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PAS技術(shù)是很少可檢測不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。若要冸確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步驟。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,在應(yīng)用PAS技術(shù)之前將糖原從組織切片上除去。人類的唾液被認(rèn)為是消化糖原的一種有效手段,但是出于安全以及缺乏標(biāo)冸唾液的考慮,不主張應(yīng)用唾液。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學(xué)染色,在臨床病理診斷上占著相當(dāng)重要的位置。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差。安徽口碑好的糖原染色試劑盒報(bào)價(jià)
PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1實(shí)驗(yàn)材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標(biāo)本各30例,均來自我室實(shí)驗(yàn)材料。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,其配方:無水乙醇80mL,冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL,冰醋酸100mL,95%酒精600mL。1.2.3過碘酸溶液0.5g過碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:過碘酸0.8g,95%乙醇70mL,醋酸鈉0.27g,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4無色品紅液(Schiff氏液)在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,煮沸后,在保持微沸的情況下,加入堿性品紅2.5g,并不斷搖動約5min(勿使之沸騰),使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色)。冷卻到50℃時(shí),過濾,加入1N鹽酸50mL,再待冷卻至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉2.5g,塞住瓶口,搖動容器以充分混合(此時(shí)顏色明顯變淡),然后避光放置或冰箱內(nèi)24h江西哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒進(jìn)貨價(jià)冷凍切片染色效果不佳,成熟時(shí)間2個(gè)月,染色時(shí)間一般15-20分鐘。
可以通過pas染色計(jì)算糖原含量嗎:PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色.一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì).具體現(xiàn)象例舉:陽性反應(yīng),胞漿呈紅色,陰性反應(yīng),胞漿呈無色;在正常血片中RBC不染色;PLT染成深紅色;中性粒細(xì)胞胞漿染成紅色或深紅色,有些細(xì)胞有陽性顆粒;單核細(xì)胞的胞漿染成淡紅色,可含有細(xì)小或粗大陽性顆粒;少數(shù)淋巴細(xì)胞的胞漿內(nèi)含有少許小的淡紅色或紅色顆粒;正常骨髓的幼稚細(xì)胞和有核RBC都不染色;巨核細(xì)胞的胞漿內(nèi)呈彌散紅色或深紅色.巨核細(xì)胞的胞漿內(nèi)呈彌散紅色或深紅色.顏色深淺與濃度相關(guān)
注意事項(xiàng):染色時(shí):①染色時(shí)必須嚴(yán)格按照染色操作說明書進(jìn)行染色。②在染色過程中,前一個(gè)染液浸染完成后,在進(jìn)行下一個(gè)染液的步驟之前,必須徹底充分水洗,使前一個(gè)染液沖洗干凈后再進(jìn)行下一步驟。③每次滴加染液前,務(wù)必吸干組織上多余的水分,避免多余的水把染液稀釋了,造成染色不佳。④在滴加染液時(shí),務(wù)必使染液完全覆蓋組織,但不能溢出圈外,避免浪費(fèi)試劑。在染色時(shí),用有色鉛筆在組織周圍劃一個(gè)圈,這樣在滴加染液時(shí)就不會使染液溢出糖類從組織化學(xué)技術(shù)角度來分,可分為多糖、中性粘液物質(zhì)。
PAS染色的臨床意義:1.紅細(xì)胞系統(tǒng):①紅血病或紅白血病時(shí)幼紅細(xì)胞可呈陽性反應(yīng),有時(shí)陽性反應(yīng)幼紅細(xì)胞的百分比增高,陽性反應(yīng)的程度也很強(qiáng)。有時(shí)紅細(xì)胞也呈陽性反應(yīng)。②缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血(又稱地中海貧血)以及骨髓增生異常綜合征時(shí)幼紅細(xì)胞可呈陽性反應(yīng),有時(shí)陽性反應(yīng)幼紅細(xì)胞的百分比也較高。有時(shí)紅細(xì)胞也可呈陽性反應(yīng)。③巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血、再生障礙性貧血和白血病等疾病時(shí),幼紅細(xì)胞為陰性反應(yīng),有時(shí)*個(gè)別幼紅細(xì)胞呈陽性反應(yīng)自早幼粒階段以后的粒細(xì)胞和幼單核細(xì)胞可呈弱陽性反應(yīng)。湖南哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒量大從優(yōu)
植物材料在選擇時(shí)須盡可能不損傷植物體或所需要的部分。安徽口碑好的糖原染色試劑盒報(bào)價(jià)
糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水。(2)0.5%過碘酸水溶液5分鐘?;?%過碘酸95%酒精溶液(過碘酸再結(jié)晶應(yīng)重新配制使用)。(3)蒸餾水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分鐘。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘。(6)蘇木素浸染細(xì)胞核2-3分鐘。(7)脫水、透明、封蓋。結(jié)果:糖原呈紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)色。試劑配制:(1)0.5%過碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏試劑。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,攪拌加熱沸騰,待冷卻至50℃過濾,加入當(dāng)量鹽酸至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉。置于暗處,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,然后加入少量活性碳并震蕩、過濾,此時(shí)溶液應(yīng)為無色。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差。安徽口碑好的糖原染色試劑盒報(bào)價(jià)
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