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糖類染色:糖類從組織化學(xué)技術(shù)角度來分,可分為多糖、中性粘液物質(zhì)、酸性粘液物質(zhì)、粘蛋白及粘脂質(zhì)。多糖主要指糖原,它是一種膠樣液態(tài)存在于肝細(xì)胞、骨骼肌、心肌等處。因糖原在肝臟及心肌疾患及某些的病變中分布和量都有一定改變,故糖原的染色在臨床病理診斷上具有重要意義。(1)肝及心肌糖原沉著癥的診斷:糖原染色顯示在肝或心肌細(xì)胞內(nèi)有大量糖原存在即可確診。(2)糖尿病性腎小球硬化癥或血管病的診斷。(3)高雪氏病與尼曼——匹克氏病的鑒別:前者為陽性、后者為陰性,做此染色較易鑒別。(4)骨內(nèi)骨外尤文氏肉瘤的診斷:此瘤80%細(xì)胞內(nèi)有較多糖原,糖原染色為陽性,所以糖原染色為陽性(大多數(shù)細(xì)胞)可以協(xié)助診斷。(5)腺泡狀軟組織肉瘤與化感瘤:前者棒狀小體糖原染色為陽性。急性單核細(xì)胞白血病原、幼單核細(xì)胞POX染色多呈細(xì)小顆粒弱陽性反應(yīng)。湖南品質(zhì)好的糖原染色試劑盒
PAS技術(shù)是很少可檢測不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。若要冸確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步驟。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,在應(yīng)用PAS技術(shù)之前將糖原從組織切片上除去。人類的唾液被認(rèn)為是消化糖原的一種有效手段,但是出于安全以及缺乏標(biāo)冸唾液的考慮,不主張應(yīng)用唾液。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學(xué)染色,在臨床病理診斷上占著相當(dāng)重要的位置。福建哪家提供糖原染色試劑盒銷售廠家糖原累積病診斷和研究 ,糖尿病的診斷和研究 ,用于某些的診斷等。
彈力染色應(yīng)用:(1)動靜脈的辨認(rèn):在血管病變時是動脈還是靜脈以及是否為血管壁難辨認(rèn)時,彈力纖維染色有助于辨認(rèn)。有彈力板者為動脈,有彈力纖維構(gòu)成血管輪廓者為血管。彈力纖維抗損傷能力較強(qiáng),故彈力性纖維構(gòu)成血管輪廓不易損壞。(2)彈力纖維瘤的診斷:彈力纖維染色可見瘤樣病變內(nèi)有大量彈力纖維增生,非真性。(3)心血管先天性彈力組織增生,這組疾病有先天性內(nèi)膜炎及冠狀動脈的彈力纖維組織增生。彈力纖維染色有助于診斷。(4)彈力纖維損傷性疾?。哼@組疾病有肺氣腫、、大動脈中層炎癥等,彈力纖維染色有助于這些疾病的觀察診斷。
糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水。(2)0.5%過碘酸水溶液5分鐘?;?%過碘酸95%酒精溶液(過碘酸再結(jié)晶應(yīng)重新配制使用)。(3)蒸餾水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分鐘。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘。(6)蘇木素浸染細(xì)胞核2-3分鐘。(7)脫水、透明、封蓋。結(jié)果:糖原呈紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)色。試劑配制:(1)0.5%過碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏試劑。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,攪拌加熱沸騰,待冷卻至50℃過濾,加入當(dāng)量鹽酸至25℃時加入偏重亞硫酸鈉。置于暗處,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,然后加入少量活性碳并震蕩、過濾,此時溶液應(yīng)為無色。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差0.5%過碘酸水溶液5分鐘?;?%過碘酸95%酒精溶液。
染色的一般原則:因檢測細(xì)胞的類型、凋亡誘導(dǎo)劑種類、使用的檢測儀器不同,因而流式檢測的熒光補(bǔ)償也不同,因此建議每次檢測均需使用凋亡誘導(dǎo)處理的細(xì)胞做單陽對照,進(jìn)行熒光補(bǔ)償?shù)恼{(diào)節(jié)。標(biāo)記抗體常用熒光素FITC,EGFP激發(fā)光:488nm發(fā)射光:525nm;使用面較廣,價格便宜。PE激發(fā)光488nm發(fā)射光575nm,此熒光的激發(fā)效率較佳,故此熒光得到的信號較強(qiáng);檢測某些弱表達(dá)的抗原,推薦使用此熒光素。價格較FITC昂貴。APC激發(fā)光633nm,發(fā)射光660nm,在配有雙激光的流式細(xì)胞儀上,此熒光染料可與7-AAD或PI共同使用來避開自帶綠色熒光的樣本。流式細(xì)胞儀相關(guān)試劑盒。在肝糖原染色中用10%甲醛液固定肝組織。浙江口碑好的糖原染色試劑盒量大從優(yōu)
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糖元染色試劑盒細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面。細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分普遍,主要包括。①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究。②生物膜與細(xì)胞器的研究。③細(xì)胞骨架體系的研究。④細(xì)胞增殖及其調(diào)控。⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控。⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化。⑧細(xì)胞工程。PAS染色,全稱過碘酸雪夫染色(PeriodicAcid-SchiffStain),主要用來顯示糖原和其他多糖物質(zhì),因此也稱作糖原染色。另外,此染色方法還可以顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì),以及軟骨、垂體、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜、霉菌等。PAS法的檢測原理在于:過碘酸(也成為高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑。湖南品質(zhì)好的糖原染色試劑盒