聚合酶鏈式反應(yīng)的試驗污染：陽性對照：在建立PCR反應(yīng)實驗室及一般的檢驗單位都應(yīng)設(shè)有PCR陽性對照，它是PCR反應(yīng)是否成功、產(chǎn)物條帶位置及大小是否合乎理論要求的一個重要的參考標志。陽性對照要選擇擴增度中等、重復性好，經(jīng)各種鑒定是該產(chǎn)物的標本，如以重組質(zhì)粒為陽性對...

現(xiàn)有技術(shù)中的在體光纖成像記錄系統(tǒng)仍包含多根多模光纖，若待成像物體所處環(huán)境的空間較窄，可能會導致該光纖成像系統(tǒng)中的多根多模光纖無法進入待成像物體所處環(huán)境，也就無法獲取到待成像物體的圖像，導致光纖成像系統(tǒng)的適用范圍較窄。提供的光纖成像系統(tǒng)靠近待成像物體一側(cè)只包含一...

序列標簽站點是一個過程，其中PCR被用作基因組的特定片段存在于特定克隆中的指示物。人類基因組計劃發(fā)現(xiàn)這一應(yīng)用對于繪制他們測序的粘?？寺∫约皡f(xié)調(diào)不同實驗室的結(jié)果至關(guān)重要。聚合酶鏈反應(yīng)的一個令人興奮的應(yīng)用是對來自遠古來源的DNA進行系統(tǒng)進化分析，例如在尼安德特人的...

細胞培養(yǎng)是很多下游實驗的基礎(chǔ)，細胞培養(yǎng)的好壞會直接影響后續(xù)實驗的成功和穩(wěn)定，而胎牛血清作為細胞培養(yǎng)的主要試劑對實驗的重要性不言而喻！胎牛血清是細胞培養(yǎng)中常用的天然培養(yǎng)基，因為胎牛未進食過母乳，所以IgG含量低，且含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份，故目前多數(shù)實驗...

在體光纖成像記錄直接標記法不涉及細胞的遺傳修飾，標價能夠在體外培養(yǎng)時主動與細胞結(jié)合，也可以將標記直接注射到動物體內(nèi)，間接標記法，將報告基因引入細胞，并翻譯成酶、受體、熒光或生物發(fā)光蛋白如果報告基因的表達是穩(wěn)定的，標記的細胞可以在整個細胞的生命周期中被觀察到。由...

較為低血清試驗的要求。內(nèi)有毒的檢測：內(nèi)有毒的，又叫脂多糖（LPS）或脂寡糖（LOS），存在于革蘭氏陰性菌的細胞外膜。臨床上，內(nèi)有毒的作為一些革蘭氏陰性菌的診斷提示，如腦膜炎球菌。動物體內(nèi)，內(nèi)有毒的能夠?qū)е掳l(fā)熱或者誘導炎癥反應(yīng)；細胞培養(yǎng)中，內(nèi)有毒的能夠誘導細胞反...

在體光纖成像記錄和傳統(tǒng)的體外成像或細胞培養(yǎng)相比有著明顯優(yōu)點。首先，在體光纖成像記錄能夠反映細胞或基因表達的空間和時間分布，從而了解活的物體動物體內(nèi)的相關(guān)生物學過程、特異性基因功能和相互作用。由于可以對同一個研究個體進行長時間反復查看成像，既可以進步數(shù)據(jù)的可比性...

逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)的原理是：提取組織或細胞中的總RNA，以其中的mRNA作為模板，采用Oligo（dT）或隨機引物利用逆轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄成cDNA。再以cDNA為模板進行PCR擴增，而獲得目的基因或檢測基因表達。完整RNA 的提取和純化，是進行RNA 方面的研究...

隨著熒光標記技術(shù)和光學成像技術(shù)的發(fā)展, 在體生物光學成像（In vivo optical imaging）已經(jīng)發(fā)展 為一項嶄新的分子、 基因表達的分析檢測技術(shù)，在 生命科學、 醫(yī)學研究及藥物研發(fā)等領(lǐng)域得到較多應(yīng)用, 主要分為在體生物發(fā)光成像（Biolumine...

在體光纖成像記錄是了解生物體組織結(jié)構(gòu)，闡明生物體各種生理功能的一種重要研究手段。它利用光學或電子顯微鏡直接獲得生物細胞和組織的微觀結(jié)構(gòu)圖像，通過對所得圖像的分析來了解生物細胞的各種生理過程。近年來，隨著光學成像技術(shù)的發(fā)展，尤其是數(shù)字化成像技術(shù)和計算機圖像分析技...

在體光纖成像記錄人類大量的復雜行為主要取決于上千億個神經(jīng)元組成的精確神經(jīng)環(huán)路，而神經(jīng)環(huán)路的建立依賴于神經(jīng)元之間突觸連接的形成。突觸是神經(jīng)元交流的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)，只有通過突觸連接，神經(jīng)元之間以及神經(jīng)元和靶向細胞（包括肌肉，腺體分析的細胞）才能有效的傳遞信號，因此突觸連...

聚合酶鏈式反應(yīng)的常見問題：PCR產(chǎn)物的電泳檢測時間一般為48h以內(nèi)，有些很好于當日電泳檢測，大于48h后帶型不規(guī)則甚至消失。假陰性：不出現(xiàn)擴增條帶。PCR反應(yīng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)有模板核酸的制備，引物的質(zhì)量與特異性，酶的質(zhì)量及溴乙錠的使用， PCR循環(huán)條件。尋找原因亦應(yīng)...

聚合酶鏈反應(yīng)：嵌套聚合酶鏈反應(yīng):通過減少DNA非特異性擴增的背景，提高DNA擴增的特異性。兩組引物用于兩個連續(xù)的PCR。在個反應(yīng)中，一對引物用于產(chǎn)生DNA產(chǎn)物，除了預期的靶之外，該產(chǎn)物可能仍然由非特異性擴增的DN段組成。然后用一組引物將產(chǎn)物用于第二次聚合酶鏈反...

在體光纖成像記錄的工作原理是將光源入射的光束經(jīng)由光纖送入調(diào)制器，在調(diào)制器內(nèi)與外界被測參數(shù)的相互作用， 使光的光學性質(zhì)如光的強度、波長、頻率、相位、偏振態(tài)等發(fā)生變化，成為被調(diào)制的光信號，再經(jīng)過光纖送入光電器件、經(jīng)解調(diào)器后獲得被測參數(shù)。整個過程中，光束經(jīng)由光纖導入...

在體光纖成像記錄是了解生物體組織結(jié)構(gòu)，闡明生物體各種生理功能的一種重要研究手段。它利用光學或電子顯微鏡直接獲得生物細胞和組織的微觀結(jié)構(gòu)圖像，通過對所得圖像的分析來了解生物細胞的各種生理過程。近年來，隨著光學成像技術(shù)的發(fā)展，尤其是數(shù)字化成像技術(shù)和計算機圖像分析技...

聚合酶鏈式反應(yīng)準備：PCR所用的酶主要有兩種來源：Taq和Pfu，分別來自兩種不同的噬熱菌。其中Taq擴增效率高但易發(fā)生錯配。Pfu擴增效率弱但有糾錯功能。所以實際使用時根據(jù)需要必須做不同的選擇。模板即擴增用的DNA，可以是任何來源，但有兩個原則，純度必須較高...

在體光纖成像記錄的優(yōu)點及應(yīng)用：低能量、無輻射、對信號檢測靈敏度高、實時監(jiān)測標記的生物體內(nèi)細胞活動和基因行為被較多應(yīng)用于監(jiān)控轉(zhuǎn)基因的表達、基因療于、染上的進展、壞掉的的生長和轉(zhuǎn)移、系統(tǒng)移植、毒理學、病毒染上和藥學研究中?？梢姽獬上竦闹饕秉c：二維平面成像、不能對...

小動物在體光纖成像記錄圖像處理軟件除了提供含有光子強度標尺的成像圖片外，還能計算分析發(fā)光面積、總光子數(shù)、光子強度的相關(guān)參數(shù)供實驗者參考。原則上，如預實驗時拍攝出圖片非特異性雜點多，需降低曝光時間；反之，如信號過弱可適當延長曝光時間。但曝光時間的延長，不單增加了...

聚合酶鏈反應(yīng)的常見問題分析與解決方法：無擴增條帶：酶失活或在反應(yīng)體系中未加入酶。Taq DNA聚合酶因保存或運輸不當而失活，往往通過更換新酶或用另一來源的酶以獲得滿意的結(jié)果。模板含有雜質(zhì)。特別是對甲醛固定及石蠟包埋的組織常含甲酸，造成DNA脫嘌呤而影響PCR的...

很好的胎牛血清：微生物，包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原毒等。隨著國內(nèi)血清廠家生產(chǎn)條件的改善提高，細菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制，支原體經(jīng)過0.1μm過濾，大多也能消除。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴重的，主要是生產(chǎn)環(huán)境過程中帶入，又無法...

聚合酶鏈式反應(yīng)：定量PCR允許實時定量和檢測特定的DNA序列，因為它在合成過程中測量濃度。有兩種方法可以同時檢測和定量。種方法是使用在DNA雙鏈之間非特異性保留的熒光染料。第二種方法涉及編碼特定序列并被熒光標記的探針。只有在探針與其互補DNA雜交后，才能使用這...

添加胎牛血清的時候要注意避免把沉淀加入培養(yǎng)液，因為如果培養(yǎng)液有沉淀的存在，會使得其中培養(yǎng)的細胞產(chǎn)生大量的黑點，除此之外，細胞的表面還很可能會覆蓋一層油狀物質(zhì)，總之出現(xiàn)這樣的情況會極其不利于細胞的正常生長。那么為了較為大程度減少血清的損失，可以把所有有沉淀的血清...

小動物在體光纖成像記錄具有靈敏度高、直觀、操作簡單、能同時觀測多個實驗標本，相比 PET、SPECT 無放射損害等優(yōu)點，但也有其自身的缺陷，例如動物組織對光子吸收、空間分辨率較低等問題，因而仍需不斷地完善和改進。小動物活的物體成像按成像性質(zhì)屬于功能成像，如何能...

在體光纖成像記錄就是生物樣本的造影技術(shù)，依照樣本尺度大小可以概分為組織造影與細胞分子的顯微技術(shù)。這些大致都需要光學技術(shù)配合生物樣本的特性發(fā)展，少數(shù)會使用光以外的波動性質(zhì)將圖像光信號變?yōu)殡娦盘柕钠骷?，它是利用少?shù)載流子的注入、存儲和轉(zhuǎn)移等物理過程來完成幾種電路功...

很好的胎牛血清對細胞成長的作用：提供細胞生長所需的天然或天然的生長因子。提供天然的結(jié)合蛋白，能識別氨基酸、脂質(zhì)、金屬離子和等，能結(jié)合并調(diào)節(jié)它們的活性。已知清蛋白即具有上述功能，并對細胞代謝、生物合成、增殖和存活具有潛在的影響。又如胎牛血清中富含胎球蛋白，具有多...

在體光纖成像記錄人類大量的復雜行為主要取決于上千億個神經(jīng)元組成的精確神經(jīng)環(huán)路，而神經(jīng)環(huán)路的建立依賴于神經(jīng)元之間突觸連接的形成。突觸是神經(jīng)元交流的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)，只有通過突觸連接，神經(jīng)元之間以及神經(jīng)元和靶向細胞（包括肌肉，腺體分析的細胞）才能有效的傳遞信號，因此突觸連...

胎牛血清：八月齡胎牛心臟穿刺取血；新生牛血清：出生12-24小時新生牛靜脈;又可細分為：a.高級新生牛血清：后靜置自然析出的血清;b.標準新生牛血清：c.經(jīng)離心分離的血清;d.普通新生牛血清：融血或微融血的血清；小牛血清：出生三月齡小牛動脈分離血清；血清是血漿...

聚合酶鏈式反應(yīng)準備：PCR所用的酶主要有兩種來源：Taq和Pfu，分別來自兩種不同的噬熱菌。其中Taq擴增效率高但易發(fā)生錯配。Pfu擴增效率弱但有糾錯功能。所以實際使用時根據(jù)需要必須做不同的選擇。模板即擴增用的DNA，可以是任何來源，但有兩個原則，純度必須較高...

聚合酶鏈反應(yīng)允許快速生產(chǎn)短DN段，即使已知的引物序列不超過兩個。聚合酶鏈反應(yīng)的這種能力增強了許多方法，例如生成雜交 探針用于 Southern 或northern blot 雜交。聚合酶鏈反應(yīng)為這些技術(shù)提供了大量的純DNA，有時是單鏈的，甚至可以從非常少量的起...

聚合酶鏈反應(yīng)：在檢測病原體方面,病原體培養(yǎng)是臨床診斷的金標準 .但是對于一些苛養(yǎng)菌 生長緩慢的細菌或難以培養(yǎng)的病原體等培養(yǎng)的陽性檢出率不高.檢測時間過長 無法滿足臨床早期快速診斷以指導醫(yī)治的需要[3]。當前 PCR 技術(shù)是在傳統(tǒng) PCR 技術(shù)應(yīng)用的基礎(chǔ)上進行的...