超濾作為一種膜分離技術,普遍應用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換,其原理是溶液在力的作用下,通過超濾膜孔徑的篩濾,大分子量的顆粒被截留下來,而水、溶劑和低分子量溶質(zhì)則允許透過膜,從而達到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的,這種方法較大的特點是操作簡便、快速、高效,可同時濃縮和純化分子。如何使用超濾心離心管?1. 使用角轉(zhuǎn)子加到超濾裝置上,較大樣本量為15 毫升(Anavo Ultra-15)。2. 將帶蓋過濾裝置放入離心機轉(zhuǎn)子內(nèi); 用一個類似的裝置來平衡。3. 使用定角轉(zhuǎn)子時,將薄膜面板朝上定位,較大旋轉(zhuǎn) 5000 xg,旋轉(zhuǎn) 30 分鐘。4. 為了回收濃縮的溶質(zhì),在過濾裝置的底部插入一個移液管,...
當濃縮到剩下1ml時,取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測,繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀,導致堵管。若發(fā)生沉淀,要確定沉淀的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,后者的方法是換不同的緩沖溶液,直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。超濾離心管可以用于分離提取動植物組織中的DNA、RNA等...
超濾是大分子脫鹽、濃縮較方便的方法,重復性好,得率有保障,已經(jīng)在蛋白、抗體、病毒、核酸、囊泡等樣品制備中建立標準操作;在目前大熱的外泌體制備中也已經(jīng)成為主流方法。超濾管采用離心方式快速處理樣品,是很多科研小伙伴們每天要用到的基本裝備。但是,在默克生命科學團隊推出超濾管中文說明書(AU0.5/4/15)之前,我們發(fā)現(xiàn)近90%的使用者在選擇和使用過程中因為缺乏必要信息而沒有獲得較佳體驗,更重要的是,寶貴的樣本會遭受本可避免的損失!如果目的蛋白是120kDa,請問應該選擇的超濾管規(guī)格是100k,50k,還是30k甚至10k?你采用的是1/2,1/3抑或1/6算法?這些沒有統(tǒng)一的說法,是因為不同廠家的...
超濾離心管使用注意事項:(1)選擇合適的超濾管。通常應截留分子量不應大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質(zhì)的耐受程度有所不同。2)新買來的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。(3)平衡。質(zhì)量和重心二者都要達到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機...
A(聚酰胺):這種材質(zhì)是PP和PE材質(zhì)的聚合物,半透明,化學性質(zhì)非常穩(wěn)定,單不耐高溫。PF(聚氟):半透明,可以低溫使用,如果是-100℃-140℃下的實驗環(huán)境,就可以用這種材質(zhì)的離心管。CAB(醋酸丁酯纖維素):透明,可用于較稀的酸、堿、鹽,以及酒精、蔗糖的梯度測定。PS(聚苯乙烯):透明,硬度大,對大多數(shù)的水溶液穩(wěn)定,但是會被多種有機物腐蝕,多用于低速離心,而且一般是一次性使用。離心管分類:按材質(zhì)可分:塑料離心管、玻璃離心管和不銹鋼離心管等。按速度可分:低速離心管和高速離心管。按容量可分:微量離心管、小容量離心管和大容量離心管。一般稱容量大于100mL的離心管為離心瓶。超濾離心管還可用于制...
超濾管產(chǎn)品系列包括5種不同的截留分子量(即標稱分子量限值, NMWL)。這些超濾管只供研究使用,不適用于診斷程序。1).濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(DNA/RNA樣本,單鏈或雙鏈)、噬菌體等微生物樣本。2).純化組織培養(yǎng)提取液或細胞裂解液中的大分子成分,去除反應液中的引物、接頭或分子標記,在HPLC前去除蛋白質(zhì)。3).除鹽,緩沖液更換,或滲濾。超濾管提供了兩個微量離心管。在操作過程中,一個用于收集濾出液,而另一個用于回收濃縮后的樣本。超濾管的超濾膜含有微量甘油。如果擔心干擾后續(xù)分析,可用緩沖液或Milli-Q水進行預清洗。如果干擾仍然存在,可用0.1M NaOH清洗,再用緩沖液或Milli-...
玻璃離心管,大家都知道,玻璃是很容易碎的,所以如果我們選擇玻璃離心管時,離心機的離心力一定不能調(diào)得很高,還需要將玻璃離心管墊上橡膠墊,避免破碎,玻璃離心管的優(yōu)點是管體透明,利于觀察分離情況。鋼制離心管,鋼制離心管硬度大、抗熱、抗凍、不變形等優(yōu)點被普遍應用,一般鋼制離心管都會循環(huán)使用。離心管盡量選擇pp材質(zhì)的塑料離心管,也可以選鋼制的,玻璃材質(zhì)因為其容易破碎,分離轉(zhuǎn)速要求高,需將轉(zhuǎn)速控制在2000rpm/min內(nèi),所以通常情況下不做選擇。離心管的選擇還可以根據(jù)自己所分離樣品的大小來決定是選擇微量離心管、普通離心管、大容量離心管還是離心瓶。超濾離心管是一種用于分離和濃縮生物樣品的實驗室設備。成都蛋...
超濾是大分子脫鹽、濃縮較方便的方法,重復性好,得率有保障,已經(jīng)在蛋白、抗體、病毒、核酸、囊泡等樣品制備中建立標準操作;在目前大熱的外泌體制備中也已經(jīng)成為主流方法。超濾管采用離心方式快速處理樣品,是很多科研小伙伴們每天要用到的基本裝備。但是,在默克生命科學團隊推出超濾管中文說明書(AU0.5/4/15)之前,我們發(fā)現(xiàn)近90%的使用者在選擇和使用過程中因為缺乏必要信息而沒有獲得較佳體驗,更重要的是,寶貴的樣本會遭受本可避免的損失!如果目的蛋白是120kDa,請問應該選擇的超濾管規(guī)格是100k,50k,還是30k甚至10k?你采用的是1/2,1/3抑或1/6算法?這些沒有統(tǒng)一的說法,是因為不同廠家的...
超濾離心管可以滅菌嗎?1. 超濾離心管使用75%的乙醇消毒。2. 不能121℃滅菌,否則會變形,不論是是密理博、頗爾還是賽多利斯的都不能。3. 超濾管應當干燥保存,買回來的時候就是干的。當然也可以濕潤保存,但是應當保存在20%的乙醇中,是為了防止沒洗去的殘留的液體長菌堵膜。4. 有人說濕潤保存不能干,指的是卷式和板式超濾膜。離心管是一個簡單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。超濾離心管會有一個類似于內(nèi)管和外管的兩個部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內(nèi)管中),就是超濾的原理.常用于濃...
超濾離心管是內(nèi)部裝有超濾膜的用于濃縮和凈化生物樣本的一次性耗材。15ML的超濾離心管可處理樣品量達20ML,具有快速超過濾功能,能夠達到較高的濃縮系數(shù),易于從稀釋液和復雜的樣本組合進行濃縮液回收。豎式設計以及其雙面的超大過濾面積能提供快速的樣本處理和較高的樣本回收率(通常大于90%稀薄的初始溶液),并能進行80倍濃縮。典型的處理時間為15至40分鐘。豎式設計將溶質(zhì)極化和之后造成的濾膜結(jié)垢降至低,過濾裝置中的物理止濾點防止過濾器旋轉(zhuǎn)過度使樣本干燥和造成樣本損失。濃縮液用移液管從過濾器的樣本槽中收集,而超過濾濾出液則收集到所提供的離心管中。該裝置可在擺桶或定角轉(zhuǎn)子中旋轉(zhuǎn)。的離心管有超過7種不同的截...
超濾離心管只需5到15分鐘,即可對50到500L樣本進行簡便、可靠的濃縮與脫鹽處理:快速處理樣本。通常,回收率高于90%;備有低蛋白質(zhì)結(jié)合的Omega、Bio-Inert或GHP濾膜可供選擇。對應各種截留分子量,備有各種編碼以供輕松識別的顏色可供選擇。結(jié)構(gòu)材料為低結(jié)合聚丙烯。超聲焊接密封,防止側(cè)流或密封不嚴。適用于配合1.5mL試管的標準離心轉(zhuǎn)子。超濾離心管通常不需要預處理即可使用,不過對于蛋白質(zhì)樣本處理,特別是較稀的蛋白質(zhì)溶液來說(90%),并達到30倍的濃縮。產(chǎn)品特點:超濾離心管設計用于體外診斷,包括分析濃縮血清、尿液、腦脊液和其他體液;*內(nèi)附膜可高效回收分子量范圍的有效成分;*截留回收率...
離心管主要有塑料、不銹鋼制成,塑料離心管常用資料有聚丙烯(PP).聚乙烯(PE),聚碳酸酯(PC)等。其中PP管性能較好,塑料離心管的優(yōu)點是透明(或半透明),硬度小,可用穿刺法取出梯度,缺陷是易變形,抗有機溶劑腐蝕性差,運用壽命短;不銹鋼離心管強度大,不變形,能抗凍,抗熱,抗化學腐蝕,但用時要防止接觸強腐蝕性的化學藥品、如強酸、強堿等化學試劑。這里主要介紹塑料離心管:塑料離心管都有管蓋,離心前管蓋必需蓋嚴,倒置不漏液。管蓋有三種作用:①避免樣品外泄,用于有放射性或強腐蝕性的樣品時②避免樣品揮發(fā)③支持離心管,避免離心管變形。超濾離心管可以用于制備高純度的細胞培養(yǎng)基,以進行細胞培養(yǎng)和生長實驗。山東...
超濾離心管,備有四種材質(zhì)的超濾膜:聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據(jù)不同要求靈活選用。 使用注意事項 (1)選擇合適的超濾管。通常應截留分子量不應大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質(zhì)的耐受程度有所不同。 (2)新買來的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷...
脫鹽、更換緩沖液或滲濾是從含有生物分子的溶液中去除鹽分或溶劑的重要方法。鹽分去除或緩沖液更換可通過超濾管來完成,具體過程是濃縮樣本,棄去濾出液,然后向濃縮液中加入任何所需的溶劑,恢復到樣本原先的體積。"洗出"的過程可反復進行,直到雜質(zhì)的濃度被充分降低。關于超濾管的常見問題與解答:Q:超濾管的膜材質(zhì)是什么?A:超濾管的膜材質(zhì)為默克密理博特有的Ultracel再生纖維素膜,生產(chǎn)工藝嚴格,截留分子量明確而準, 蛋白吸附損失小。Q:如果要用超濾的方法分離兩種蛋白,那么這兩個蛋白的大小需要相差多少?A:按照經(jīng)驗,建議兩個蛋白的分子量要相差 一個數(shù)量級(10倍)。超濾離心管還可以用于提取DNA、RNA等核...
超濾離心管是內(nèi)部裝有超濾膜的用于濃縮和凈化生物樣本的一次性耗材。15ML的超濾離心管可處理樣品量達20ML,具有快速超過濾功能,能夠達到較高的濃縮系數(shù),易于從稀釋液和復雜的樣本組合進行濃縮液回收。豎式設計以及其雙面的超大過濾面積能提供快速的樣本處理和較高的樣本回收率(通常大于90%稀薄的初始溶液),并能進行80倍濃縮。典型的處理時間為15至40分鐘。豎式設計將溶質(zhì)極化和之后造成的濾膜結(jié)垢降至低,過濾裝置中的物理止濾點防止過濾器旋轉(zhuǎn)過度使樣本干燥和造成樣本損失。濃縮液用移液管從過濾器的樣本槽中收集,而超過濾濾出液則收集到所提供的離心管中。該裝置可在擺桶或定角轉(zhuǎn)子中旋轉(zhuǎn)。的離心管有超過7種不同的截...
超濾離心管的常見問題與解答,一:超濾離心管的膜材質(zhì)是什么?超濾離心管的膜材質(zhì)為特有的Ultracel再生纖維素膜,生產(chǎn)工藝嚴格,截留分子量明確而,蛋白吸附損失較小。二:如果要用超濾離心管的方法分離兩種蛋白,那么這兩個蛋白的大小需要相差多少?按照經(jīng)驗,建議兩個蛋白的分子量要相差一個數(shù)量級(10倍)。不保證超濾離心管不包含RNA酶,建議用0.1%DEPC在37度浸泡2小時,以完全滅活RNA酶;殘留的DEPC可以用Milli-Q超純水洗滌除去。去污劑因其獨特的性質(zhì),當濃度大于臨界微團濃度(Critical Micelle Concentration、CMC)時,去污劑分子會聚集形成微團而改變分子構(gòu)象...
塑料離心管的優(yōu)點是透明或者是半透明的,它的硬度小,可用穿刺法取出梯度。缺點是易變形,抗有機溶劑腐蝕性差,使用壽命短。塑料離心管都有管蓋,它的作用是防止樣品外泄,尤其是用于有放射性或強腐蝕性的樣品時防止樣品外泄是很重要的一點;管蓋還有一個作用是防止樣品揮發(fā)以及支持離心管,防止離心管變形。在挑選這一點的時候還要注意檢查管蓋是否嚴密,在試驗時能否蓋嚴,以到達倒置不漏液;我們都知道在塑料離心管中,常用材料有聚乙烯PE),聚碳酸酯(PC),聚丙烯(PP)等,其中聚丙烯PP管性能會相對較好,所以,我們在挑選塑料離心管時盡可能的考慮聚丙烯的塑料離心管。超濾離心管是現(xiàn)代實驗室必不可少的設備之一,為科研工作者提...
2022年全球超濾濃縮離心管市場規(guī)模約 億元,2018-2022年年復合增長率CAGR約為%,預計未來將持續(xù)保持平穩(wěn)增長的態(tài)勢,到2029年市場規(guī)模將接近 億元,未來六年CAGR為 %。從關鍵市場看,中國超濾濃縮離心管市場占據(jù)全球約 %的市場份額,為全球較主要的消費市場之一,且增速高于全球。2022年市場規(guī)模約 億元,2018-2022年年復合增長率約為 %。隨著國內(nèi)企業(yè)產(chǎn)品開發(fā)速度加快,隨著新技術和產(chǎn)業(yè)政策的雙輪驅(qū)動,未來中國超濾濃縮離心管市場將迎來發(fā)展機遇,預計到2029年中國超濾濃縮離心管市場將增長至 億元,2023-2029年年復合增長率約為 %。2022年美國市場規(guī)模為 億元,同期歐...
超濾離心管的分子量選擇:按照樣品量和目標分子量選擇適當?shù)某瑸V離心管,為了得到較高的收率,所選濾膜的截留分子量MWCO建議選擇所需截留分子大小的1/3左右,不超過目標分子量的一半。因為超濾膜上孔徑是平均孔徑,膜上的孔并非均勻,離心高壓下也可能滲漏,因此截留孔徑越小,流速越慢但截留比例更大。如果樣本濃度低體積大,可選擇較小容積的超濾管多次重復加樣離心。如果同時需要脫鹽和去除可溶小分子雜質(zhì),可將待濃縮樣品稀釋到超濾管較大容積再離心,重復2次可除去99%鹽。避免過長時間或者過速離心,雖然優(yōu)良品質(zhì)的產(chǎn)品都有防死端設計,可避免過度離心造成膜表面干而造成不可逆吸附。超濾離心管可用于分離細胞培養(yǎng)上清中的蛋白質(zhì)...
離心管,管狀試樣容器,可帶密封蓋或壓蓋,是實驗室里面常見的一種實驗耗材,主要是配合離心機使用,即將實驗液體裝在其中,然后放在離心機里面離心。進口離心管按照材料分類:塑料離心管,玻璃離心管,鋼制離心管,又可以分為PP、PC、PS等,根據(jù)不同需要,生產(chǎn)廠家會選擇不同的塑料材料來進行制作。根據(jù)其大小,又分為1.5ml、2ml、5ml、10ml、15ml、50ml等,國產(chǎn)的離心管一般就是這幾個規(guī)格,用的較多的也就是10ml和50ml的。如果您的離心機是配30ml或者其他規(guī)格的離心管時,就要考慮進口的了。另外,離心管還有圓底和尖底,以及螺旋蓋和插蓋之分。螺旋蓋的離心管帶有較精細的刻度,插蓋的只有一個總體...
超濾離心管可以滅菌嗎?1. 超濾離心管使用75%的乙醇消毒。2. 不能121℃滅菌,否則會變形,不論是是密理博、頗爾還是賽多利斯的都不能。3. 超濾管應當干燥保存,買回來的時候就是干的。當然也可以濕潤保存,但是應當保存在20%的乙醇中,是為了防止沒洗去的殘留的液體長菌堵膜。4. 有人說濕潤保存不能干,指的是卷式和板式超濾膜。離心管是一個簡單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。超濾離心管會有一個類似于內(nèi)管和外管的兩個部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內(nèi)管中),就是超濾的原理.常用于濃...
我們通常會以1/3到1/6甚至更低的區(qū)間來選擇超濾管的孔徑,通常更小的孔徑會使回收率提高但是超濾的時間也會比較長。一定范圍內(nèi),超濾的回收率和速度是一對矛盾體,因此可以通過優(yōu)化孔徑的選擇,在回收率可以接受的條件下選擇較大的孔徑,來提高超濾的速度。低溫如< 10 ℃,液體的粘度會增加,流動性會降低,因此液體的跨膜速率也會降低。適當提高超濾溫度,往往能夠提高超濾的速度。有些客戶需要做幾十ml到幾百ml樣品的濃縮或者緩沖液置換,但是卻使用1支或幾支15ml的超濾管反復離心來完成操作,這樣必然造成時間上的浪費。怎么辦?一定要挑選適合處理量的產(chǎn)品,減少不必要的反復離心從而提升超濾的效率。超濾離心管可以根據(jù)...
超濾離心管通常不需要預處理即可使用,不過對于蛋白質(zhì)樣本處理,特別是較稀的蛋白質(zhì)溶液來說( 90% 的樣品回收率),以及 80~100 倍濃縮的能力。濃縮物使用吸液器從過濾裝置中收集,而超濾液則在提供的離心管中收集。超濾離心管是一種可以為蛋白質(zhì)樣本的濃縮和緩沖交換提供可靠準確結(jié)果的一次性超濾離心式過濾裝置,與層析、透析等方法相比,超濾對被處理的分子更加溫和,不需要有機萃取,不會導致蛋白變性,且簡單高效。規(guī)格超濾濃縮器可處理體積4mL 以內(nèi)的樣本,離心管內(nèi)包含一個內(nèi)置豎直的聚醚砜(PES)膜過濾裝置,聚醚砜膜具備低蛋白附著、高通量的特點,可應用在3KD、5KD、10KD、30KD、50KD、100...
當濃縮到剩下1ml時,取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測,繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀,導致堵管。若發(fā)生沉淀,要確定沉淀的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,后者的方法是換不同的緩沖溶液,直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。超濾離心管可以去除混合物中的雜質(zhì)和低分子量化合物,得到高...
玻璃離心管,大家都知道,玻璃是很容易碎的,所以如果我們選擇玻璃離心管時,離心機的離心力一定不能調(diào)得很高,還需要將玻璃離心管墊上橡膠墊,避免破碎,玻璃離心管的優(yōu)點是管體透明,利于觀察分離情況。鋼制離心管,鋼制離心管硬度大、抗熱、抗凍、不變形等優(yōu)點被普遍應用,一般鋼制離心管都會循環(huán)使用。離心管盡量選擇pp材質(zhì)的塑料離心管,也可以選鋼制的,玻璃材質(zhì)因為其容易破碎,分離轉(zhuǎn)速要求高,需將轉(zhuǎn)速控制在2000rpm/min內(nèi),所以通常情況下不做選擇。離心管的選擇還可以根據(jù)自己所分離樣品的大小來決定是選擇微量離心管、普通離心管、大容量離心管還是離心瓶。超濾離心管可以用于制備高純度的細胞培養(yǎng)基,以進行細胞培養(yǎng)和...
使用后用0.1M NaOH泡24h,然后20%乙醇浸泡保存。這個我是聽老板們說的,的確乙醇泡完后孔徑會增大,基本就是5-10KD較大,也就是說如果你的蛋白在21KD以上,應該沒問題?;蛘呖梢圆挥靡掖寂?,用NaOH洗之后直接用無菌水保存,每周換一下液體,應該沒有問題??纯凑f明書不就結(jié)了!我原來在CRO的時候一直是重復用的,也沒見什么不好啊!短期會用的話,用20%的乙醇泡著,回頭拼命用millipore的水充干凈,然后在用樣品緩沖液平衡一下就好,至于有些人說的改變孔徑,也沒那么大影響的,你至少跟目的蛋白分子量差別3倍的截留分子量才安全的不是嗎?1個月以內(nèi)不用的話,建議用100mM的NaOH保存!更...
根據(jù)其大小,又分為1.5ml、2ml、5ml、10ml、15ml、50ml等,國產(chǎn)的離心管一般就是這幾個規(guī)格,用的較多的也就是10ml和50ml的。如果您的離心機是配30ml或者其他規(guī)格的離心管時,就要考慮進口的了。另外,離心管還有圓底和尖底,以及螺旋蓋和插蓋之分。螺旋蓋的離心管帶有較精細的刻度,插蓋的只有一個總體的容量標示。實驗室常用的離心管有塑料的和玻璃的,一般塑料的用的較多,因為玻璃的離心管不能用在高速或者超速離心機上。塑料的離心管又有PP(聚丙烯)、PC(聚碳酸酯),PE(聚乙烯)等材質(zhì)。PP的管子性能相對來說比較好。塑料的離心管透明或者半透明,可以直觀的看到樣品離心情況,但是比較容易...
以下是處理超濾管,重復利用超濾管的步驟。倒出超濾管里的水,用milliQ水輕輕潤洗幾次,【若管底有可見的蛋白沉淀,可以先加入水,然后用設備頭吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉淀懸起,然后倒掉,不可用自來水猛沖】然后加入0.2M的NaOH溶液,室溫放置20min,期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液,將管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個小時,再換新的水,放置幾個小時,不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來水洗,內(nèi)壁再用MilliQ水洗干凈。取出浸沒的管芯,加至接近滿的MilliQ水,50ml管也加滿MilliQ水,將管芯慢慢放入50ml。離心管,排出部分水...
超濾離心管使用的是再生纖維素膜,這種材質(zhì)是蛋白吸附較低的超濾膜。但是對于一些疏水性蛋白或非極性蛋白,它們和膜的非特異吸附可能會增強,對于這種情況,可以嘗試在實驗前對超濾管進行封閉處理,也可以嘗試換成Amicon Ultra0.5或2來進行實驗,通過減小膜面積來降低非特異性吸附。超濾膜含有微量甘油。如果此成分干擾分析,可用緩沖液或Milli-Q水預清洗。如果干擾仍存在,用0.1N NaOH清洗,然后用緩沖液或Milli-Q水再次清洗后甩干。使用超濾離心管時需要注意樣品制備和pH調(diào)整等實驗步驟,以確保較佳結(jié)果。四川30K超濾離心管推薦超濾離心管可以滅菌嗎?1. 超濾離心管使用75%的乙醇消毒。2....
避免過度濃縮,體積越小,越容易因表面吸附而損失得率。離心后用Tips輕輕吹吸幾次濾膜截留的溶液,必要時補加一定體積的緩沖液沖洗膜表面,有助于減少膜表面吸附,能提高回收率。盡量避免Tips接觸膜表面。離心管是一個簡單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。超濾離心管會有一個類似于內(nèi)管和外管的兩個部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內(nèi)管中),就是超濾的原理.常用于濃縮樣品。 超濾離心管通常不需要預處理即可使用,不過對于蛋白質(zhì)樣本處理,特別是較稀的蛋白質(zhì)溶液來說(90%),并達到30倍的濃縮...