超濾作為一種膜分離技術(shù)，普遍應(yīng)用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換，其原理是溶液在力的作用下，通過超濾膜孔徑的篩濾，大分子量的顆粒被截留下來，而水、溶劑和低分子量溶質(zhì)則允許透過膜，從而達(dá)到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的，這種方法較大的特點(diǎn)是操作簡便、快速、高效，可同時濃縮和純化分子，一般來說超濾的回收率能夠達(dá)到90％以上，因此得到許多人的青睞。超濾濃縮器是一種可以為蛋白質(zhì)樣本的濃縮和緩沖交換提供可靠準(zhǔn)確結(jié)果的一次性超濾離心式過濾裝置，與層析、透析等方法相比，超濾對被處理的分子更加溫和，不需要有機(jī)萃取，不會導(dǎo)致蛋白變性，且簡單高效。潔特6mL規(guī)格超濾濃縮器可處理體積4mL以內(nèi)的樣本，離心管內(nèi)包含一...

超濾作為一種膜分離技術(shù)，普遍應(yīng)用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換，其原理是溶液在力的作用下，通過超濾膜孔徑的篩濾，大分子量的顆粒被截留下來，而水、溶劑和低分子量溶質(zhì)則允許透過膜，從而達(dá)到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的，這種方法較大的特點(diǎn)是操作簡便、快速、高效，可同時濃縮和純化分子，一般來說超濾的回收率能夠達(dá)到90％以上，因此得到許多人的青睞。超濾濃縮器是一種可以為蛋白質(zhì)樣本的濃縮和緩沖交換提供可靠準(zhǔn)確結(jié)果的一次性超濾離心式過濾裝置，與層析、透析等方法相比，超濾對被處理的分子更加溫和，不需要有機(jī)萃取，不會導(dǎo)致蛋白變性，且簡單高效。潔特6mL規(guī)格超濾濃縮器可處理體積4mL以內(nèi)的樣本，離心管內(nèi)包含一...

超濾離心管，備有四種材質(zhì)的超濾膜：聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart，可根據(jù)不同要求靈活選用；兩種回收濃縮液的方法：既可用吸管直接吸取并回收，又可將離心管放入離心機(jī)反甩，將濃縮液甩入回收帽中，加蓋保存。這兩種方法都可使?jié)饪s液達(dá)到近乎完全回收；截留分子量普遍，配有3K、5K、10k、30K、50K、100K、300K、1000K、0.2μl的聚醚砜膜；新推出產(chǎn)品膜2K型，具有極低的蛋白吸附特性，高流速、高通量，是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜。用以濃縮蛋白，如果要換Buffer，在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候，輕輕加入新的Buffer（經(jīng)0.22um超濾膜超濾），再 濃縮至1...

超濾離心管的分子量選擇：按照樣品量和目標(biāo)分子量選擇適當(dāng)?shù)某瑸V離心管，為了得到較高的收率，所選濾膜的截留分子量MWCO建議選擇所需截留分子大小的1/3左右，不超過目標(biāo)分子量的一半。因?yàn)槌瑸V膜上孔徑是平均孔徑，膜上的孔并非均勻，離心高壓下也可能滲漏，因此截留孔徑越小，流速越慢但截留比例更大。如果樣本濃度低體積大，可選擇較小容積的超濾管多次重復(fù)加樣離心。如果同時需要脫鹽和去除可溶小分子雜質(zhì)，可將待濃縮樣品稀釋到超濾管較大容積再離心，重復(fù)2次可除去99%鹽。避免過長時間或者過速離心，雖然優(yōu)良品質(zhì)的產(chǎn)品都有防死端設(shè)計(jì)，可避免過度離心造成膜表面干而造成不可逆吸附。避免過度濃縮，體積越小，越容易因表面吸附而...

當(dāng)濃縮到剩下1ml時，取50ul緩沖溶液，加入10ul流穿，看有沒變藍(lán)色，以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了，將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管，用5mgml的BSA離心10min，再取流穿，跑蛋白膠或Bradford粗測，繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮（在冰上操作，防止蛋白受熱），直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀，導(dǎo)致堵管。若發(fā)生沉淀，要確定沉淀的具體原因，是蛋白濃度過高還是Buffer不合適；前者可用多根超濾管同時超濾，降低濃度的辦法解決，后者的方法是換不同的緩沖溶液，直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。超濾離心管通常被用于天然藥物研究和制備中。寧波再生纖維素...

超濾管產(chǎn)品系列包括5種不同的截留分子量(即標(biāo)稱分子量限值, NMWL)。這些超濾管只供研究使用，不適用于診斷程序。1）.濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸（DNA/RNA樣本，單鏈或雙鏈）、噬菌體等微生物樣本。2）.純化組織培養(yǎng)提取液或細(xì)胞裂解液中的大分子成分，去除反應(yīng)液中的引物、接頭或分子標(biāo)記，在HPLC前去除蛋白質(zhì)。3）.除鹽，緩沖液更換，或滲濾。超濾管提供了兩個微量離心管。在操作過程中，一個用于收集濾出液，而另一個用于回收濃縮后的樣本。超濾管的超濾膜含有微量甘油。如果擔(dān)心干擾后續(xù)分析,可用緩沖液或Milli-Q水進(jìn)行預(yù)清洗。如果干擾仍然存在,可用0.1M NaOH清洗,再用緩沖液或Milli-...

玻璃離心管：使用玻璃管時離心力不宜過大，需要墊橡膠墊，防止管子破碎，高速離心機(jī)一般不選用玻璃管。離心管蓋子封閉性不夠好，液體就不能加滿（針對高速離心機(jī)且使用角轉(zhuǎn)子）以防外溢，失去平衡。外溢后果是污染轉(zhuǎn)子和離心腔，影響感應(yīng)器正常工作。超速離心時，液體一定要加滿離心管，因?yàn)槌x需要抽高真空，只有加滿才能避免離心管變形。塑料離心管：塑料離心管的優(yōu)點(diǎn)是透明或者是半透明的，它的硬度小，可用穿刺法取出樣本。缺點(diǎn)是易變形，抗有機(jī)溶劑腐蝕性差，使用壽命短。塑料的離心管又有PP（聚丙烯）、PC (聚碳酸酯)，PE (聚乙烯)等材質(zhì)。PP的管子性能相對來說比較好。塑料的離心管透明或者半透明，可以直觀的看到樣品離心...

超濾是大分子脫鹽、濃縮較方便的方法，重復(fù)性好，得率有保障，已經(jīng)在蛋白、抗體、病毒、核酸、囊泡等樣品制備中建立標(biāo)準(zhǔn)操作；在目前大熱的外泌體制備中也已經(jīng)成為主流方法。超濾管采用離心方式快速處理樣品，是很多科研小伙伴們每天要用到的基本裝備。但是，在默克生命科學(xué)團(tuán)隊(duì)推出超濾管中文說明書(AU0.5/4/15)之前，我們發(fā)現(xiàn)近90%的使用者在選擇和使用過程中因?yàn)槿狈Ρ匾畔⒍鴽]有獲得較佳體驗(yàn)，更重要的是，寶貴的樣本會遭受本可避免的損失！如果目的蛋白是120kDa，請問應(yīng)該選擇的超濾管規(guī)格是100k，50k，還是30k甚至10k？你采用的是1/2，1/3抑或1/6算法？這些沒有統(tǒng)一的說法，是因?yàn)椴煌瑥S家的...

一提起蛋白質(zhì)濃縮、更換緩沖液，我們都會想起超濾。這是一種我們都很熟悉的膜分離技術(shù)。它可用來分離溶液中極小的顆粒和溶解的分子。這種方法的較大特點(diǎn)是操作簡便，只需要濃縮離心管和離心機(jī)，即可圓滿完成我們的任務(wù)。與層析、透析等方法相比，超濾對被處理的分子更加溫和。它不需要有機(jī)萃取，就不會導(dǎo)致蛋白變性。這種方法非常高效，可同時濃縮和純化分子。操作可在低溫（比如冷庫）下進(jìn)行。另外，快速、便宜，也是許多人青睞它的原因。濃縮離心管的操作很簡單。選擇適當(dāng)?shù)臐饪s離心管，加入待處理的樣本，按照離心管的指示進(jìn)行離心操作，之后回收截留的樣本。在離心力的作用下，溶液中的小分子溶質(zhì)和溶劑透過超濾膜，被收集在濾過液收集瓶中，...

離心管,管狀試樣容器，可帶密封蓋或壓蓋,是實(shí)驗(yàn)室里面常見的一種實(shí)驗(yàn)耗材，主要是配合離心機(jī)使用，即將實(shí)驗(yàn)液體裝在其中，然后放在離心機(jī)里面離心。進(jìn)口離心管按照材料分類：塑料離心管，玻璃離心管，鋼制離心管，又可以分為PP、PC、PS等，根據(jù)不同需要，生產(chǎn)廠家會選擇不同的塑料材料來進(jìn)行制作。根據(jù)其大小，又分為1.5ml、2ml、5ml、10ml、15ml、50ml等，國產(chǎn)的離心管一般就是這幾個規(guī)格，用的較多的也就是10ml和50ml的。如果您的離心機(jī)是配30ml或者其他規(guī)格的離心管時，就要考慮進(jìn)口的了。另外，離心管還有圓底和尖底，以及螺旋蓋和插蓋之分。螺旋蓋的離心管帶有較精細(xì)的刻度，插蓋的只有一個總體...

超濾離心管只需5到15分鐘，即可對50到500L樣本進(jìn)行簡便、可靠的濃縮與脫鹽處理：快速處理樣本。通常，回收率高于90％；備有低蛋白質(zhì)結(jié)合的Omega、Bio-Inert或GHP濾膜可供選擇。對應(yīng)各種截留分子量，備有各種編碼以供輕松識別的顏色可供選擇。結(jié)構(gòu)材料為低結(jié)合聚丙烯。超聲焊接密封，防止側(cè)流或密封不嚴(yán)。適用于配合1.5mL試管的標(biāo)準(zhǔn)離心轉(zhuǎn)子。超濾離心管通常不需要預(yù)處理即可使用，不過對于蛋白質(zhì)樣本處理，特別是較稀的蛋白質(zhì)溶液來說(

超濾離心管可以滅菌嗎？1. 超濾離心管使用75%的乙醇消毒。2. 不能121℃滅菌，否則會變形，不論是是密理博、頗爾還是賽多利斯的都不能。3. 超濾管應(yīng)當(dāng)干燥保存，買回來的時候就是干的。當(dāng)然也可以濕潤保存，但是應(yīng)當(dāng)保存在20%的乙醇中，是為了防止沒洗去的殘留的液體長菌堵膜。4. 有人說濕潤保存不能干，指的是卷式和板式超濾膜。離心管是一個簡單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。超濾離心管會有一個類似于內(nèi)管和外管的兩個部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當(dāng)高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子（即外管）中了,分子量比它大的就截留在上面（即內(nèi)管中）,就是超濾的原理.常用于濃...

離心管,管狀試樣容器，可帶密封蓋或壓蓋,是實(shí)驗(yàn)室里面常見的一種實(shí)驗(yàn)耗材，主要是配合離心機(jī)使用，即將實(shí)驗(yàn)液體裝在其中，然后放在離心機(jī)里面離心。進(jìn)口離心管按照材料分類：塑料離心管，玻璃離心管，鋼制離心管，又可以分為PP、PC、PS等，根據(jù)不同需要，生產(chǎn)廠家會選擇不同的塑料材料來進(jìn)行制作。根據(jù)其大小，又分為1.5ml、2ml、5ml、10ml、15ml、50ml等，國產(chǎn)的離心管一般就是這幾個規(guī)格，用的較多的也就是10ml和50ml的。如果您的離心機(jī)是配30ml或者其他規(guī)格的離心管時，就要考慮進(jìn)口的了。另外，離心管還有圓底和尖底，以及螺旋蓋和插蓋之分。螺旋蓋的離心管帶有較精細(xì)的刻度，插蓋的只有一個總體...

超濾作為一種膜分離技術(shù)，普遍應(yīng)用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換，其原理是溶液在力的作用下，通過超濾膜孔徑的篩濾，大分子量的顆粒被截留下來，而水、溶劑和低分子量溶質(zhì)則允許透過膜，從而達(dá)到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的，這種方法較大的特點(diǎn)是操作簡便、快速、高效，可同時濃縮和純化分子。如何使用超濾心離心管？1. 使用角轉(zhuǎn)子加到超濾裝置上，較大樣本量為15 毫升（Anavo Ultra-15）。2. 將帶蓋過濾裝置放入離心機(jī)轉(zhuǎn)子內(nèi); 用一個類似的裝置來平衡。3. 使用定角轉(zhuǎn)子時，將薄膜面板朝上定位，較大旋轉(zhuǎn) 5000 xg，旋轉(zhuǎn) 30 分鐘。4. 為了回收濃縮的溶質(zhì)，在過濾裝置的底部插入一個移液管，...

超濾作為一種膜分離技術(shù)，普遍應(yīng)用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換，其原理是溶液在力的作用下，通過超濾膜孔徑的篩濾，大分子量的顆粒被截留下來，而水、溶劑和低分子量溶質(zhì)則允許透過膜，從而達(dá)到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的，這種方法較大的特點(diǎn)是操作簡便、快速、高效，可同時濃縮和純化分子。如何使用超濾心離心管？1. 使用角轉(zhuǎn)子加到超濾裝置上，較大樣本量為15 毫升（Anavo Ultra-15）。2. 將帶蓋過濾裝置放入離心機(jī)轉(zhuǎn)子內(nèi); 用一個類似的裝置來平衡。3. 使用定角轉(zhuǎn)子時，將薄膜面板朝上定位，較大旋轉(zhuǎn) 5000 xg，旋轉(zhuǎn) 30 分鐘。4. 為了回收濃縮的溶質(zhì)，在過濾裝置的底部插入一個移液管，...

超濾作為一種膜分離技術(shù)，普遍應(yīng)用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換，其原理是溶液在力的作用下，通過超濾膜孔徑的篩濾，大分子量的顆粒被截留下來，而水、溶劑和低分子量溶質(zhì)則允許透過膜，從而達(dá)到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的，這種方法較大的特點(diǎn)是操作簡便、快速、高效，可同時濃縮和純化分子，一般來說超濾的回收率能夠達(dá)到90％以上，因此得到許多人的青睞。超濾濃縮器是一種可以為蛋白質(zhì)樣本的濃縮和緩沖交換提供可靠準(zhǔn)確結(jié)果的一次性超濾離心式過濾裝置，與層析、透析等方法相比，超濾對被處理的分子更加溫和，不需要有機(jī)萃取，不會導(dǎo)致蛋白變性，且簡單高效。潔特6mL規(guī)格超濾濃縮器可處理體積4mL以內(nèi)的樣本，離心管內(nèi)包含一...

超濾作為一種膜分離技術(shù)，普遍應(yīng)用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換，其原理是溶液在力的作用下，通過超濾膜孔徑的篩濾，大分子量的顆粒被截留下來，而水、溶劑和低分子量溶質(zhì)則允許透過膜，從而達(dá)到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的，這種方法較大的特點(diǎn)是操作簡便、快速、高效，可同時濃縮和純化分子。如何使用超濾心離心管1. 使用角轉(zhuǎn)子加到超濾裝置上，較大樣本量為15 毫升（Anavo Ultra-15）。2. 將帶蓋過濾裝置放入離心機(jī)轉(zhuǎn)子內(nèi); 用一個類似的裝置來平衡。3. 使用定角轉(zhuǎn)子時，將薄膜面板朝上定位，較大旋轉(zhuǎn) 5000 xg，旋轉(zhuǎn) 30 分鐘。4. 為了回收濃縮的溶質(zhì)，在過濾裝置的底部插入一個移液管，通...

玻璃離心管，大家都知道，玻璃是很容易碎的，所以如果我們選擇玻璃離心管時，離心機(jī)的離心力一定不能調(diào)得很高，還需要將玻璃離心管墊上橡膠墊，避免破碎，玻璃離心管的優(yōu)點(diǎn)是管體透明，利于觀察分離情況。鋼制離心管，鋼制離心管硬度大、抗熱、抗凍、不變形等優(yōu)點(diǎn)被普遍應(yīng)用，一般鋼制離心管都會循環(huán)使用。離心管盡量選擇pp材質(zhì)的塑料離心管，也可以選鋼制的，玻璃材質(zhì)因?yàn)槠淙菀灼扑椋蛛x轉(zhuǎn)速要求高，需將轉(zhuǎn)速控制在2000rpm/min內(nèi)，所以通常情況下不做選擇。離心管的選擇還可以根據(jù)自己所分離樣品的大小來決定是選擇微量離心管、普通離心管、大容量離心管還是離心瓶。超濾離心管也可用于海洋科學(xué)研究中，以檢測水樣中的微量元素和...

超濾離心管，備有四種材質(zhì)的超濾膜：聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart，可根據(jù)不同要求靈活選用；兩種回收濃縮液的方法：既可用吸管直接吸取并回收，又可將離心管放入離心機(jī)反甩，將濃縮液甩入回收帽中，加蓋保存。這兩種方法都可使?jié)饪s液達(dá)到近乎完全回收；截留分子量普遍，配有3K、5K、10k、30K、50K、100K、300K、1000K、0.2μl的聚醚砜膜；較新推出ZL產(chǎn)品Hydrosart膜2K型，具有極低的蛋白吸附特性，高流速、高通量，是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜。使用超濾離心管時應(yīng)注意遵循正確的操作程序和安全規(guī)定，以避免意外傷害或污染。成都離心管廠家超濾離心管，備有四種材質(zhì)...

質(zhì)量和重心都應(yīng)該平衡。注意速度和加速度不要太快，否則會直接損壞超濾膜。開始離心超濾（離心預(yù)冷至4度〉。膜和旋轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說明進(jìn)行調(diào)整（對于角向離心機(jī)，膜垂直于軸〉。在實(shí)際應(yīng)用中，一般的速度開度比手動低，可以延長離心管的使用壽命。4。當(dāng)濃縮到剩余的1毫升時，取中國產(chǎn)的504.1l布拉德福德溶液，加104 l流過，看是否變藍(lán)，以判斷ur管是否漏蛋白。如果管道泄漏，重新倒入上層，然后流過新管道開始超濾。為了準(zhǔn)確確定管道是否泄漏，用5 mg/ml BSA離心10分鐘，然后將其穿過，大致運(yùn)行膠水或Bradf ord，繼續(xù)添加剩余的蛋白質(zhì)溶液以濃縮（在冰上操作以防止蛋白質(zhì)加熱〉，直到所有濃縮物都添加完畢...

超濾離心管的分子量選擇：按照樣品量和目標(biāo)分子量選擇適當(dāng)?shù)某瑸V離心管，為了得到較高的收率，所選濾膜的截留分子量MWCO建議選擇所需截留分子大小的1/3左右，不超過目標(biāo)分子量的一半。因?yàn)槌瑸V膜上孔徑是平均孔徑，膜上的孔并非均勻，離心高壓下也可能滲漏，因此截留孔徑越小，流速越慢但截留比例更大。如果樣本濃度低體積大，可選擇較小容積的超濾管多次重復(fù)加樣離心。如果同時需要脫鹽和去除可溶小分子雜質(zhì)，可將待濃縮樣品稀釋到超濾管較大容積再離心，重復(fù)2次可除去99%鹽。避免過長時間或者過速離心，雖然優(yōu)良品質(zhì)的產(chǎn)品都有防死端設(shè)計(jì)，可避免過度離心造成膜表面干而造成不可逆吸附。使用超濾離心管時應(yīng)注意保持其清潔和衛(wèi)生，并...

超濾管產(chǎn)品系列包括5種不同的截留分子量(即標(biāo)稱分子量限值, NMWL)。這些超濾管只供研究使用，不適用于診斷程序。1）.濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸（DNA/RNA樣本，單鏈或雙鏈）、噬菌體等微生物樣本。2）.純化組織培養(yǎng)提取液或細(xì)胞裂解液中的大分子成分，去除反應(yīng)液中的引物、接頭或分子標(biāo)記，在HPLC前去除蛋白質(zhì)。3）.除鹽，緩沖液更換，或滲濾。超濾管提供了兩個微量離心管。在操作過程中，一個用于收集濾出液，而另一個用于回收濃縮后的樣本。超濾管的超濾膜含有微量甘油。如果擔(dān)心干擾后續(xù)分析,可用緩沖液或Milli-Q水進(jìn)行預(yù)清洗。如果干擾仍然存在,可用0.1M NaOH清洗,再用緩沖液或Milli-...

超濾離心管采用再生纖維素膜，具有較高的回收率（>90%）和 高濃縮倍數(shù)（80–100 倍），100%完整性檢測確保性能可靠，主要應(yīng)用與生物樣品與蛋白濃縮、大分子組分的純化、脫鹽和緩沖液更換。再生纖維素膜具有一系列截留分子量，用戶可根據(jù)目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標(biāo)體積，選用不同體積大小和MWCO的超濾管。超濾離心管備有四種材質(zhì)的超濾膜：聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart，可根據(jù)不同要求靈活選用。超濾離心管應(yīng)用范圍：*生物樣品濃縮：包括抗原、抗體、酶、核酸或微生物。*對組織培養(yǎng)提取物或細(xì)胞裂解液中大分子組分的純化。*對稀釋或從柱洗脫液預(yù)先純化的蛋白質(zhì)進(jìn)行濃縮。*脫鹽和緩...

蛋白質(zhì)濃縮和替代緩沖液常用的超濾管，微孔(mwco10kd)常用的micon-ultra-15超濾管。根據(jù)靶蛋白的分子量、濃縮前的體積和濃縮的靶體積，還可提供不同尺寸和尺寸的其他類型的mwco超濾管。它可以重復(fù)使用。1。選擇合適的超濾管主要考慮分子量和濃度。通常靶蛋白的分子量不應(yīng)大于靶蛋白分子量的1/3。例如，當(dāng)靶蛋白的分子量為35kDa時，可以選擇靶蛋白分子量為10kDa的超濾管。如果靶蛋白的分子量約為10kd，則可使用分子量為3kd的超濾管。2。新購買的超濾是干燥的。使用前加入Milliq水。水的體積完全覆蓋在膜上，冰浴或冰箱被預(yù)先冷卻幾分鐘。倒出水后，可以加入蛋白質(zhì)溶液。蛋白質(zhì)添加量不超...

超濾作為一種膜分離技術(shù)，普遍應(yīng)用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換，其原理是溶液在力的作用下，通過超濾膜孔徑的篩濾，大分子量的顆粒被截留下來，而水、溶劑和低分子量溶質(zhì)則允許透過膜，從而達(dá)到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的，這種方法較大的特點(diǎn)是操作簡便、快速、高效，可同時濃縮和純化分子。如何使用超濾心離心管1. 使用角轉(zhuǎn)子加到超濾裝置上，較大樣本量為15 毫升（Anavo Ultra-15）。2. 將帶蓋過濾裝置放入離心機(jī)轉(zhuǎn)子內(nèi); 用一個類似的裝置來平衡。3. 使用定角轉(zhuǎn)子時，將薄膜面板朝上定位，較大旋轉(zhuǎn) 5000 xg，旋轉(zhuǎn) 30 分鐘。4. 為了回收濃縮的溶質(zhì)，在過濾裝置的底部插入一個移液管，通...

使用后用0.1M NaOH泡24h，然后20%乙醇浸泡保存。這個我是聽老板們說的，的確乙醇泡完后孔徑會增大，基本就是5-10KD較大，也就是說如果你的蛋白在21KD以上，應(yīng)該沒問題?；蛘呖梢圆挥靡掖寂?，用NaOH洗之后直接用無菌水保存，每周換一下液體，應(yīng)該沒有問題?？纯凑f明書不就結(jié)了！我原來在CRO的時候一直是重復(fù)用的，也沒見什么不好?。《唐跁玫脑?，用20%的乙醇泡著，回頭拼命用millipore的水充干凈，然后在用樣品緩沖液平衡一下就好，至于有些人說的改變孔徑，也沒那么大影響的，你至少跟目的蛋白分子量差別3倍的截留分子量才安全的不是嗎?1個月以內(nèi)不用的話，建議用100mM的NaOH保存！更...

超濾離心管使用方法和注意事項(xiàng)：1、選擇合適的超濾離心管，主要考慮MWCO和濃縮體積，通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量為35kDa，就可以選擇10kDa截留分子量的超濾離心管。若目的蛋白分子量為10kD左右，則可以用截留分子量3kD的超濾離心管。2、新買來的超濾是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全過膜，冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超過管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕，加入蛋白液前，超濾離心管需要插在冰上預(yù)冷。3、質(zhì)量和重心二者都要達(dá)到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快，否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾（離心機(jī)預(yù)冷至4度）。不...

離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀，導(dǎo)致堵管。若發(fā)生沉淀，要確定沉淀的具體原因，是蛋白濃度過高還是Buffer不合適；前者可用多根超濾管同時超濾，降低濃度的辦法解決，后者的方法是換不同的緩沖溶液，直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。用以濃縮蛋白，如果要換Buffer，在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候，輕輕加入新的Buffer（經(jīng)0.22um超濾膜超濾），再濃縮至1ml左右，連續(xù)三次，之后一次的濃縮終體積根據(jù)需要的蛋白濃度而定，一般不多于500ul，也有濃縮至200ul以內(nèi)的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算，三次達(dá)到1000倍以上，基本上可以達(dá)到換buffer的目的。超濾離心管通常具有標(biāo)準(zhǔn)化設(shè)計(jì)，使其易...

超濾作為一種膜分離技術(shù)，普遍應(yīng)用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換，其原理是溶液在力的作用下，通過超濾膜孔徑的篩濾，大分子量的顆粒被截留下來，而水、溶劑和低分子量溶質(zhì)則允許透過膜，從而達(dá)到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的，這種方法較大的特點(diǎn)是操作簡便、快速、高效，可同時濃縮和純化分子。如何使用超濾心離心管？1. 使用角轉(zhuǎn)子加到超濾裝置上，較大樣本量為15 毫升（Anavo Ultra-15）。2. 將帶蓋過濾裝置放入離心機(jī)轉(zhuǎn)子內(nèi); 用一個類似的裝置來平衡。3. 使用定角轉(zhuǎn)子時，將薄膜面板朝上定位，較大旋轉(zhuǎn) 5000 xg，旋轉(zhuǎn) 30 分鐘。4. 為了回收濃縮的溶質(zhì)，在過濾裝置的底部插入一個移液管，...

選擇合適的超濾管，主要考慮MWCO和濃縮體積，較常見的是10kD。到底選擇多大截留分子量比較合適呢?10kDa、 5kDa、還是30kDa?通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量為35kDa，就可以選擇10kDa截留分子量的超濾 管。若目的蛋白分子量為10kD左右，則可以用截留分子量3kD的超濾管。認(rèn)真閱讀使用說明書，注意超濾膜對各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同，表格中有。新買來的超濾是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全過膜，冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超過管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕，加入蛋白液前，超濾管需要插在冰上預(yù)冷...