酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致*作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致*、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。進(jìn)口分裝:檢測(cè)范圍和靈敏度不同,用量少時(shí),可使用分裝,前期是它的長(zhǎng)久性不是很好。試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線比較高點(diǎn)OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)R≥0.98。試劑盒重復(fù)性好,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均...
儲(chǔ)存條件:根據(jù)產(chǎn)品說明,將試劑儲(chǔ)存在正確的溫度和濕度條件下。一些試劑可能需要冷藏儲(chǔ)存,而另一些則可能對(duì)光照或溫度敏感。有效期:檢查試劑的有效期,確保在使用前試劑在有效期內(nèi)。操作環(huán)境:確保操作環(huán)境清潔、無塵、無污染,避免交叉***。個(gè)人保護(hù):在使用試劑時(shí),應(yīng)佩戴適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備,如手套、口罩、護(hù)目鏡等,以防試劑對(duì)皮膚或呼吸系統(tǒng)造成傷害。樣本處理:嚴(yán)格按照說明書處理樣本,確保樣本的質(zhì)量和準(zhǔn)確性。加樣量:加樣時(shí)要注意加樣量,過多或過少都可能影響檢測(cè)結(jié)果。設(shè)備校準(zhǔn):確保使用的檢測(cè)設(shè)備已校準(zhǔn)并且處于良好狀態(tài)。結(jié)果解讀:準(zhǔn)確解讀檢測(cè)結(jié)果,避免誤判。必要時(shí),應(yīng)請(qǐng)專業(yè)人士協(xié)助。什么是生物檢測(cè)試劑盒,上海藍(lán)侶...
細(xì)胞檢測(cè)試劑盒在科研中的作用細(xì)胞檢測(cè)試劑盒是細(xì)胞生物學(xué)研究中的重要工具,用于對(duì)細(xì)胞的多種特性和功能進(jìn)行檢測(cè)分析。例如,CCK - 8 試劑盒用于檢測(cè)細(xì)胞活性,其原理是基于線粒體脫氫酶還原反應(yīng)。試劑盒中的 WST - 8 被活細(xì)胞內(nèi)的線粒體脫氫酶還原成橙黃色的甲臜,甲臜的生成量與活細(xì)胞數(shù)量呈正相關(guān),通過酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度即可反映細(xì)胞活性。在藥物研發(fā)過程中,科研人員使用 CCK - 8 試劑盒來評(píng)估藥物對(duì)細(xì)胞增殖或毒性的影響,篩選出具有潛在活性的藥物候選物。此外,細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒能夠幫助研究人員判斷細(xì)胞是否發(fā)生凋亡以及凋亡的程度,為深入了解細(xì)胞生理病理過程提供關(guān)鍵信息,對(duì)**研究、神經(jīng)退行性疾病研...
完整的ELISA試劑盒包含以下各組分:(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);(3)酶的底物;(4)陰性對(duì)照品和陽性對(duì)照品(定性測(cè)定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測(cè)定中);(5)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;(6)洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;(7)酶反應(yīng)終止液,常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的**終體積而異,在板式ELISA中一般采用3mol/L。主要有:核酸提取純化類1.磁珠法核酸提取試劑盒2.磁珠法提取DNA試劑盒3.DNA提取試劑盒(離心柱法)4.磁珠法RNA提取試劑盒5.RNA提取...
細(xì)胞檢測(cè)試劑盒在科研中的作用細(xì)胞檢測(cè)試劑盒是細(xì)胞生物學(xué)研究中的重要工具,用于對(duì)細(xì)胞的多種特性和功能進(jìn)行檢測(cè)分析。例如,CCK - 8 試劑盒用于檢測(cè)細(xì)胞活性,其原理是基于線粒體脫氫酶還原反應(yīng)。試劑盒中的 WST - 8 被活細(xì)胞內(nèi)的線粒體脫氫酶還原成橙黃色的甲臜,甲臜的生成量與活細(xì)胞數(shù)量呈正相關(guān),通過酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度即可反映細(xì)胞活性。在藥物研發(fā)過程中,科研人員使用 CCK - 8 試劑盒來評(píng)估藥物對(duì)細(xì)胞增殖或毒性的影響,篩選出具有潛在活性的藥物候選物。此外,細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒能夠幫助研究人員判斷細(xì)胞是否發(fā)生凋亡以及凋亡的程度,為深入了解細(xì)胞生理病理過程提供關(guān)鍵信息,對(duì)**研究、神經(jīng)退行性疾病研...
自備材料1. 蒸餾水。2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3. 振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。2. 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。4. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。5. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。6. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的...
自備材料1. 蒸餾水。2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3. 振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。2. 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。4. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。5. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。6. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的...
血清:操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)***的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、 細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。5、 保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或***血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。此IBL試劑盒能用于小鼠血...
蛋白檢測(cè)類1.elisa常見elisa試劑盒有:特種蛋白檢測(cè)elisa試劑盒如免疫球蛋白,抗鏈O-aso,類風(fēng)濕因子RF,C反應(yīng)蛋白,微量白蛋白,β-2微球蛋白human,鐵蛋白,轉(zhuǎn)鐵蛋白transferrin等等**標(biāo)志物檢測(cè)elisa試劑盒:如**標(biāo)志物,組織多肽抗原,**相關(guān)因子,胰腺*,直腸*,細(xì)胞角蛋白片段,胃腸*,鐵蛋白,糖鏈抗原,神經(jīng)特異性稀醇化酶,上皮膜抗原,乳腺*,人抗小鼠抗體,前列腺,甲胎蛋白,肝*,**,大腸*,肺*,大小便隱血檢測(cè),*胚抗原,β-2微球蛋白等等。食品安全檢驗(yàn)elisa試劑盒:食品中的***、藥物、霉菌***、過敏原殘留、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的檢測(cè)試劑盒,以及微生物...
ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測(cè)定抗體,而且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大,可概括四個(gè)方面:1、免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。2、研究抗酶抗體的合成。3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀...
ELISA實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M(jìn)行確定。但比較好有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排***各一支。吸取不同的液體后,要更換***頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。3、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。4、實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。5、用***吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。6、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的***去吸,減少誤差。7、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免***頭和孔內(nèi)液體接觸,可使***頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。8、液體全部...
內(nèi)分泌和代謝疾病檢測(cè):如甲狀腺功能檢測(cè)(TSH、T3、T4)、血糖檢測(cè)(空腹血糖、餐后血糖)、血脂檢測(cè)等,用于相關(guān)內(nèi)分泌和代謝疾病的診斷和***監(jiān)測(cè)。心肌損傷和心臟疾病檢測(cè):如肌鈣蛋白I(cTnI)、肌鈣蛋白T(cTnT)和心肌酶等檢測(cè),用于心肌梗死的診斷和評(píng)估。腎臟功能檢測(cè):如血肌酐、尿素氮、腎小球?yàn)V過率(eGFR)等檢測(cè),用于評(píng)估腎功能。遺傳性疾病檢測(cè):如囊性纖維化基因檢測(cè)、血友病基因檢測(cè)等,用于遺傳性疾病的診斷和咨詢。藥物和**檢測(cè):如***耐藥性檢測(cè)、**的濫用檢測(cè)等,用于指導(dǎo)臨床***和法醫(yī)學(xué)鑒定。細(xì)胞和分子診斷:如聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)用于病原體的基因檢測(cè),流式細(xì)胞術(shù)用于細(xì)胞免疫功...
蛋白質(zhì)檢測(cè)試劑盒的分類與特性蛋白質(zhì)檢測(cè)試劑盒依據(jù)不同的檢測(cè)原理和方法,主要分為 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)試劑盒、Western Blot 試劑盒和免疫熒光試劑盒。ELISA 試劑盒利用抗原與抗體的特異性結(jié)合,將酶標(biāo)記在抗體上,當(dāng)抗原與抗體結(jié)合后,加入底物,酶催化底物顯色,通過顏色的深淺來定量檢測(cè)蛋白質(zhì)的含量。這種試劑盒操作相對(duì)簡(jiǎn)便,應(yīng)用***,常用于檢測(cè)各種體液中的蛋白質(zhì)標(biāo)志物,如**標(biāo)志物、***等。Western Blot 試劑盒則是先將蛋白質(zhì)樣品進(jìn)行電泳分離,再轉(zhuǎn)移到膜上,用特異性抗體進(jìn)行檢測(cè),能對(duì)蛋白質(zhì)的分子量、表達(dá)水平等進(jìn)行分析,常用于科研領(lǐng)域?qū)Φ鞍踪|(zhì)的精細(xì)研究。免疫熒光試劑盒...
蛋白質(zhì)檢測(cè)試劑盒的分類與特性蛋白質(zhì)檢測(cè)試劑盒依據(jù)不同的檢測(cè)原理和方法,主要分為 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)試劑盒、Western Blot 試劑盒和免疫熒光試劑盒。ELISA 試劑盒利用抗原與抗體的特異性結(jié)合,將酶標(biāo)記在抗體上,當(dāng)抗原與抗體結(jié)合后,加入底物,酶催化底物顯色,通過顏色的深淺來定量檢測(cè)蛋白質(zhì)的含量。這種試劑盒操作相對(duì)簡(jiǎn)便,應(yīng)用***,常用于檢測(cè)各種體液中的蛋白質(zhì)標(biāo)志物,如**標(biāo)志物、***等。Western Blot 試劑盒則是先將蛋白質(zhì)樣品進(jìn)行電泳分離,再轉(zhuǎn)移到膜上,用特異性抗體進(jìn)行檢測(cè),能對(duì)蛋白質(zhì)的分子量、表達(dá)水平等進(jìn)行分析,常用于科研領(lǐng)域?qū)Φ鞍踪|(zhì)的精細(xì)研究。免疫熒光試劑盒...
將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗體,這些抗體就會(huì)與HEV 的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會(huì)與***次孵育結(jié)合上的HEV IgM抗體相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)生酶-底物反應(yīng),只有那些含有HEV IgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng),并在波長(zhǎng): 450nm處測(cè)量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測(cè)試標(biāo)準(zhǔn), O.D.值大于或等于Cut...
蛋白檢測(cè)類1.elisa常見elisa試劑盒有:特種蛋白檢測(cè)elisa試劑盒如免疫球蛋白,抗鏈O-aso,類風(fēng)濕因子RF,C反應(yīng)蛋白,微量白蛋白,β-2微球蛋白human,鐵蛋白,轉(zhuǎn)鐵蛋白transferrin等等**標(biāo)志物檢測(cè)elisa試劑盒:如**標(biāo)志物,組織多肽抗原,**相關(guān)因子,胰腺*,直腸*,細(xì)胞角蛋白片段,胃腸*,鐵蛋白,糖鏈抗原,神經(jīng)特異性稀醇化酶,上皮膜抗原,乳腺*,人抗小鼠抗體,前列腺,甲胎蛋白,肝*,**,大腸*,肺*,大小便隱血檢測(cè),*胚抗原,β-2微球蛋白等等。食品安全檢驗(yàn)elisa試劑盒:食品中的***、藥物、霉菌***、過敏原殘留、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的檢測(cè)試劑盒,以及微生物...
病原體檢測(cè):包括細(xì)菌、病毒、寄生蟲等病原體的檢測(cè),如抗體檢測(cè)試劑、HIV抗原/抗體檢測(cè)試劑等。**標(biāo)志物檢測(cè):如甲胎蛋白(AFP)、*胚抗原(CEA)、前列腺特異性抗原(PSA)等**標(biāo)志物的定量檢測(cè),用于**的早期發(fā)現(xiàn)、診斷和療效監(jiān)測(cè)。免疫功能檢測(cè):如T細(xì)胞亞群檢測(cè)、免疫球蛋白水平檢測(cè)等,用于評(píng)估患者的免疫狀態(tài)。血栓與止血檢測(cè):如D-二聚體、凝血酶原時(shí)間(PT)、活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)等檢測(cè),用于血栓性疾病的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和溶栓***的監(jiān)測(cè)。內(nèi)分泌和代謝疾病檢測(cè):如甲狀腺功能檢測(cè)(TSH、T3、T4)、血糖檢測(cè)(空腹血糖、餐后血糖)、血脂檢測(cè)等,用于相關(guān)內(nèi)分泌和代謝疾病的診斷和***監(jiān)測(cè)...
優(yōu)勢(shì)1、高靈敏度:能夠檢測(cè)到極低濃度的抗原或抗體。2、高特異性:只與特定抗原或抗體結(jié)合,減少非特異性干擾。3、可量化:通過酶標(biāo)儀進(jìn)行定量分析,結(jié)果準(zhǔn)確可靠。4、操作簡(jiǎn)便:試劑盒設(shè)計(jì)合理,操作步驟明確,易于普及和推廣。五、使用時(shí)的注意事項(xiàng)1、樣本處理:確保樣本的采集、保存和處理過程符合規(guī)范,避免污染和交叉反應(yīng)。2、試劑配制:按照說明書準(zhǔn)確配制試劑,避免誤差。3、操作環(huán)境:保持實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫度、濕度等環(huán)境穩(wěn)定,減少外部干擾。4、反應(yīng)時(shí)間:嚴(yán)格控制每一步反應(yīng)的時(shí)間,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。5、結(jié)果判讀:使用酶標(biāo)儀進(jìn)行結(jié)果判讀時(shí),要遵循儀器操作規(guī)范,確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確。什么是生物檢測(cè)試劑盒,上海藍(lán)侶生物科技解讀清...
自備材料1. 蒸餾水。2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3. 振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。2. 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。4. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。5. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。6. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的...
酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致*作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致*、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。進(jìn)口分裝:檢測(cè)范圍和靈敏度不同,用量少時(shí),可使用分裝,前期是它的長(zhǎng)久性不是很好。試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線比較高點(diǎn)OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)R≥0.98。試劑盒重復(fù)性好,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均...
ELISA實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M(jìn)行確定。但比較好有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排***各一支。吸取不同的液體后,要更換***頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。3、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。4、實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。5、用***吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。6、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的***去吸,減少誤差。7、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免***頭和孔內(nèi)液體接觸,可使***頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。8、液體全部...
解決辦法:若室溫太低(<19℃),請(qǐng)于操作步驟4,適當(dāng)延長(zhǎng)溫育時(shí)間。d.原因:未使用試劑盒的清洗液清洗。解決辦法: 請(qǐng)用試劑盒內(nèi)所提供的清洗液清洗。e.原因:試劑盒已過有效期限。解決辦法:請(qǐng)更換成仍在有效期限內(nèi)的試劑盒。2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性不佳,或是平行性不好。a.原因:溫育位置避光不好或受到氣流干擾。解決辦法: 請(qǐng)確認(rèn)溫育位置既不透光也不透風(fēng)(如抽屜內(nèi))。b.原因:操作時(shí)間拖太久。解決辦法:請(qǐng)?jiān)诜椒ㄊ炀毢笤龠M(jìn)行操作。c.原因:微孔間相互污染。解決辦法: 加樣品時(shí),請(qǐng)小心勿濺出微孔外,以免造成其它微孔的污染。d.原因:標(biāo)準(zhǔn)品或酶標(biāo)記物所加入的量不一致。解決辦法:請(qǐng)使用已校正過的移液槍,并確保其與...
解決辦法:若室溫太低(<19℃),請(qǐng)于操作步驟4,適當(dāng)延長(zhǎng)溫育時(shí)間。d.原因:未使用試劑盒的清洗液清洗。解決辦法: 請(qǐng)用試劑盒內(nèi)所提供的清洗液清洗。e.原因:試劑盒已過有效期限。解決辦法:請(qǐng)更換成仍在有效期限內(nèi)的試劑盒。2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性不佳,或是平行性不好。a.原因:溫育位置避光不好或受到氣流干擾。解決辦法: 請(qǐng)確認(rèn)溫育位置既不透光也不透風(fēng)(如抽屜內(nèi))。b.原因:操作時(shí)間拖太久。解決辦法:請(qǐng)?jiān)诜椒ㄊ炀毢笤龠M(jìn)行操作。c.原因:微孔間相互污染。解決辦法: 加樣品時(shí),請(qǐng)小心勿濺出微孔外,以免造成其它微孔的污染。d.原因:標(biāo)準(zhǔn)品或酶標(biāo)記物所加入的量不一致。解決辦法:請(qǐng)使用已校正過的移液槍,并確保其與...
ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測(cè)定抗體,而且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大,可概括四個(gè)方面:1、免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。2、研究抗酶抗體的合成。3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀...
雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。5. 終止反應(yīng):...
RNA試劑盒內(nèi)容(以離心柱型為例):一般包括:裂解液RL去蛋白液RW1漂洗液RWRNase free ddH2O吸附柱(RNase free)過濾柱(RNase free)緩沖液離心管(RNase free)收集管(RNase free)此外,還配有一份試劑盒使用說明書,根據(jù)不同的生產(chǎn)商,可能還配有不同的試劑,如:DNA酶、溶菌酶等。使用時(shí)一定要根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要購買**提取試劑盒, 如果不是**試劑盒,或許能提出RNA,但不能確保其質(zhì)量以及完整性,會(huì)影響RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 篩選、體外翻譯、RNas...
儲(chǔ)存條件:根據(jù)產(chǎn)品說明,將試劑儲(chǔ)存在正確的溫度和濕度條件下。一些試劑可能需要冷藏儲(chǔ)存,而另一些則可能對(duì)光照或溫度敏感。確保儲(chǔ)存環(huán)境符合產(chǎn)品要求,避免試劑過早變質(zhì)。有效期:定期檢查試劑的有效期,確保在使用前試劑在有效期內(nèi)。過期的試劑不應(yīng)使用。封口焊接:某些試劑如DNA/RNA試劑盒,應(yīng)當(dāng)保持封口焊接,避免試劑曝露于空氣中,影響其穩(wěn)定性。避免搖震:避免在運(yùn)輸或儲(chǔ)存過程中對(duì)試劑進(jìn)行搖震,以防止試劑混凝或分離。避免光照:避免將光敏試劑暴露在強(qiáng)光下,以防止試劑變質(zhì)。定期檢查:定期檢查儲(chǔ)存庫存,確保試劑儲(chǔ)存在合適的環(huán)境中。如果發(fā)現(xiàn)任何問題,應(yīng)立即處理。記錄管理:對(duì)每批試劑進(jìn)行記錄管理,包括生產(chǎn)日期、有效期...
酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致*作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致*、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。進(jìn)口分裝:檢測(cè)范圍和靈敏度不同,用量少時(shí),可使用分裝,前期是它的長(zhǎng)久性不是很好。試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線比較高點(diǎn)OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)R≥0.98。試劑盒重復(fù)性好,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均...
為了確保生物檢測(cè)試劑盒的質(zhì)量可靠,嚴(yán)格的質(zhì)量控制與標(biāo)準(zhǔn)至關(guān)重要。在生產(chǎn)過程中,對(duì)原材料的質(zhì)量把控是第一步,所有用于試劑盒的試劑、耗材等都必須符合高質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。例如,抗體的純度、核酸引物的合成質(zhì)量等都有嚴(yán)格要求。生產(chǎn)環(huán)境也需滿足一定的潔凈度標(biāo)準(zhǔn),防止微生物污染影響試劑盒性能。每一批次的試劑盒在出廠前都要經(jīng)過***的質(zhì)量檢測(cè),包括靈敏度測(cè)試,確保能檢測(cè)到極低濃度的目標(biāo)物質(zhì);特異性測(cè)試,保證只對(duì)目標(biāo)物質(zhì)產(chǎn)生反應(yīng),避免假陽性;重復(fù)性測(cè)試,驗(yàn)證多次檢測(cè)結(jié)果的一致性。同時(shí),試劑盒的生產(chǎn)遵循相關(guān)的國家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)規(guī)范,如醫(yī)療器械生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范等,通過這些嚴(yán)格的質(zhì)量控制措施,保障試劑盒在實(shí)際應(yīng)用中的準(zhǔn)確性和可靠...
ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測(cè)定抗體,而且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大,可概括四個(gè)方面:1、免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。2、研究抗酶抗體的合成。3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀...