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糖原染色――檢查項(xiàng)目的注意細(xì)節(jié):其判斷標(biāo)準(zhǔn)隨細(xì)胞不同而異,一般分為5級(jí),即0~4級(jí)。糖原染色――檢查項(xiàng)目的一般步驟:(1)新鮮干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min,蒸餾水沖洗數(shù)次,待干。(2)浸入10g/L過(guò)碘酸水溶液中10min,蒸餾水沖洗數(shù)次,待完全干燥。(3)放入雪夫液30min,用自來(lái)水沖洗約5min,再用蒸餾水沖洗,然后用20g/L甲基綠復(fù)染20min,水洗,晾干。糖原染色――檢查項(xiàng)目結(jié)果解讀:(1)新鮮干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min,蒸餾水沖洗數(shù)次,待干。(2)浸入10g/L過(guò)碘酸水溶液中10min,蒸餾水沖洗數(shù)次,待完全干燥。(3)放入雪夫液30min,用自來(lái)水沖洗約5min,再用蒸餾水沖洗,然后用20g/L甲基綠復(fù)染20min,水洗,晾干。動(dòng)物材料取用時(shí)需對(duì)動(dòng)物施以麻醉,常用的麻醉劑有氯仿和。福建哪家提供糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家
彈力染色應(yīng)用:(1)動(dòng)靜脈的辨認(rèn):在血管病變時(shí)是動(dòng)脈還是靜脈以及是否為血管壁難辨認(rèn)時(shí),彈力纖維染色有助于辨認(rèn)。有彈力板者為動(dòng)脈,有彈力纖維構(gòu)成血管輪廓者為血管。彈力纖維抗損傷能力較強(qiáng),故彈力性纖維構(gòu)成血管輪廓不易損壞。(2)彈力纖維瘤的診斷:彈力纖維染色可見(jiàn)瘤樣病變內(nèi)有大量彈力纖維增生,非真性。(3)心血管先天性彈力組織增生,這組疾病有先天性內(nèi)膜炎及冠狀動(dòng)脈的彈力纖維組織增生。彈力纖維染色有助于診斷。(4)彈力纖維損傷性疾?。哼@組疾病有肺氣腫、、大動(dòng)脈中層炎癥等,彈力纖維染色有助于這些疾病的觀察診斷。浙江哪家提供糖原染色試劑盒廠家批發(fā)價(jià)糖尿病性腎小球硬化癥或血管病的診斷。
糖原及粘液染色法注意事項(xiàng):1、糖原的固定要及時(shí),而且標(biāo)本要新鮮。2、如用無(wú)水酒精作糖原的固定劑,有它的弊病,因無(wú)水酒精滲透較慢,而且容易產(chǎn)生極化,(極化是糖原顆粒趨向于細(xì)胞的一端)。故用Gendre氏固定液效果較佳,其配法如下:苦味酸飽和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3、各種試劑必須化學(xué)純,亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔凈而干燥,染色缸亦是。4、如果Schiff氏試劑,在經(jīng)過(guò)活性碳吸附漂白后不顯無(wú)色,首先應(yīng)考慮試劑中的偏重亞硫酸鈉是否失效。如果偏重亞硫酸鈉氣味不濃,使用時(shí)可考慮適當(dāng)?shù)脑黾佑昧俊F浯慰紤]堿性品紅本身,常常雖屬同一生產(chǎn)廠家,但不同批號(hào),其效果就可能不同,應(yīng)特別引起注意~
糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水。(2)0.5%過(guò)碘酸水溶液5分鐘。或1%過(guò)碘酸95%酒精溶液(過(guò)碘酸再結(jié)晶應(yīng)重新配制使用)。(3)蒸餾水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分鐘。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘。(6)蘇木素浸染細(xì)胞核2-3分鐘。(7)脫水、透明、封蓋。結(jié)果:糖原呈紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)色。試劑配制:(1)0.5%過(guò)碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏試劑。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,攪拌加熱沸騰,待冷卻至50℃過(guò)濾,加入當(dāng)量鹽酸至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉。置于暗處,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,然后加入少量活性碳并震蕩、過(guò)濾,此時(shí)溶液應(yīng)為無(wú)色。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差。操作簡(jiǎn)單方便,1h內(nèi)即可完成反應(yīng)。
糖原染色(過(guò)碘酸-雪夫反應(yīng))原理多糖中乙二醇基經(jīng)過(guò)碘酸氧化成二醛基與無(wú)色品紅結(jié)合,形成紫紅色化合物。沉積于含糖原的胞漿中。結(jié)果:胞漿中出現(xiàn)彌散狀,顆粒狀,塊狀紅色為陽(yáng)性。無(wú)紅色顆粒為陰性_x005f_x000c_臨床意義1、正常血細(xì)胞的染色反應(yīng)粒系:原粒細(xì)胞糖原含量很低,隨著細(xì)胞的分化成熟,糖原含量逐增加,至成熟階段糖原含量十分豐富。淋巴細(xì)胞:糖原常凝聚成顆?;驂K狀。巨核細(xì)胞-血小板系統(tǒng):PAS反應(yīng)呈粗大的紫色顆?;驁F(tuán)塊。正常紅系:陰性。對(duì)疾病診斷的意義白血病類型的鑒別:急性粒細(xì)胞白血病:原始粒細(xì)胞呈陰性或弱陽(yáng)性反應(yīng),以彌散性為主;急性淋巴細(xì)胞白血病原、幼淋巴細(xì)胞多呈粗顆粒、塊狀陽(yáng)性反應(yīng)。糖原染色顯示在肝或心肌細(xì)胞內(nèi)有大量糖原存在即可確診。浙江如何使用糖原染色試劑盒廠家批發(fā)價(jià)
常需要分別選用相應(yīng)的顯示這些成分的染色方法進(jìn)行特殊染色。福建哪家提供糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家
糖原染色(PAS):(1)原理:過(guò)碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化,生成醛基。醛基與雪夫液中的無(wú)色品紅結(jié)合,形成紫色化合物,定位于細(xì)胞質(zhì)中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,晾干。滴加過(guò)碘酸溶液作用20分鐘,流水沖洗,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,流水沖洗,晾干。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,流水沖洗,晾干鏡檢。(4)臨床意義:根據(jù)染色陽(yáng)性程度和陽(yáng)性物形態(tài)鑒別主要用于急性淋巴細(xì)胞白血病和急性非淋巴細(xì)胞白血病鑒別,還有助于紅白血病與巨幼細(xì)胞貧血和溶血性貧血的鑒別診斷福建哪家提供糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家
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