膜片鉗實驗常見問題及解決方法：膜片鉗實驗難度大、技術要求高，要掌握有關技術和方法雖不是很困難的事，但要從一大批的實驗數(shù)據(jù)中，經(jīng)過處理和分析，得出有意義、有價值的結果和結論，就顯得不那么容易，有許多需要注意和考慮的問題，包括減少噪音，避免電極前端的污染，提高封接...

在體光纖成像記錄系統(tǒng)在外泌體研究中的應用，細胞外囊泡，是來源于細胞的脂質(zhì)雙層包裹的納米囊泡。外泌體是來源于細胞的脂質(zhì)雙層包裹的納米囊泡。外泌體特性的影響還沒有完全闡明，也缺乏對不同儲存條件的對比評價。在自由活動動物的深部腦區(qū)實現(xiàn)光信號記錄和神經(jīng)細胞活性調(diào)控；高...

聚合酶鏈式反應（PCR）是一種用于放大擴增特定的DN段的分子生物學技術，它可看作是生物體外的特殊DNA復制，PCR的很大特點是能將微量的DNA大幅增加。因此，無論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸，還是幾十年前兇殺案中兇手所遺留的毛發(fā)、皮膚或血液，只要能分離出一...

胎牛血清與其它牛血清有何區(qū)別？根據(jù)牛出生時間和血清采集分離方法分為：胎牛血清：胎牛血清是指懷孕3-8個月的母牛被屠宰后，發(fā)育未完全的胎牛心臟密閉穿刺后，通過一系列工藝處理較為終獲得。此時胎牛血中含有特殊的生長發(fā)育因子，一旦胚胎發(fā)育完全這些因子會自動消失。新生牛...

膜片鉗的數(shù)據(jù)如何處理：1）細胞吸附式膜片(cell attached patch)是膜片鉗的基本方式,其它方式由此衍生。這種膜片形式比較穩(wěn)定因細胞骨架及有關代謝過程是完整的,故對細胞結構和環(huán)境干擾比較小。但這種膜片形式易在電極形成囊泡,從而細胞骨架可能有所變化...

膜片鉗芯片技術是繼細胞芯片之后的又一種嶄新的分析細胞電生理參數(shù)的芯片技術.由于該芯片除了具有傳統(tǒng)膜片鉗的高分辨和高準確性特點外,還具有高通量、自動化以及細胞多通道參數(shù)和細胞網(wǎng)絡參數(shù)在線和實時檢測等優(yōu)點.因此,該芯片技術將很大促進細胞離子通道、細胞網(wǎng)絡傳導以及藥...

傳統(tǒng)成像大多依賴于肉眼可見的身體、生理和代謝過程在疾病狀態(tài)下的變化，而不是了解疾病的特異性分子事件；在體光纖成像記錄則是利用在體光纖成像記錄目標并成像。這種從非特異性成像到特異性成像的變化，為疾病生物學、疾病早期檢測、定性、評估和療于帶來了重大的影響。分子成像...

如何解凍血清？血清解凍需采用逐步解凍法：將血清從-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解，然后移入室溫，待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻（小心勿造成氣泡），減少沉淀生成。切勿直接將血清從-20℃轉(zhuǎn)入37℃解凍，這樣因溫差較大易造成蛋白質(zhì)凝結并出現(xiàn)沉淀。...

在體光纖成像記錄的根本缺點是光的組織穿透率低。由于吸收和散射，熒光發(fā)射的可見光譜中的光只能穿透幾百微米的組織。這個問題限制了大多數(shù)光學方法在小動物或人類表面結構研究中的應用。使用近紅外光譜能夠提高信號的組織穿透能力，并能降低了組織的自體熒光。在體外將熒光探針與...

購買回來的血清都是冰凍狀態(tài),使用時需要融化,融化過程在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進行,待溶解完成,我們觀察到的胎牛血清會表現(xiàn)出黃色或紅色。并不是越紅越好,也不是越黃越好,淡黃色到淡紅色才是比較正常的顏色范圍。很多培養(yǎng)細胞的寶寶會發(fā)現(xiàn)進口血清有沉淀,從而懷疑血清的質(zhì)量...

膜片鉗實驗系統(tǒng)：根據(jù)不同的電生理實驗要求，可以組建不同的實驗系統(tǒng)，但有若干共同的基本部件，包括機械部分（防震工作臺、屏蔽罩、儀器設備架）、光學部分（顯微鏡、視頻監(jiān)視器、單色光系統(tǒng)）、電子部件（膜片鉗放大器、刺激器、數(shù)據(jù)采集的設備、計算機系統(tǒng)）和微操縱器在大多數(shù)...

膜片鉗使用的基本方法是，把經(jīng)過加熱拋光的玻璃微電極在液壓推進器的操縱下，與清潔處理過的細胞膜形成高阻抗封接，導致電極內(nèi)膜片與電極外的膜在電學上和化學上隔離起來膜片鉗技術實現(xiàn)的關鍵是建立高阻抗封接，并能通過特定的記錄儀器反映這些變化，記錄數(shù)據(jù)的過程，都需要細胞保...

聚合酶鏈式反應的常見問題：靶序列變異：如靶序列發(fā)生突變或缺失，影響引物與模板特異性結合，或因靶序列某 段缺失使引物與模板失去互補序列，其PCR擴增是不會成功的。假陽性：出現(xiàn)的PCR擴增條帶與目的靶序列條帶一致，有時其條帶更整齊，亮度更高。引物設計不合適：選擇的...

聚合酶鏈式反應的常見問題：陰性：需注意的是有時忘加Taq酶或溴乙錠。引物：引物質(zhì)量、引物的濃度、兩條引物的濃度是否對稱，是PCR失敗或擴增條帶不理想、容易彌散的常見原因。有些批號的引物合成質(zhì)量有問題，兩條引物一條濃度高，一條濃度低，造成低效率的不對稱擴增，對策...

胎牛血清作為動物細胞培養(yǎng)基中的關鍵組分之一，在動物細胞培養(yǎng)中占據(jù)重要地位。胎牛血清是在封閉的屠宰機構對未發(fā)育完全的胎牛的心臟穿刺取血而獲取的牛血清制品，牛血清制品隨著取血對象的年齡變化可分為胎牛血清，新生牛血清以及（成年）牛血清，血清的成分及含量會隨年齡變化。...

膜片鉗使用的注意事項：1.向玻璃微電極灌注內(nèi)液時切勿灌太多（1cm左右為適），以防液體進入銀絲底部增加噪聲。2.安裝玻璃微電極時，電極應與銀絲平行，防止刮蹭銀絲電極。3.玻璃微電極需先用甲醇浸泡，再用酒精燈微燒兩端，使其平滑。4.換液時應時刻觀察浴槽，防止液面...

一種提高膜片鉗實驗效率的方法與流程：膜片鉗技術是一種記錄通過離子通道的離子電流來反映細胞膜上離子通道分子活動的技術。是用來研究單個離體的活細胞、組織切片或細胞膜片離子流的電生理實驗技術。這項技術在可興奮細胞如神經(jīng)元、心肌細胞、肌纖維和胰腺細胞的研究中起至關重要...

膜片鉗使用的注意事項：1.為了防止塵埃、靜電傷害機器，每天做實驗前請用清水拖地。2.拉制儀使用前需預熱15-30min。3.銀絲電極及地線發(fā)白時，請先用砂紙輕微打磨，再浸入新鮮的次氯酸鈉溶液鍍氯化銀，如果銀絲電極30min未變黑，則考慮更換次氯酸鈉。4.先開放...

聚合酶鏈式反應：Taq(水生棲熱菌)聚合酶耐熱DNA聚合酶的很好活性溫度約為75-80°C(167-176°F),盡管該酶通常使用72°C(162°F)的溫度。在該步驟中，DNA聚合酶通過從反應混合物中添加在5’-至-3’方向上與模板互補的游離DNA鏈來合成與...

膜片鉗技術及其應用：它是作者在\"膜片鉗技術及其應用\"領域所進行的研究工作的總結，同時也吸取了國際上的先進技術和新近的研究成果。內(nèi)容包括:細胞電生理與膜片鉗技術，膜片鉗系統(tǒng)的組建及實驗技術概要，膜片鉗放大器原理與低噪聲設計，單通道和全細胞電流記錄技術，數(shù)據(jù)采...

膜片鉗技術的基本原理和方法：膜片鉗使用的基本方法是，把經(jīng)過加熱拋光的玻璃微電極在液壓推進器的操縱下，與清潔處理過的細胞膜形成高阻抗封接，導致電極內(nèi)膜片與電極外的膜在電學上和化學上隔離起來，由于電性能隔離與微電極的相對低電阻（1～5MΩ），只要對微電極施以電壓就...

膜片鉗使用的基本方法是，把經(jīng)過加熱拋光的玻璃微電極在液壓推進器的操縱下，與清潔處理過的細胞膜形成高阻抗封接，導致電極內(nèi)膜片與電極外的膜在電學上和化學上隔離起來膜片鉗技術實現(xiàn)的關鍵是建立高阻抗封接，并能通過特定的記錄儀器反映這些變化，記錄數(shù)據(jù)的過程，都需要細胞保...

如何解凍血清？血清解凍需采用逐步解凍法：將血清從-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解，然后移入室溫，待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻（小心勿造成氣泡），減少沉淀生成。切勿直接將血清從-20℃轉(zhuǎn)入37℃解凍，這樣因溫差較大易造成蛋白質(zhì)凝結并出現(xiàn)沉淀。...

膜片鉗操作實驗：標本制備根據(jù)研究目的的不同，可采用不同的細胞組織，如心肌細胞、平滑肌細胞、細胞等，現(xiàn)在幾乎可對各種細胞進行膜片鉗的研究。對所采用的細胞，必須滿足實驗要求，一般多采用酶解分離法，也可采用細胞培養(yǎng)法；另外，由于與分子生物學技術的結合，現(xiàn)在也運用分子...

在體光纖成像記錄成像系統(tǒng)是典型的在體熒光成像系統(tǒng), 主要 CCD 相機、 成像暗箱、 激光器、 激發(fā)和發(fā)射 濾光片、 恒溫臺、 氣體麻醉系統(tǒng)、數(shù)據(jù)采集的計算機、 數(shù)據(jù)處理軟件等組成。將小動物放置到成像暗箱中, 利用高性能的制冷對活的物體小動物某個特定位置的發(fā)光...

血清的保存應該注意：血清中的沉淀物、絮狀物：主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成，這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量，可用離心3000rpm，5分鐘去除，也可不用處理，顯微鏡下"小黑點"。經(jīng)過熱處理過的血清，沉淀物的形成會明顯增多。有些沉淀物在顯微...

除了對血清進行檢測，有何更直觀的方式分辨血清質(zhì)量？目測法，我們可根據(jù)血清的顏色，沉淀，澄清度等進行區(qū)分。顏色：顏色根據(jù)血清蛋白含量的不同，可表現(xiàn)出黃色或者紅色。進口血清質(zhì)量較為好的呈現(xiàn)出淡黃、微紅色，較差質(zhì)量呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。熱滅清或保存不當?shù)?，由于血紅蛋...

胎牛血清作為動物細胞培養(yǎng)基中的關鍵組分之一，在動物細胞培養(yǎng)中占據(jù)重要地位。胎牛血清是在封閉的屠宰機構對未發(fā)育完全的胎牛的心臟穿刺取血而獲取的牛血清制品，牛血清制品隨著取血對象的年齡變化可分為胎牛血清，新生牛血清以及（成年）牛血清，血清的成分及含量會隨年齡變化。...

聚合酶鏈式反應的常見問題：PCR產(chǎn)物的電泳檢測時間一般為48h以內(nèi)，有些很好于當日電泳檢測，大于48h后帶型不規(guī)則甚至消失。假陰性：不出現(xiàn)擴增條帶。PCR反應的關鍵環(huán)節(jié)有模板核酸的制備，引物的質(zhì)量與特異性，酶的質(zhì)量及溴乙錠的使用， PCR循環(huán)條件。尋找原因亦應...

血清的安全風險因素主要有以下方面：地理因素，地理因素包括血清產(chǎn)地的流行病學趨勢、基礎設施情況以及血源供應量。措施得當可以預防能避免的動物疾病，同時產(chǎn)地國穩(wěn)定可靠的基礎設施，對保證供應鏈的安全也十分必要。血源是否充足則決定了血清是否可源源不斷地持續(xù)供應。生產(chǎn)，生...