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細胞內有空泡,是否是正常現(xiàn)象?
部分細胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐藥株等),這個是正?,F(xiàn)象。如果只有少數(shù)細胞有內出現(xiàn)極少空泡,則很可能是細胞狀態(tài)不佳,可以通過調整血清濃度,控制消化,控制傳代比例及時間等方法來調整細胞狀態(tài);如果大部分細胞出現(xiàn)空泡,且單個細胞內空泡數(shù)目偏多,則可能細胞代次較高,細胞老化所致,需更換代次較早的細胞。
細胞傳兩代后開始逐漸死亡的原因
很可能是培養(yǎng)體系不適合細胞(未使用推薦的培養(yǎng)體系);或者消化過度,對細胞有嚴重影響;或者是傳代比例不合適(具有密度依賴性的細胞,傳代太稀;或者生長較快的細胞,傳代較密,細胞嚴重堆疊生長)。 全自動細胞計數(shù)儀貴嗎?江蘇細胞計數(shù)儀價格多少
活死細胞的鑒別方法
活細胞的鑒定在生物學和醫(yī)學上具有很重要的意義。細胞培養(yǎng)過程中要隨時記錄細胞的生長情況,需要經(jīng)常測定細胞的存活率;在zhong瘤細胞的研究中,為了檢驗各種藥物對zhong瘤細胞的殺傷力,也需要測定zhong瘤細胞的存活率。在臨床醫(yī)學中死活細胞的鑒定也有很大的應用,例如為了檢測某一男子的生育能力,測定精子細胞的存活力是比較常用的辦法。死活細胞的鑒定方法有很多種,常用的有染色法和儀器分析法。染色法簡便,易于操作,但是通過直接的形態(tài)觀察來鑒別細胞死活,實驗結果很容易受操作者的主觀因素的影響,存在一定的誤差,所以,在實際操作中也常采用一些儀器來進行精確的批量檢測。 新能源細胞計數(shù)儀價目表細胞計數(shù)儀的使用壽命。
二價離子抑制胰蛋白酶活性嗎?
二價離子的確抑制胰蛋白酶活性。
使用胰蛋白酶加入EDTA是為什么?
EDTA用來螯合游離的鎂離子和鈣離子,以便保持抑制胰蛋白酶的活性。建議胰蛋白酶處理細胞前,用EDTA清洗細胞,以消除來自培養(yǎng)基中所有的二價離子。
可否使用與原先不同的培養(yǎng)基?
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應的細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,易造成細胞狀態(tài)不好,**終造成細胞無法存活。
染色法鑒定機理
染色法分化學染色法和熒光染色法,根據(jù)染色機理的不同,染料或使死細胞著色,或使活細胞著色。死活細胞在生理機能和性質上的差異主要包括:
死活細胞細胞膜通透性的差異:
活細胞的細胞膜是一種選擇性膜,對細胞起保護和屏障作用,只允許物質選擇性的通過;而細胞死亡之后,細胞膜受損,通透性增加。常用的以臺盼藍鑒別細胞死活的方法就是利用了這一性質。
臺盼藍,又稱錐藍,是一種陰離子型染料,不能透過完整的細胞膜。所以經(jīng)臺盼藍染色后只能使死細胞著色,而活細胞不被著色 全自動細胞計數(shù)儀對比血球計數(shù)板的缺點。
細胞培養(yǎng)實驗室之孵育區(qū)以及制備,儲藏,清洗和消毒滅菌區(qū)
孵育區(qū)
本區(qū)對無菌的要求雖不比無菌區(qū)嚴格,但仍需清潔無塵,因此也應設置在干擾少而非來往穿行的區(qū)域。孵育可在孵箱或可控制溫度的溫室中進行,后者費用高,一般實驗室多采用孵箱進行工作。
制備區(qū)
在該區(qū)主要進行培養(yǎng)液及有關培養(yǎng)用的液體等的制備。
儲藏區(qū)
主要存放各類冰箱、干燥箱、液氮罐、無菌培養(yǎng)液、培養(yǎng)瓶等,此環(huán)境也需要清潔無塵。
清洗和消毒滅菌區(qū)
清潔和消毒滅菌區(qū)應與其他區(qū)域分開,主要進行所有細胞培養(yǎng)器皿的清洗、準備、消毒及三蒸水制備等工作。 細胞計數(shù)儀的型號對比。天津有什么細胞計數(shù)儀
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可否使用與原先不同的血清種類?
不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞為何生長不均勻?
細胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻,或者放入時搖勻,但在細胞貼壁前,又移動了培養(yǎng)瓶,頻繁開關培養(yǎng)箱引起的振動或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少,培養(yǎng)箱擱板表面不平整,這些因素會導致細胞生長不均勻。 江蘇細胞計數(shù)儀價格多少
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