細胞凍存液是如何保護細胞的:當溫度進一步下降,細胞內(nèi)外都結冰,產(chǎn)生冰晶損傷。但是如果在溶液中加入冷凍保護劑,則可保護細胞免受溶質損傷和冰晶損傷。因為冷凍保護劑容易同溶液中的水分子結合,從而降低冰點,減少冰晶的形成,并且通過其摩爾濃度降低未結冰溶液中電解質的濃度,使細胞免受溶質損傷,細胞得以在較低溫條件下保存。在復蘇時,一般以很快的速度升溫,1-2分鐘內(nèi)即恢復到常溫,細胞內(nèi)外不會重新形成較大的冰晶,也不會暴露在高濃度的電解質溶液中過長的時間,從而無冰晶損傷和溶質損傷產(chǎn)生,凍存的細胞經(jīng)復蘇后仍保持其正常的結構和功能。冷凍保護劑對細胞的冷凍保護效果還與冷凍速率、冷凍溫度和復溫速率有關。而且不同的冷凍保護劑其冷凍保護效果也不一樣。無血清快速細胞凍存液,是一種新型的快速凍存細胞的保護液,可將細胞置于-80^C直接冷凍保存。上海濟南無血清細胞凍存液
細胞凍存液是如何保護細胞的:細胞這一微小的生命體和地球的其它生命相似,機體的主要成份是由液態(tài)的H2O組成,但是其結構微小復雜,內(nèi)部任何的物理損傷對于它都是致命的。水在低于零度的條件下會結冰。如果將細胞懸浮在純水中,隨著溫度的降低,細胞內(nèi)外的水份都會結冰,所形成的冰晶會造成細胞膜和細胞器的破壞而引起細胞死亡,這種因細胞內(nèi)部結冰而導致的細胞損傷稱為細胞內(nèi)冰晶的損傷。如果將細胞懸浮在溶液中,隨著溫度的降低,細胞外部的水分會首先結冰,從而使得未結冰的溶液中電解質濃度升高。如果將細胞暴露在這樣高溶質的溶液中且時間過長,細胞膜上脂質分子會受到損壞,細胞便發(fā)生滲漏,在復溫時,大量水分會因此進入細胞內(nèi),造成細胞死亡。這種因保存溶液中溶質濃度升高而導致的細胞損傷稱為溶質損傷或稱溶液損傷。石家莊無血清細胞凍存液哪家好無血清細胞凍存液:凍存細胞復蘇率在90%以上。
細胞凍存和復蘇操作步驟:細胞凍存和復蘇采取“慢凍快融”的原則,慢速冷凍可使細胞內(nèi)的水份滲出細胞外,減少細胞內(nèi)形成冰晶的機會,快融以保證細胞外結晶快速融化,避免慢速融化水份滲入細胞內(nèi),再次形成胞內(nèi)冰晶造成對細胞的損傷。細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以比較大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少細胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復蘇細胞應采用快速融化的方法,這樣可以保證細胞外結晶在很短的時間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結晶對細胞造成損傷。
無血清細胞凍存液的用途:無血清細胞凍存液,含多種保護劑成分。一些保護劑,易于穿透細胞,避免細胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細胞,同時另一些保護劑不能穿透細胞,但可以在冰晶形成之前,優(yōu)先結合細胞外的水分子,降低細胞外溶液的電解質濃度,減少陽離子進入細胞的數(shù)量,為多種保護劑組合,在細胞內(nèi)外進行雙重保護,較大提高了細胞復蘇存活率。無血清細胞凍存液不含牛血清,無動物源組份。2-8℃即可穩(wěn)定保存,無需冷凍,即取即用。凍存細胞,無需程序降溫。凍存細胞復蘇率在90%以上。待凍存管中細胞混合液完全融化后,立即加入1 ml細胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細胞混合。
無血清凍存液注意事項:1、請選擇對數(shù)生長期細胞進行凍存。2、凍存液加入細胞后,請盡快放入-80C冰箱凍存。3、本產(chǎn)品凍存細胞可以在-80°C冰箱保存3年以上。4、若需長期凍存細胞,請轉移至液氮罐中貯存。5、凍存液中含DMSO成分,為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套。無血清凍存液特性:1.不含動物成分。2.不需回溫,完全即用型。3.適合各種動物細胞。4.適合無血清培養(yǎng)細胞與含血清培養(yǎng)細胞。5.復蘇細胞存活率高。無血清凍存液用途:1、無血清細胞凍存液用于免疫細胞及干細胞的存儲。2、細胞保藏中心,無血清細胞凍存液用于細胞株的長期保存。3、科研高校,無血清細胞凍存液用于細胞株凍存。4、無血清細胞凍存液用于醫(yī)院樣本庫細胞樣本保存。無血清凍存液穩(wěn)定性及保存條件:1、置于2~8℃避光保存,有效期為1年;置于-20℃保存,有效期為3年;2、本產(chǎn)品請于保質期內(nèi)使用,超過保質期,必須放棄使用;3、為確保產(chǎn)品質量,請避免反復凍融相關產(chǎn)品。無血清細胞凍存液用于其他類型哺乳動物細胞的儲存。上海濟南無血清細胞凍存液
開蓋之前,用70%的乙醇或異丙醇擦拭瓶身。上海濟南無血清細胞凍存液
細胞凍存,我們應該注意哪些事項:1、凍存細胞是為了留種,所以要選擇高濃度的細胞量進行凍存。正常情況下,當細胞濃度達到1*105/ml時即可凍存,具體是多少量主要根據(jù)個人觀察。2、二甲基亞砜(DMSO)因為穿透細胞的能力較強,因此作為常用的凍存劑,也可以叫做細胞保護劑加入到細胞懸液中。網(wǎng)上有些分享說道,如果選用DMSO,整個細胞懸液的制作過程都要在4℃環(huán)境下進行。本人采用過這種方法凍存過A549和某一原代細胞,發(fā)現(xiàn)A549復蘇存活率和正常凍存的過程相比并沒有明顯區(qū)別,而原代細胞的接種率確實有所上升,可能是因為是A549細胞比較皮實,這種方法更適用于比較脆弱的細胞吧。上海濟南無血清細胞凍存液