,然后過(guò)濾。根據(jù)需要選擇合適的濾膜孔徑,一般比較常用的是0.22umPES材質(zhì)的濾膜。為避免濾膜阻塞,建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾而不是直接過(guò)濾血清。為盡量避免出現(xiàn)上述現(xiàn)象,建議血清分裝成一次性用量存于-15°至-20℃冰箱,避免反復(fù)凍融和融化后的血清在2~8°C條件下長(zhǎng)時(shí)間放置。夏天在常溫下即可,冬天要在20-3...
豬血清(貨號(hào):C2500-0100/0500/1000)豬血清在染色體研究中表現(xiàn)非常出色,可用于淋巴細(xì)胞培養(yǎng),疫苗生產(chǎn)(生產(chǎn)支原體)中和脂質(zhì)體包裹的腺相關(guān)病毒(AAV),用于誘導(dǎo)大鼠肝纖維化,作為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)中的標(biāo)準(zhǔn)陰性參考。//兔血清(貨號(hào):C2520-0100/0500)正常兔血清可作為免疫分析的阻斷劑和對(duì)照。在免疫組織化學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)方面,各種研究均采用20%或1:200稀釋兔血清作為阻斷劑。//羊血清(貨號(hào):C2530-0010/0100/0500)用于生物醫(yī)學(xué)研究的大多數(shù)細(xì)胞系和原代培養(yǎng)物上,F(xiàn)BS的合適替代物,病毒分離和鑒定,病毒學(xué)研究。用作魚(yú)類細(xì)胞培養(yǎng)的有效N...
能夠?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞供給必需物質(zhì),在微生物的培育中要為培育的微生物供給成長(zhǎng)因子。相同動(dòng)物細(xì)胞代謝進(jìn)程中有許多物質(zhì)是動(dòng)物細(xì)胞所必需而本身無(wú)法組成的的,例如堿基、維生素、氨基酸等微量物質(zhì),它們的效果十分重要,細(xì)胞需求它們組成核酸和蛋白質(zhì),缺少要導(dǎo)致細(xì)胞成長(zhǎng)不良乃至shi世;供給結(jié)合蛋白,能辨認(rèn)維生素、脂類、金屬和其他等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)生機(jī);供給對(duì)保持細(xì)胞指數(shù)成長(zhǎng)的,基礎(chǔ)培育基中沒(méi)有或量很少的養(yǎng)分物,以及首要的低分子養(yǎng)分物。這些物質(zhì)都存在于血清中,如果在制造培育基的時(shí)分一項(xiàng)項(xiàng)增加是十分費(fèi)事的。所以參加動(dòng)物血清相似微生物培育中的天然培育基的做法,簡(jiǎn)略便利、效果好。采集血量達(dá)到采集血管容積的 1...
可以起到營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用,動(dòng)物在代謝的進(jìn)程中所需的養(yǎng)分包含水、無(wú)機(jī)鹽、維生素、糖類、脂肪、氨基酸和纖維素等。這些成分動(dòng)物血清都能夠供給給體外培育的動(dòng)物細(xì)胞,但這些養(yǎng)分物質(zhì)(除水以外)的含量在動(dòng)物血清中所占的份額很少,并且首要的養(yǎng)分物質(zhì)在動(dòng)物細(xì)胞培育基的制造中現(xiàn)已增加了。所以,從這些視點(diǎn)看動(dòng)物細(xì)胞培育參加的動(dòng)物血清雖然能起到為培育的動(dòng)物細(xì)胞供給養(yǎng)分物質(zhì)的效果,但這并不是首要的效果。細(xì)胞貼壁鋪展在塑料培育基質(zhì)上所需因子來(lái)歷是動(dòng)物細(xì)胞培育的一個(gè)很重要的用途就是用取自燒傷患者皮膚的健康細(xì)胞進(jìn)行培育,能夠獲得許多本身的皮膚細(xì)胞,為大面積燒傷的患者移植。人工皮膚的制備需求培育的細(xì)胞貼附在薄膜上構(gòu)成皮膚組織,...
血清在細(xì)胞培養(yǎng)中為細(xì)胞提供氨基酸,蛋白質(zhì),維生素(特別是脂溶性維生素如A,D,E,K),碳水化合物,脂肪,,生長(zhǎng)因子,礦物質(zhì)及微量元素。此外,血清還可以緩沖培養(yǎng)基,抑制蛋白水解酶,增加培養(yǎng)基的粘度,降低在移液或攪拌時(shí)造成的剪切力。血清的保質(zhì)期是5年,儲(chǔ)存溫度-10~-30℃。血清長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。因此,長(zhǎng)期保存血清必須在-10℃以下儲(chǔ)存,并避免反復(fù)凍融。在采集血過(guò)程中一定要注意如果用一次性真空管時(shí)血液應(yīng)不間斷地流入管中。杭州羊血清品牌用于免疫的動(dòng)物作免疫用的動(dòng)物有哺乳類和禽類,主要為羊、馬、家...
抗血清的采集與保存家兔是很常用以產(chǎn)生抗體的動(dòng)物,因此這里主要討論兔血的收集。羊等較大動(dòng)物以頸靜脈、動(dòng)脈取血,鼠等小動(dòng)物取血可參閱有關(guān)資料。取兔血有兩種方法,一是耳緣靜脈或耳動(dòng)脈放血,一是頸動(dòng)脈入血,也可心臟采集血。取動(dòng)脈或靜脈放血時(shí),將免放入一個(gè)特造的木匣或籠內(nèi),耳露于箱(籠) 外,也可由另一人捉住兔身。剪去耳緣的毛,用少許二甲苯涂抹耳廓,30s后,耳血管擴(kuò)張、充血。用手輕拉耳尖,以單面剃須刀或尖的手術(shù)刀片,快速切開(kāi)動(dòng)脈或靜脈,血液即流出,每次可收集30~40ml。然后用棉球壓迫止血,凝血后洗去二甲苯。二星期后,可在另一耳放血。此法可反復(fù)多次放血。頸動(dòng)脈放血時(shí),將免仰臥,固定于兔臺(tái),剪去頸部的...
豬血清(貨號(hào):C2500-0100/0500/1000)豬血清在染色體研究中表現(xiàn)非常出色,可用于淋巴細(xì)胞培養(yǎng),疫苗生產(chǎn)(生產(chǎn)支原體)中和脂質(zhì)體包裹的腺相關(guān)病毒(AAV),用于誘導(dǎo)大鼠肝纖維化,作為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)中的標(biāo)準(zhǔn)陰性參考。//兔血清(貨號(hào):C2520-0100/0500)正常兔血清可作為免疫分析的阻斷劑和對(duì)照。在免疫組織化學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)方面,各種研究均采用20%或1:200稀釋兔血清作為阻斷劑。//羊血清(貨號(hào):C2530-0010/0100/0500)用于生物醫(yī)學(xué)研究的大多數(shù)細(xì)胞系和原代培養(yǎng)物上,F(xiàn)BS的合適替代物,病毒分離和鑒定,病毒學(xué)研究。用作魚(yú)類細(xì)胞培養(yǎng)的有效N...
按物種分類馬血清10%馬血清可代替FBS用于支持SRBC的體外抗體應(yīng)答, 常與牛血清結(jié)合或單獨(dú)作為哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的補(bǔ)充培養(yǎng)基。豬血清豬血清在染色體研究中表現(xiàn)非常出色,可用于淋巴細(xì)胞培養(yǎng), 疫苗生產(chǎn)(生產(chǎn)支原體), 中和脂質(zhì)體包裹的腺相關(guān)病毒(AAV), 用于誘導(dǎo)大鼠肝纖維化, 作為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)中的標(biāo)準(zhǔn)陰性參考。兔血清正常兔血清可作為免疫分析的阻斷劑和對(duì)照。在免疫組織化學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)方面,各種研究均采用20%或1:200稀釋兔血清作為阻斷劑。細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),要保證細(xì)胞可以順利生長(zhǎng)和增殖,需添加10%~20%的血清,動(dòng)物血清還可起到酸堿度緩沖液的作用。河北豬血清多少錢(qián)可以起到營(yíng)養(yǎng)...
佐劑由于不同個(gè)體對(duì)同一抗原的反應(yīng)性不同,而且不同抗原產(chǎn)生免疫反應(yīng)的能力也有強(qiáng)有弱,因此常常在注射抗原的同時(shí),加入能增強(qiáng)抗原的抗原性物質(zhì),以刺激機(jī)體產(chǎn)生較強(qiáng)的免疫反應(yīng),這種物質(zhì)稱為免疫佐劑。佐劑除了延長(zhǎng)抗原在體內(nèi)的存留時(shí)間,增加抗原刺激作用外,更主要的是,它能刺激網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng),使參與免疫反應(yīng)的免疫活性細(xì)胞增多,促進(jìn)T細(xì)胞與B細(xì)胞的相互作用,從而增強(qiáng)機(jī)體對(duì)抗原的細(xì)胞免疫和抗體的產(chǎn)生。常用的佐劑是福氏佐劑(Freundadjuvant),其成分通常是羊毛脂1份、石臘油5份羊毛脂與石臘油的比例,視需要可調(diào)整為1:2~9(V/V),這是不完全福氏佐劑,在每毫升不完全佐劑加入1~20mg卡介苗就成為完全佐...
血清是指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、提供各種生長(zhǎng)因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用。血清的主要成分:血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異(胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)比較高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害...
如何進(jìn)行血清滅活處理?血清請(qǐng)先按上述「血清應(yīng)如何融解」中的操作步驟融化和混勻,熱滅活時(shí)請(qǐng)將血清置于56℃水浴30分鐘。為盡量減少熱滅活對(duì)血清品質(zhì)的影響,一次滅活的血清體積不宜過(guò)大。比較好準(zhǔn)備同樣的容器裝相等體積的水(與血清相同溫度),滅活時(shí)將裝有血清和水的容器同時(shí)放入56℃水浴,在裝水的容器中放置溫度計(jì),加熱過(guò)程中不時(shí)輕輕旋轉(zhuǎn)混勻血清,當(dāng)溫度計(jì)顯示達(dá)到56℃左右,開(kāi)始計(jì)時(shí)。56℃水浴后,建議馬上轉(zhuǎn)移到冰上降溫。您只需把標(biāo)本寄過(guò)來(lái),我們?yōu)槟?jié)省時(shí)間,幫您出結(jié)果,原始數(shù)據(jù),分析數(shù)據(jù)均可提供。寧波雞血清批發(fā) 1989年左右,也有國(guó)外學(xué)者建議用豬血清取代牛血清,用于培養(yǎng)制造非洲豬瘟病毒的細(xì)胞(見(jiàn)《動(dòng)...
能夠?yàn)殡x體的動(dòng)物細(xì)胞供給能量及祛毒功用血清中存在許多的糖類、脂類物質(zhì),這些物質(zhì)能夠?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞供給許多的能量。有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到祛毒效果。鋪展在塑料培育基質(zhì)上所需因子來(lái)歷動(dòng)物細(xì)胞培育的一個(gè)很重要的用途就是用取自燒傷患者皮膚的健康細(xì)胞進(jìn)行培育,能夠獲得許多本身的皮膚細(xì)胞,為大面積燒傷的患者移植。人工皮膚的制備需求培育的細(xì)胞貼附在薄膜上構(gòu)成皮膚組織,血清就為這個(gè)進(jìn)程供給所需因子。在動(dòng)物血清中存在豐厚的無(wú)機(jī)鹽,還具有許多緩沖物質(zhì),在培育基的酸堿度發(fā)生變化時(shí)起到緩沖效果。使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩下胰蛋白酶失活,維護(hù)細(xì)胞不受傷害。總歸,動(dòng)物血清是細(xì)胞培育中用量大的天然培育基,含有...
血清是指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、提供各種生長(zhǎng)因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用。血清的主要成分:血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異(胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)比較高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害...
將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。如果在37℃或更高的溫度解凍血清,血清中會(huì)出現(xiàn)沉淀。此沉淀可能包括磷酸鈣結(jié)晶,但不改變血清的性能,同樣血清熱滅活也會(huì)導(dǎo)致沉淀的形成。渾濁和沉淀所有的血清可能保留一些纖維蛋白原。某些外部因素可能引發(fā)纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白,導(dǎo)致血清解凍后可能會(huì)觀察到絮狀物或混濁。這些物質(zhì)的存在不會(huì)改變血清的性能。如果想去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝到無(wú)菌離心管中,以低速離心1~2min,上清液即可直接加入到培養(yǎng)基內(nèi)使用。注意:不要以過(guò)濾的方式去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)檫@可能阻塞濾膜。血清的篩選...
能夠?yàn)殡x體的動(dòng)物細(xì)胞供給能量及祛毒功用血清中存在許多的糖類、脂類物質(zhì),這些物質(zhì)能夠?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞供給許多的能量。有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到祛毒效果。鋪展在塑料培育基質(zhì)上所需因子來(lái)歷動(dòng)物細(xì)胞培育的一個(gè)很重要的用途就是用取自燒傷患者皮膚的健康細(xì)胞進(jìn)行培育,能夠獲得許多本身的皮膚細(xì)胞,為大面積燒傷的患者移植。人工皮膚的制備需求培育的細(xì)胞貼附在薄膜上構(gòu)成皮膚組織,血清就為這個(gè)進(jìn)程供給所需因子。在動(dòng)物血清中存在豐厚的無(wú)機(jī)鹽,還具有許多緩沖物質(zhì),在培育基的酸堿度發(fā)生變化時(shí)起到緩沖效果。使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩下胰蛋白酶失活,維護(hù)細(xì)胞不受傷害。總歸,動(dòng)物血清是細(xì)胞培育中用量大的天然培育基,含有...
去外泌體血清去除≥99%的胎牛血清內(nèi)源外泌體,并與處理前的胎牛血清具有相同的細(xì)胞生長(zhǎng)速率和形態(tài)。適用于收集細(xì)胞分泌的外泌體時(shí)使用。透析血清分子量小于10,000的分子如氨基酸、葡萄糖、鹽離子和未結(jié)合的蛋白均被移除。透析血清主要用在進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)成分優(yōu)化和標(biāo)定特定成分進(jìn)行研究的實(shí)驗(yàn)中。碳吸附血清使用活性和右旋糖苷去除血清中的親脂類(lipophilic)物質(zhì),如某些、細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子等,去除作用對(duì)分子量大小并無(wú)區(qū)分。碳吸附胎牛血清常用于體外培養(yǎng)研究驗(yàn)證的作用效果。低IgG血清用于研究抗體、病毒和病毒反應(yīng)、細(xì)胞表面抗原表位。四環(huán)素調(diào)控胎牛血清應(yīng)用于使用敏感四環(huán)素誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)的細(xì)胞培養(yǎng)(Tet-on, ...
血清的種類與類型根據(jù)培養(yǎng)的細(xì)胞類型不同,我們要選擇合適的血清類型。常見(jiàn)的血清類型如:特級(jí)胎牛血清、胚胎干細(xì)胞特用胎牛血清、間充質(zhì)干細(xì)胞特用胎牛血清等,還有新西蘭、澳洲來(lái)源的胎牛血清。此外,還有一些特殊加工工藝的血清如:四環(huán)素調(diào)控系統(tǒng)胎牛血清、低IgG胎牛血清、去外泌體胎牛血清、透析胎牛血清、碳吸附胎牛血清、去脂胎牛血清等。血清的解凍條件建議血清的解凍比較好方式為:-20℃冰柜到4℃冰箱融化,充分過(guò)夜解凍。不推薦-20℃冰柜到37℃水浴融化,會(huì)因溫度改變較大,導(dǎo)致蛋白析出,產(chǎn)生大量沉淀。解凍時(shí),可將血清無(wú)菌分裝至50ml離心管中。將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之...
1989年左右,也有國(guó)外學(xué)者建議用豬血清取代牛血清,用于培養(yǎng)制造非洲豬瘟病毒的細(xì)胞(見(jiàn)《動(dòng)物檢疫》1991年01期《豬血清中的牛血清白蛋白抗體引起非洲豬瘟血清學(xué)診斷的假陽(yáng)性反應(yīng)》),原因是牛血清中的白蛋白會(huì)干擾非洲豬瘟抗體的檢測(cè),造成假陽(yáng)性反應(yīng)。其他動(dòng)物源血清兔血清:兔血清通常從六個(gè)月或更小的動(dòng)物身上收集,可用于與BSA結(jié)合用作免疫細(xì)胞化學(xué)[1]和免疫組織化學(xué)中的封閉血清。山羊血清:多用做封閉液,也有一些研究人員發(fā)現(xiàn),質(zhì)量的山羊血清可用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)。雞血清:從屠宰供人類食用的健康雞中收集的。有研究用于血清維生素B12的放射性同位素稀釋測(cè)定 將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融...
放射免疫法以不同稀釋度的抗血清與質(zhì)量標(biāo)記抗原混合,孵育24h后,測(cè)定其結(jié)合率。通常以結(jié)合率為50%的血清稀度和為效價(jià)。如某抗血清的結(jié)合率為50%時(shí)的稀釋度為1:15000,則該血清的效價(jià)就是1:15000??寡宓男r(jià),除由抗血清本身的性質(zhì)決定外,還受標(biāo)記抗原的質(zhì)量、孵育時(shí)間,所用稀釋液的成分及其pH等因素的影響,在工作中必須引起注意。(2)雙向擴(kuò)散法利用大分子抗原和抗體在瓊脂平板上擴(kuò)散,兩者在相交處產(chǎn)生沉淀線,以觀察和判斷抗血清中是否有抗體及其濃度。球脂板的制備:100mlpH7.1的磷酸鹽緩沖液加到15g的瓊脂內(nèi),于水浴中加溫?cái)嚢瑁弓傊耆芙?,趁熱用紗布過(guò)濾,待溶液冷卻到65°C左右時(shí)...
在進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)成分優(yōu)化和標(biāo)記特定成分進(jìn)行研究的實(shí)驗(yàn)中,需要去除某些特定的背景成分,常用的去除方法有碳吸附,使用活性碳和右旋糖苷去除血清中的親脂類(lipophilic)物質(zhì)?;钚蕴磕軌蚪Y(jié)合脂溶性分子,通過(guò)碳吸附可降低血清中許多***及生長(zhǎng)因子的濃度,如雌二醇、皮質(zhì)醇、皮質(zhì)酮、孕酮、B類維生素、睪酮及T3、T4、前列腺素等。該血清適用于上述一些分子可能干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的實(shí)驗(yàn)中,對(duì)于那些需要這些分子的細(xì)胞培養(yǎng),也可能降低細(xì)胞生長(zhǎng)性能。適用于:培養(yǎng)干細(xì)胞、原代細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、人類細(xì)胞、人類骨髓細(xì)胞、白血病細(xì)胞、人類胚肺成纖維細(xì)胞、人類腦神經(jīng)細(xì)胞和瘤細(xì)胞等細(xì)胞。注意:不要以過(guò)濾的方式去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)檫@...
血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。對(duì)血清的成分和作用的研究雖有很大進(jìn)展,但仍存在一些問(wèn)題,主要是:一、血清的成份可能有幾百種之多,目前對(duì)其準(zhǔn)確的成份、含量及其作用機(jī)制仍不清楚,尤其是對(duì)其中一些多肽類生長(zhǎng)因子、和脂類等尚未充分認(rèn)識(shí),這給研究工作帶來(lái)許多困難;二、血清都是批量生產(chǎn),各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制;三、不能排除血清中含有易變物質(zhì),這被認(rèn)為是“瓶中惡化”的原因之一。相同動(dòng)物細(xì)胞代謝進(jìn)程中有許多物質(zhì)是動(dòng)物細(xì)胞所必需而...