蕪湖無血清細胞凍存液產(chǎn)品介紹

無血清細胞凍存液的用途：無血清細胞凍存液，含多種保護劑成分。一些保護劑，易于穿透細胞，避免細胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細胞，同時另一些保護劑不能穿透細胞，但可以在冰晶形成之前，優(yōu)先結(jié)合細胞外的水分子，降低細胞外溶液的電解質(zhì)濃度，減少陽離子進入細胞的數(shù)量，為多種保護劑組合，在細胞內(nèi)外進行雙重保護，較大提高了細胞復蘇存活率。無血清細胞凍存液不含牛血清，無動物源組份。2-8℃即可穩(wěn)定保存，無需冷凍，即取即用。凍存細胞，無需程序降溫。凍存細胞復蘇率在90%以上。無血清凍存液用途：為確保產(chǎn)品質(zhì)量，請避免反復凍融相關產(chǎn)品。蕪湖無血清細胞凍存液產(chǎn)品介紹

干細胞無血清凍存液操作事項：使用說明：1. 細胞消化和計數(shù)，用胰酶對待凍存的細胞進行消化，并對細胞進行計數(shù)。2. 1000轉(zhuǎn)/min離心5分鐘（4℃），去掉上清。3. 根據(jù)細胞計數(shù)的情況，加入適量的干細胞無血清凍存液，使細胞密度在1×106左右（或根據(jù)自己希望達到的細胞密度）。4. 輕輕地重懸細胞（務必重懸均勻）。5. 將重懸的細胞按等份加入到滅菌的凍存管（需提前做好標記或者貼上標簽）中，旋緊凍存管蓋。6. 將凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒直接放入-80℃。7. 第二天將細胞從-80℃轉(zhuǎn)移到液氮中。注意事項：1.用處于對數(shù)生長期的細胞進行凍存。2.控制好胰酶的消化時間，切記消化過度，會影響復蘇效果。3.重懸細胞的過程中，請務必要輕柔，以免損傷細胞，但同時也一定要充分重懸，這樣細胞在復蘇時才不會成團。4.細胞操作請注意無菌。長沙無血清細胞凍存液廠家無血清細胞凍存液產(chǎn)品性能：特別配方（主要成分為DMSO和氨基酸）有效提高細胞凍存活率和復蘇活力。

無血清快速細胞凍存液凍存細胞復蘇方法：1.從冰箱里取出細胞冷凍保存管，立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。2.待凍存管中細胞混合液完全融化后，立即加入1ml細胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細胞混合，再將細胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細胞培養(yǎng)基的試管中，混合均勻。3.離心收集培養(yǎng)細胞（參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min），移去上清液。4.清洗細胞，充分洗凈殘留凍存液。5.加入適量的新鮮細胞培養(yǎng)基，使用移液管緩緩地均勻細胞混合液。適量地稀釋后，將細胞混合液移至事先準備好的培養(yǎng)瓶中。6.鏡檢后，研究者可根據(jù)各自方法和需要來進行細胞培養(yǎng)。

細胞凍存液是如何保護細胞的：細胞這一微小的生命體和地球的其它生命相似，機體的主要成份是由液態(tài)的H2O組成，但是其結(jié)構(gòu)微小復雜，內(nèi)部任何的物理損傷對于它都是致命的。水在低于零度的條件下會結(jié)冰。如果將細胞懸浮在純水中，隨著溫度的降低，細胞內(nèi)外的水份都會結(jié)冰，所形成的冰晶會造成細胞膜和細胞器的破壞而引起細胞死亡，這種因細胞內(nèi)部結(jié)冰而導致的細胞損傷稱為細胞內(nèi)冰晶的損傷。如果將細胞懸浮在溶液中，隨著溫度的降低，細胞外部的水分會首先結(jié)冰，從而使得未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高。如果將細胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時間過長，細胞膜上脂質(zhì)分子會受到損壞，細胞便發(fā)生滲漏，在復溫時，大量水分會因此進入細胞內(nèi)，造成細胞死亡。這種因保存溶液中溶質(zhì)濃度升高而導致的細胞損傷稱為溶質(zhì)損傷或稱溶液損傷。無血清細胞凍存液產(chǎn)品特色：各批產(chǎn)品之間有更高的產(chǎn)品質(zhì)量一致性。

使用方法：1)細胞超凈臺無菌環(huán)境，1.5mlEP管內(nèi)加入細胞混懸劑均勻混懸細胞，細胞終濃度為5×106個/ml，混懸液體積為200μl。細胞凍存劑冰水混合物中預冷，逐滴加入細胞凍存劑800μl，細胞混懸劑與細胞凍存劑的體積比控制在1:4。2)開啟程序性降溫，降溫速率為1℃/min，較后降溫至-80℃以下進行凍存。將比較例1凍存后細胞的復蘇率與實施例5凍存后細胞的復蘇率進行對比，具體結(jié)果如附圖1所示，可見采用本發(fā)明的凍存方法能夠明顯提高細胞的復蘇率。其他實施例通過與比較例1進行比較，也得到相同的試驗結(jié)果。本發(fā)明的凍存方法不僅可以明顯提高凍存后細胞復蘇率，同時還可減少不同批次細胞凍存復蘇率不穩(wěn)定、以及避免由血清中的支原體，細菌，朊細菌及其他細菌顆粒引發(fā)的污染。無血清凍存液注意事項：凍存液加入細胞后，請盡快放入-80C冰箱凍存。溫州武漢無血清細胞凍存液

存細胞時需現(xiàn)配凍存液(如購買市面上通用的含血清細胞凍存液。蕪湖無血清細胞凍存液產(chǎn)品介紹

細胞凍存秘籍：程序1.凍存前檢查凍存前，細胞應處于指數(shù)生長期，確保細胞處于健康狀態(tài)。理想情況下，應在收獲細胞前24小時更換培養(yǎng)基。建議對培養(yǎng)物進行微生物污染物，特別是支原體的檢測，并通過適當?shù)姆椒?，如STR分析確定其身份。如果在培養(yǎng)過程中使用物品，那么建議在冷凍前1到2周不使用物品，這樣如果出現(xiàn)污染，可以更容易地發(fā)現(xiàn)。2.收集細胞通常，您可以使用常規(guī)細胞傳代的實驗程序來收獲細胞。細胞收獲期間盡可能溫和操作。本程序推薦的試劑量是針對為75平方厘米（T-75）培養(yǎng)瓶；若使用其他培養(yǎng)容器，請相應調(diào)整所用試劑量。A.使用無菌吸管，取出并丟棄培養(yǎng)基。請妥善處置與細胞接觸的任何材料和溶液。B.用5到10ml CMF-PBS沖洗細胞，去除所有痕量的血清。C.加入3到5ml的胰酶（在CMF-PBS中），37℃孵育。預熱酶溶液通常會縮短處理時間。蕪湖無血清細胞凍存液產(chǎn)品介紹