RNA由核糖核苷酸經(jīng)磷酸二酯鍵縮合而成長鏈狀分子。一個(gè)核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和堿基構(gòu)成。在細(xì)胞中,RNA種類繁多。根據(jù)結(jié)構(gòu)功能的不同,RNA主要分三類,即tRNA、rRNA,以及mRNA。mRNA是依據(jù)DNA序列轉(zhuǎn)錄而成的蛋白質(zhì)合成模板;tRNA是mRNA上遺傳密碼的識(shí)別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)者;rRNA是組成核糖體的部分,而核糖體是蛋白質(zhì)合成的場所。細(xì)胞中還有許多種類和功能不一的小型RNA,像是組成剪接體(spliceosome)的snRNA,負(fù)責(zé)rRNA成型的snoRNA,以及參與RNAi作用的miRNA與siRNA等,可調(diào)節(jié)基因表達(dá)。RNA提取試劑注意事項(xiàng):為防止濺入眼睛,請戴防護(hù)眼鏡或使用透明保護(hù)屏。南京北京RNA提取試劑
植物RNA快速提取試劑盒:1.固體組織破碎設(shè)備??捎孟铝醒b置之一:1)玻璃勻漿器。泡酸清潔,用高壓滅菌蒸餾水洗滌數(shù)次。2)研缽。適用于液氮凍存組織的研磨,清洗方法同玻璃勻漿器。3)高速機(jī)械勻漿器(Polytron,Tekmar或類似產(chǎn)品),打開開關(guān),在蒸餾水中清洗分散器頭數(shù)次。2.高壓蒸汽30分鐘消毒一次性吸頭離心管。RNA沉淀溶解之后,應(yīng)嚴(yán)格使用高壓消毒的一次性用品。然而PlantRNAtrip能在RNA酶污染環(huán)境下工作,在裂解步驟可使用未高壓但潔凈的一次性吸頭和離心管,但光推薦在緊急情況下這樣做。3.普通雙蒸水,高壓消毒20分鐘。用于沖洗器皿,配制瓊脂糖凝膠和電泳用緩沖液。DEPC處理的雙蒸水。加DEPC到水中至終濃度為0.01%v/v,室溫過夜,高壓消毒30分鐘。用于溶解RNA,配制TE緩沖液和75%乙醇。4.濕冰。在冰上進(jìn)行操作有助于減少RNA降解。5.其它用品。電泳槽,雙蒸水沖洗。離心機(jī)和加樣器,無需處理。6.戴手套。注意某些實(shí)驗(yàn)如提取質(zhì)粒DNA如使用極大量RNA酶,為防污染,須較全仔細(xì)清洗實(shí)驗(yàn)器具和實(shí)驗(yàn)區(qū)域。深圳正規(guī)RNA提取試劑哪里買總RNA提取試劑,適用于動(dòng)植物細(xì)胞或組織及細(xì)菌的總RNA抽提,可有效防止RNA在提取過程中的降解。
細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點(diǎn):1.有效分離和提取細(xì)胞質(zhì)RNA,與細(xì)胞核RNA。2.方便快捷的離心柱操作方式。3.提取的RNA,品質(zhì)高,產(chǎn)量多。4.試劑盒不含苯酚,可提取所有RNA(含RNA)。5.純化的RNA可用于任何應(yīng)用,包括RT-PCR,qRT-PCR,RNA-Seq,陣列等。6.細(xì)胞質(zhì)RNA不含DNA,可直接用于RT-PCR/qRT-PCR。7.試劑盒可用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞或者組織樣品的提取。在某些情況下,研究者們更希望能夠提取特定分餾的RNA,而不是總RNA。例如,在一些表達(dá)譜研究中,較好能夠提取成熟的細(xì)胞質(zhì)(Cytoplasmic)RNA?;蛘?,在研究分析未剪接的RNA前體時(shí),提取細(xì)胞核(Nuclear)RNA會(huì)是一個(gè)更好的選擇。然而,市面上絕大多數(shù)廠家只能為您分別提供2種試劑盒來提取細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞核的RNA,不光費(fèi)用高昂,而且浪費(fèi)大量的材料與時(shí)間。該EpiQuik?總RNA提取試劑盒提供了一種快速,簡單,經(jīng)濟(jì)有效的方法。
RNA是核糖核酸,是存在于生物細(xì)胞以及部分病菌、類病菌中的遺傳信息載體。RNA是由核糖核苷酸經(jīng)磷酸二酯鍵縮合而成的長鏈狀分子。一個(gè)核糖核苷酸分子則由磷酸,核糖和堿基構(gòu)成。在細(xì)胞中,根據(jù)結(jié)構(gòu)功能的不同,RNA主要分三類,即tRNA、rRNA,以及mRNA。mRNA是依據(jù)DNA序列轉(zhuǎn)錄而成的蛋白質(zhì)合成模板;tRNA是mRNA上遺傳密碼的識(shí)別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)者;rRNA是組成核糖體的部分,而核糖體是蛋白質(zhì)合成的機(jī)械。細(xì)胞中還有許多種類和功能不一的小型RNA,可調(diào)節(jié)基因表達(dá)。而其他如I、II型內(nèi)含子、HDV、核糖體RNA等等都有催化生化反應(yīng)過程的活性,即具有酶的活性,這類RNA被稱為核酶。適用樣品:全血,哺乳動(dòng)物細(xì)胞,細(xì)菌細(xì)胞和菌類細(xì)胞。
與DNA不同,RNA一般為單鏈長分子,很多RNA也需要通過堿基配對原則形成一定的二級結(jié)構(gòu)乃至三級結(jié)構(gòu)來行使生物學(xué)功能。RNA是以DNA的一條鏈為模板,以堿基互補(bǔ)配對原則,轉(zhuǎn)錄而形成的一條單鏈,主要功能是實(shí)現(xiàn)遺傳信息在蛋白質(zhì)上的表達(dá),是遺傳信息向表型轉(zhuǎn)化過程中的橋梁。在此過程中,轉(zhuǎn)運(yùn)RNA是攜帶與三聯(lián)體密碼子對應(yīng)的氨基酸殘基與正在進(jìn)行翻譯的mRNA結(jié)合,而后核糖體RNA將各個(gè)氨基酸殘基通過肽鍵連接成肽鏈進(jìn)而構(gòu)成蛋白質(zhì)分子。有些生物,例如一些病菌,也直接使用RNA作為遺傳信息的載體,而不是DNA。為了提高裂解效果,可以將裂解緩沖液與機(jī)械裂解步驟(研磨珠破碎)匹配。溫州正規(guī)RNA提取試劑銷售廠家
帶口罩、帽子,屏住呼吸、不說話,帶乳膠手套并要時(shí)常更換。南京北京RNA提取試劑
酵母RNA的提取方法:稀堿法是屬化學(xué)破壁法,其方法是在一定堿濃度下,使構(gòu)成細(xì)胞壁的蛋白質(zhì)、脂肪及糖的化合物得到水解,從而破壞細(xì)胞壁,此法對堿的濃度及提取溫度要求比較嚴(yán)格,堿的濃度不可過濃,應(yīng)控制在1%,并且對提取溫度也有一定的要求,提取時(shí)間短。因?yàn)樵谶^分劇烈的條件下,容易使核糖核酸分子內(nèi)的酯鍵斷裂,使核糖核酸降解而影響收得率。酵母菌作為重要的模式生物,是遺傳學(xué)和分子生物學(xué)的重要研究材料。由于酵母菌的細(xì)胞壁成分復(fù)雜,且較原核生物厚,難于破碎,因此酵母菌總RNA的抽提純化要比原核生物總RNA的抽提純化困難的多。如何有效地破碎細(xì)胞壁并保證RNA的完整性,是獲得高質(zhì)量酵母菌總RNA的關(guān)鍵問題??俁NA的提取方法還有很多,如Trizol法、異硫氰酸胍法、十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)法、尿素法、十二烷基硫酸鈉(SDS)法、熱硼酸鹽法等,這些方法各有優(yōu)缺點(diǎn),不同的方法適用于不同類型的材料。南京北京RNA提取試劑