購買回來的血清都是冰凍狀態(tài),使用時(shí)需要融化,融化過程在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進(jìn)行,待溶解完成,我們觀察到的胎牛血清會表現(xiàn)出黃色或紅色。并不是越紅越好,也不是越黃越好,淡黃色到淡紅色才是比較正常的顏色范圍。很多培養(yǎng)細(xì)胞的寶寶會發(fā)現(xiàn)進(jìn)口血清有沉淀,從而懷疑血清的質(zhì)量...

胎牛血清的合規(guī)血源產(chǎn)地對于細(xì)微差異即可決定成敗的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)來說，選擇來源安全、品質(zhì)優(yōu)良的胎牛血清至關(guān)重要。作為牛肉制品的副產(chǎn)品，胎牛血清的傳統(tǒng)產(chǎn)地包括澳大利亞，新西蘭， 美國， 南美（烏拉圭&巴西）以及歐洲等畜牧業(yè)發(fā)達(dá)的區(qū)域。業(yè)內(nèi)通常會根據(jù)不同產(chǎn)地的牛情況，...

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)：Taq(水生棲熱菌)聚合酶耐熱DNA聚合酶的很好活性溫度約為75-80°C(167-176°F),盡管該酶通常使用72°C(162°F)的溫度。在該步驟中，DNA聚合酶通過從反應(yīng)混合物中添加在5’-至-3’方向上與模板互補(bǔ)的游離DNA鏈來合成與...

可能你會覺得，你從一些渠道購買的大品牌的血清，價(jià)格便宜，細(xì)胞養(yǎng)的還挺好。所以也不在乎。因?yàn)槟愕募?xì)胞不是你想象的那么難養(yǎng)，有些假血清也確實(shí)可以養(yǎng)，但是質(zhì)量，穩(wěn)定性確實(shí)不一樣，批間差異大，甚至同一批的血清都不穩(wěn)定，直接影響到你的實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可重復(fù)性和數(shù)據(jù)的真實(shí)性。之...

在體光纖成像記錄成像原理熒光物質(zhì)被激發(fā)后所發(fā)射的熒光信號的強(qiáng)度在一定的范圍內(nèi)與熒光素的量成線性關(guān)系。熒光信號激發(fā)系統(tǒng)（激發(fā)光源、光路傳輸組件）、熒光信號收集組件、信號檢測以及放大系統(tǒng)。在體光纖成像記錄發(fā)射的熒光信號的波長范圍一般在可見到紅外區(qū)域的居多。因?yàn)楣獾?..

在體光纖成像記錄增大視場可以提高成像光譜儀的工作效率,大視場寬覆蓋是下一代成像光譜儀的發(fā)展趨勢。視場增大通常會導(dǎo)致遙感器質(zhì)量和體積的增加,如何在獲得大視場的同時(shí)具有小型化與輕量化的結(jié)構(gòu)是每個(gè)成像光譜儀設(shè)計(jì)者應(yīng)該權(quán)衡的問題。為了突破成像光譜儀質(zhì)量與體積對視場的限...

膜片鉗電生理技術(shù)：神經(jīng)元細(xì)胞膜上有離子通道，它們控制電荷流入和流出細(xì)胞，從而調(diào)節(jié)神經(jīng)元激發(fā)。一種用于研究這些通道的生物物理學(xué)特性的極為有用的技術(shù)被稱為膜片鉗記錄。在這種方法中，神經(jīng)科學(xué)家把拋光的玻璃微吸管置于細(xì)胞上通過吸力形成高電阻封接。這個(gè)過程分隔了一小"片...

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)：三步：變性：模板DNA加熱變性；復(fù)性，引物與它的靶序列發(fā)生退火，引物DNA量多，使引物和模板在局部形成雜交鏈；延伸，4種dNTP 與 Mg2+ 存在的條件下，DNA合成酶催化以引物為起始點(diǎn)，按5'-3'方向進(jìn)行延伸。上面三步為一個(gè)循環(huán)，可使拷貝...

聚合酶鏈反應(yīng)：多重連接依賴探針擴(kuò)增（MLPA):允許用單個(gè)引物對擴(kuò)增多個(gè)靶標(biāo)，從而避免多重PCR的分辨率限制。多重聚合酶鏈反應(yīng):由單個(gè)PCR混合物中的多個(gè)引物組組成，以產(chǎn)生對不同DNA序列特異的不同大小的擴(kuò)增子。通過同時(shí)靶向多個(gè)基因，可以從單次測試中獲得額外的...

血清的保存應(yīng)該注意：血清中的沉淀物、絮狀物：主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成，這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量，可用離心3000rpm，5分鐘去除，也可不用處理，顯微鏡下"小黑點(diǎn)"。經(jīng)過熱處理過的血清，沉淀物的形成會明顯增多。有些沉淀物在顯微...

聚合酶鏈反應(yīng)也可以用作以下敏感試驗(yàn)的一部分組織分型，對移植至關(guān)重要。截至2008年，甚至有人提議用聚合酶鏈反應(yīng)檢測取代傳統(tǒng)的血型抗體檢測。許多形式的病癥涉及致病基因的改變。通過使用基于聚合酶鏈反應(yīng)的測試來研究這些突變，醫(yī)治方案有時(shí)可以根據(jù)患者的不同而不同。聚合...

國際上流行的【血清融化三步法】可較為大限度地保存血清中因子的活性，不會產(chǎn)生沉淀，同時(shí)能縮短血清融化時(shí)間。關(guān)于胎牛血清的滅活：真正的胎牛血清因?yàn)樘ヅ]有形成有效補(bǔ)體，如果針對補(bǔ)體滅活的話，就不需要。其他情況根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)來決定。胎牛血清的濃度：胎牛血清通常是以2%...

不同產(chǎn)地的胎牛血清，品質(zhì)也是相差甚遠(yuǎn)。值得注意的是，胎牛血清是動物源生物制品，我國對于動物源制品的進(jìn)口一直有很嚴(yán)格的規(guī)定，目前我國批準(zhǔn)進(jìn)口的胎牛血清來源是澳大利亞、新西蘭和烏拉圭，合法正規(guī)途徑進(jìn)口的胎牛血清必須在產(chǎn)品包裝上標(biāo)注血源地。這意味著，其他血源地的胎牛...

胎牛血清和新生牛血清的區(qū)別是什么？取血年齡不同：牛血清按照牛取血時(shí)間或牛齡可進(jìn)行區(qū)分。胎牛血清指的是取自未出生，母牛剖腹得來的胎牛。國產(chǎn)胎牛血清（并無明確定義，但通常以此稱）的指的是出生4-6小時(shí)，且未進(jìn)行哺乳進(jìn)食的牛，有時(shí)還稱作國產(chǎn)新生牛。 新生牛血清指的是...

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)：三步：變性：模板DNA加熱變性；復(fù)性，引物與它的靶序列發(fā)生退火，引物DNA量多，使引物和模板在局部形成雜交鏈；延伸，4種dNTP 與 Mg2+ 存在的條件下，DNA合成酶催化以引物為起始點(diǎn)，按5'-3'方向進(jìn)行延伸。上面三步為一個(gè)循環(huán)，可使拷貝...

聚合酶鏈反應(yīng)也可以用作以下敏感試驗(yàn)的一部分組織分型，對移植至關(guān)重要。截至2008年，甚至有人提議用聚合酶鏈反應(yīng)檢測取代傳統(tǒng)的血型抗體檢測。許多形式的病癥涉及致病基因的改變。通過使用基于聚合酶鏈反應(yīng)的測試來研究這些突變，醫(yī)治方案有時(shí)可以根據(jù)患者的不同而不同。聚合...

聚合酶鏈反應(yīng)：流聚合酶鏈反應(yīng):一種偽等溫PCR方法。將溶液置于熱梯度下，而不是反復(fù)加熱和冷卻聚合酶鏈反應(yīng)混合物。由此產(chǎn)生的熱不穩(wěn)定性驅(qū)動對流流動自動將聚合酶鏈反應(yīng)試劑從熱區(qū)域和冷區(qū)域打亂，從而反復(fù)啟動聚合酶鏈反應(yīng)。通過利用混沌流場的出現(xiàn)，可以優(yōu)化熱邊界條件和P...

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的常見問題：PCR產(chǎn)物的電泳檢測時(shí)間一般為48h以內(nèi)，有些很好于當(dāng)日電泳檢測，大于48h后帶型不規(guī)則甚至消失。假陰性：不出現(xiàn)擴(kuò)增條帶。PCR反應(yīng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)有模板核酸的制備，引物的質(zhì)量與特異性，酶的質(zhì)量及溴乙錠的使用， PCR循環(huán)條件。尋找原因亦應(yīng)...

胎牛血清的合規(guī)血源產(chǎn)地對于細(xì)微差異即可決定成敗的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)來說，選擇來源安全、品質(zhì)優(yōu)良的胎牛血清至關(guān)重要。作為牛肉制品的副產(chǎn)品，胎牛血清的傳統(tǒng)產(chǎn)地包括澳大利亞，新西蘭， 美國， 南美（烏拉圭&巴西）以及歐洲等畜牧業(yè)發(fā)達(dá)的區(qū)域。業(yè)內(nèi)通常會根據(jù)不同產(chǎn)地的牛情況，...

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)：三步：變性：模板DNA加熱變性；復(fù)性，引物與它的靶序列發(fā)生退火，引物DNA量多，使引物和模板在局部形成雜交鏈；延伸，4種dNTP 與 Mg2+ 存在的條件下，DNA合成酶催化以引物為起始點(diǎn)，按5'-3'方向進(jìn)行延伸。上面三步為一個(gè)循環(huán)，可使拷貝...

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的試驗(yàn)污染：PCR反應(yīng)的很大特點(diǎn)是具有較大擴(kuò)增能力與極高的靈敏性，但令人腦袋不適的問題是易污染，極其微量的污染即可造成假陽性的產(chǎn)生。 污染原因：標(biāo)本間交叉污染：標(biāo)本污染主要有收集標(biāo)本的容器被污染，或標(biāo)本放置時(shí)，由于密封不嚴(yán)溢于容器外，或容器外粘有...

胎牛血清用于細(xì)胞培養(yǎng)不過百年歷史，但發(fā)展得相當(dāng)快，每年的需求量也不斷上升。在胎牛血清和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的方面，國外起步較早，認(rèn)識也較深入。應(yīng)該說，胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)基方面，具有的優(yōu)勢。因?yàn)槠錉I養(yǎng)，所以幾乎適合所有類型的細(xì)胞生長，每種細(xì)胞都可以從中攝取自己所需的養(yǎng)分...

血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出，放入試管中，不加抗凝劑，則凝血反應(yīng)被，血液迅速凝固，形成膠凍。凝血塊收縮，其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清，也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中，纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊，所以血清中無纖維蛋白原，這一點(diǎn)...

國際上流行的【血清融化三步法】可較為大限度地保存血清中因子的活性，不會產(chǎn)生沉淀，同時(shí)能縮短血清融化時(shí)間。關(guān)于胎牛血清的滅活：真正的胎牛血清因?yàn)樘ヅ]有形成有效補(bǔ)體，如果針對補(bǔ)體滅活的話，就不需要。其他情況根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)來決定。胎牛血清的濃度：胎牛血清通常是以2%...

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的特點(diǎn)：靈敏度高：PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12）量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克（μg=-6）水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位）；在細(xì)菌學(xué)中很小檢...

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的常見問題：靶序列或擴(kuò)增產(chǎn)物的交叉污染：這種污染有兩種原因：一是整個(gè)基因組或大片段的交叉污染，導(dǎo)致假陽性。這種假陽性可用以下方法解決：操作時(shí)應(yīng)小心輕柔，防止將靶序列吸入加樣內(nèi)或?yàn)R出離心管外。除酶及不能耐高溫的物質(zhì)外，所有試劑或器材均應(yīng)高壓消毒。所...

聚合酶鏈反應(yīng)注意事項(xiàng)：在實(shí)驗(yàn)過程中要防止RNA的降解，保持RNA的完整性。在總RNA的提取過程中，注意避免mRNA的斷裂；為了防止非特異性擴(kuò)增，必須設(shè)陰性對照；內(nèi)參的設(shè)定：主要為了用于靶RNA的定量。常用的內(nèi)參有G3PD（甘油醛-3-磷酸脫氫酶）、β-Acti...

血清的主要作用：對培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用：有一些細(xì)胞，如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的，則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因?yàn)橐鹊鞍酌敢呀?jīng)被較廣用于貼壁細(xì)胞的消化傳代。血清蛋白形成...

聚合酶鏈反應(yīng)同時(shí)擴(kuò)增單個(gè)精子中幾個(gè)基因座的能力]增強(qiáng)了極大地增強(qiáng)了通過研究減數(shù)分裂后染色體交叉來進(jìn)行基因定位的傳統(tǒng)任務(wù)。通過分析數(shù)千個(gè)單個(gè)精子，已經(jīng)直接觀察到非常緊密基因座之間罕見的交叉事件。類似地，可以分析異常的缺失、插入、易位或倒位，所有這些都無需等待(或...

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)：因?yàn)镻CR擴(kuò)增了目的DNA區(qū)域，所以PCR可以用于分析極少量的樣品。這對于法醫(yī)檢定法，當(dāng)時(shí)只有微量的DNA可作為證據(jù)。聚合酶鏈反應(yīng)也可用于分析古代DNA那已經(jīng)有數(shù)萬年的歷史了。這些基于聚合酶鏈反應(yīng)的技術(shù)已經(jīng)成功地應(yīng)用于動物身上，例如四萬年前猛犸...