冷凍電子顯微鏡技術(shù)之樣品成像:低劑量輻照成像,普通的樣品材料在進(jìn)行TEM表征時(shí),電子劑量越高,成像質(zhì)量越好。但生物樣品受到的輻照損傷卻是和累積的輻照總劑量相關(guān)的。更詳細(xì)一點(diǎn)說(shuō),隨著輻照劑量的增加,輻照損傷對(duì)高分辨細(xì)節(jié)的破壞更嚴(yán)重。因此,為了盡可能地獲得更多的細(xì)...
冷凍電子顯微技術(shù)主要包括單顆粒冷凍電鏡技術(shù)和冷凍電子斷層掃描技術(shù)。單顆粒冷凍電鏡技術(shù)首先捕獲大量隨機(jī)分布的同一種生物樣品的二維圖像,然后通過(guò)圖像處理算法解析其三維結(jié)構(gòu)。近年來(lái),隨著冷凍電鏡設(shè)備和計(jì)算機(jī)軟硬件的快速發(fā)展,特別是隨著直接電子探測(cè)器在冷凍電鏡中的應(yīng)用...
冷凍電鏡技術(shù)也正在成為助力醫(yī)藥研發(fā)的有力手段。依托對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的理解,科學(xué)家正在開(kāi)發(fā)更有效的治Ca藥、打菌素、止痛藥、麻醉劑等。中國(guó)過(guò)去10多年里,建成了世界上較大的冷凍電鏡設(shè)施。中國(guó)的科學(xué)家,也在冷凍電鏡領(lǐng)域取得了很多舉世矚目的成就,引起了世界的普遍關(guān)注。比...
冷凍電子顯微技術(shù)主要包括單顆粒冷凍電鏡技術(shù)和冷凍電子斷層掃描技術(shù)。單顆粒冷凍電鏡技術(shù)首先捕獲大量隨機(jī)分布的同一種生物樣品的二維圖像,然后通過(guò)圖像處理算法解析其三維結(jié)構(gòu)。近年來(lái),隨著冷凍電鏡設(shè)備和計(jì)算機(jī)軟硬件的快速發(fā)展,特別是隨著直接電子探測(cè)器在冷凍電鏡中的應(yīng)用...
冷凍電鏡技術(shù)之冷凍蝕刻電子顯微鏡:冷凍蝕刻電鏡技術(shù)是從50年代開(kāi)始發(fā)展起來(lái)的一種將斷裂和復(fù)型相結(jié)合的制備透射電鏡樣品技術(shù),亦稱(chēng)冷凍斷裂或冷凍復(fù)型,用于細(xì)胞生物學(xué)等領(lǐng)域的顯微結(jié)構(gòu)研究。冷凍蝕刻電鏡的優(yōu)點(diǎn):①樣品通過(guò)冷凍,可使其微細(xì)結(jié)構(gòu)接近于活的狀態(tài);②樣品經(jīng)冷凍...
什么是冷凍電鏡技術(shù)?冷凍電鏡技術(shù),全稱(chēng)是冷凍電子顯微鏡技術(shù),是在低溫下使用透射電子顯微鏡觀察樣品的顯微技術(shù)。冷凍電鏡技術(shù),是一種重要的結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究方法,它與X射線(xiàn)晶體學(xué)、核磁共振一起構(gòu)成了高分辨率結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究的基礎(chǔ)。冷凍電鏡技術(shù)的研究,主要是冷凍成像和蛋白...
單顆粒冷凍電鏡技術(shù)的圖像處理技術(shù):經(jīng)過(guò)多年的發(fā)展,目前冷凍電鏡的數(shù)據(jù)處理部分主要包含了以下的流程:(1)襯度傳遞函數(shù)的修正(CTFcorrection);(2)樣品分子投影數(shù)據(jù)的篩選(particleselection);(3)二維投影數(shù)據(jù)的分類(lèi)和降噪(2Da...
如何區(qū)別真假胎牛血清:沉淀,很多血清客戶(hù),會(huì)發(fā)現(xiàn)進(jìn)口血清有沉淀,從而懷疑血清的質(zhì)量問(wèn)題,這是沒(méi)有根據(jù)的。血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生,對(duì)血清質(zhì)量沒(méi)有任何影響,沉淀的產(chǎn)生原因很多,和廠家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。國(guó)產(chǎn)的血清,大多來(lái)自北方,由于價(jià)格低廉,保存環(huán)...
如果胎牛血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),應(yīng)該如何去除?胎牛血清中的沉淀物出現(xiàn)有很多種原因,但較普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白在胎牛血清解凍后,也會(huì)存在于胎牛血清中,這也是造成沉淀物的主要原因之一。但少量絮狀沉淀物,并不影響胎牛血清本...
胎牛血清制備:用止血鉗夾住血管,切開(kāi)1厘米左右的切口進(jìn)行插管,插好管后打開(kāi)血管的止血鉗,讓牛血順采的血管流入另一個(gè)潔凈房間內(nèi)的瓶中。采的血瓶采的血前經(jīng)干烤滅菌(180℃2小時(shí))后,按無(wú)菌操作注入10毫升左右經(jīng)高壓滅菌的生理鹽水后加塞封口,于采的血前半小時(shí)放入3...
胎牛血清是血液凝固后的液體部分,不含血細(xì)胞、纖維蛋白及凝集因子等,含有多種對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)必需的營(yíng)養(yǎng)因子及大分子物質(zhì)。血清白蛋白是胎牛血清的主要成分。此外,重要的是,胎牛血清中含有大量對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)必需的生長(zhǎng)因子。胎牛血清也含有一些小分子物質(zhì),如氨基酸、糖類(lèi)、脂類(lèi)及Ho...
用于體外細(xì)胞培養(yǎng)的胎牛血清及其制備方法:將已存放血漿的試管置入-20~0℃環(huán)境下保存?zhèn)溆茫粚⒀獫{分離提取胎牛血清,具體步驟如下:取6-12g氯化鈉、0.1-0.5g磷酸二氫鉀和1.4-2.4g磷酸二氫鉀放入容器中,向其中加入300-700mL去離子水,攪拌均勻...
活性炭處理胎牛血清的應(yīng)用:活性炭處理胎牛血清主要用于受體研究和雌Hormone相關(guān)的細(xì)胞研究實(shí)驗(yàn)。同時(shí)活性炭處理胎牛血清極大的降低了多種Hormone和生長(zhǎng)因子,減少了影響細(xì)胞生化分析的干擾因子。性炭處理胎牛血清減少了血清中的類(lèi)固醇類(lèi)化合物,3x100nm無(wú)菌...
如何挑選適合細(xì)胞生長(zhǎng)的胎牛血清?原代或是正常細(xì)胞株建議使用BI特級(jí)胎牛血清,對(duì)生長(zhǎng)條件要求高的細(xì)胞和干細(xì)胞可選用特級(jí)胎牛血清,或胚胎干細(xì)胞胎牛血清。由于血清有批間差異,細(xì)胞種類(lèi)不同,我們建議客戶(hù)購(gòu)買(mǎi)前可先申請(qǐng)?jiān)囉脴悠?,通過(guò)篩選得到滿(mǎn)意的血清批號(hào),之后根據(jù)項(xiàng)目需...
如果胎牛血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),應(yīng)該如何去除?胎牛血清中的沉淀物出現(xiàn)有很多種原因,但較普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白在胎牛血清解凍后,也會(huì)存在于胎牛血清中,這也是造成沉淀物的主要原因之一。但少量絮狀沉淀物,并不影響胎牛血清本...
選購(gòu)FBS應(yīng)考慮哪些標(biāo)準(zhǔn)?產(chǎn)品檢測(cè),每款FBS在生產(chǎn)上市之前,必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)控檢測(cè)。質(zhì)控環(huán)節(jié)必不可少,以確保上市的血清符合規(guī)定合乎規(guī)格,而血清產(chǎn)品分析證書(shū)(COA)就是FBS質(zhì)控的重要體現(xiàn)。在COA中,常規(guī)的檢測(cè)指標(biāo)包括內(nèi)的毒性、總蛋白、細(xì)菌、病毒等,另外總...
如何區(qū)別真假胎牛血清:主要技術(shù)指標(biāo),1、內(nèi)的毒性,標(biāo)準(zhǔn)為不高于5EU/ml。內(nèi)的毒性是細(xì)菌破碎后細(xì)胞壁的成分,因此內(nèi)的毒性含量的高低可表現(xiàn)出采的血到生產(chǎn)一系列過(guò)程中的無(wú)菌操作情況。目前,國(guó)產(chǎn)血清基本都能達(dá)到這一要求,很多進(jìn)口胎牛血清內(nèi)的毒性含量反而更高,只要求...
胎牛血清的生產(chǎn)工藝:透析胎牛血清,顧名思義,需經(jīng)過(guò)透析。它是在4°C下用特定的透析膜對(duì)血清在0.15MNaCl中透析。由于該透析膜只允許10kDa以下的小分子穿過(guò),在滲透壓的作用下,這些小分子便從血清中滲析到透析膜外的NaCl溶液中。10kDa以下的小分子有化...
胎牛血清制備:用止血鉗夾住血管,切開(kāi)1厘米左右的切口進(jìn)行插管,插好管后打開(kāi)血管的止血鉗,讓牛血順采的血管流入另一個(gè)潔凈房間內(nèi)的瓶中。采的血瓶采的血前經(jīng)干烤滅菌(180℃2小時(shí))后,按無(wú)菌操作注入10毫升左右經(jīng)高壓滅菌的生理鹽水后加塞封口,于采的血前半小時(shí)放入3...
胎牛血清:在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程,質(zhì)量粗糙的FBS可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)生長(zhǎng)速度緩慢、不貼壁、容易老化等現(xiàn)象,從而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)受阻。經(jīng)過(guò)質(zhì)量驗(yàn)證的FBS,則可以十分確定這款FBS對(duì)哪些細(xì)胞具有良好的培養(yǎng)效果,進(jìn)而判斷其能否把自己的細(xì)胞養(yǎng)好。對(duì)于質(zhì)量好的FBS,通常采用血清敏感...
胎牛血清FBS的處理方法?胎牛血清FBS一般需要冷凍保存,在-5到-20°C之間,并且可以在2到8°C的溫度下解凍。將血清等分并冷凍在較小的部分(通常為50ml試管)中通常很有用,以避免多次冷凍和解凍循環(huán)。有時(shí),一些FBS等分試樣在冷凍溫度下仍保留在液體中。這...
胎牛血清-血清的主要成分:血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)物等...
胎牛血清:胎牛血清(FBS),胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。1、性狀、外觀淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。2、蛋白質(zhì)含量...
如果胎牛血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),應(yīng)該如何去除?胎牛血清中的沉淀物出現(xiàn)有很多種原因,但較普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白在胎牛血清解凍后,也會(huì)存在于胎牛血清中,這也是造成沉淀物的主要原因之一。但少量絮狀沉淀物,并不影響胎牛血清本...
如何區(qū)別真假胎牛血清:主要技術(shù)指標(biāo),1、內(nèi)的毒性,標(biāo)準(zhǔn)為不高于5EU/ml。內(nèi)的毒性是細(xì)菌破碎后細(xì)胞壁的成分,因此內(nèi)的毒性含量的高低可表現(xiàn)出采的血到生產(chǎn)一系列過(guò)程中的無(wú)菌操作情況。目前,國(guó)產(chǎn)血清基本都能達(dá)到這一要求,很多進(jìn)口胎牛血清內(nèi)的毒性含量反而更高,只要求...
胎牛血清的功能:胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量較大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的Hormone,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白,能...
胎牛血清:解凍胎牛血清時(shí),請(qǐng)按照規(guī)定的的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若胎牛血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍胎牛血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。請(qǐng)勿將胎牛血清置于37℃太久。若...
胎牛血清:解凍胎牛血清時(shí),請(qǐng)按照規(guī)定的的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若胎牛血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍胎牛血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。請(qǐng)勿將胎牛血清置于37℃太久。若...
血清中絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?1.將冷凍保存的血清取出后,置4℃冰箱靜止過(guò)夜;2.待血清融化后,上下顛倒,輕輕混勻,繼續(xù)4℃2-3小時(shí);3.輕輕吸取上層血清,分裝,余底下50ml左右;4.低速離心5分鐘,去掉沉淀。若解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該怎么處...
胎牛血清的生產(chǎn)工藝:胎牛血清適合脈沖示蹤實(shí)驗(yàn)(同位素標(biāo)記研究細(xì)胞代謝)適合轉(zhuǎn)染CHO后的篩選,避免外源小分子對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生干擾。透析胎牛血清是在胎牛血清的基礎(chǔ)上進(jìn)行加工的。胎牛血清在無(wú)菌條件下要經(jīng)過(guò)0.1微米膜三重過(guò)濾,要進(jìn)行一系列的檢測(cè),包括理化性質(zhì)檢查(如滲透...