單細(xì)胞測(cè)序?qū)嶒?yàn)的第一步是單細(xì)胞懸液的制備,而懸液制備中細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性直接影響單細(xì)胞測(cè)序的數(shù)據(jù)質(zhì)量,但是關(guān)于細(xì)胞計(jì)數(shù)您真的了解嗎?
目前細(xì)胞計(jì)數(shù)主要使用臺(tái)盼藍(lán)染色法和雙熒光AO/PI染色法。
1)臺(tái)盼藍(lán)染色原理:臺(tái)盼藍(lán)不能透過活細(xì)胞正常完整的細(xì)胞膜,故活細(xì)胞不著色。而死細(xì)胞的細(xì)胞膜透性增高,可使染料進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)而使細(xì)胞著色(藍(lán)色)。
2)雙熒光AO/PI染色原理:吖啶橙(AO)可以通過完整的細(xì)胞膜,嵌入所有細(xì)胞(活細(xì)胞和死細(xì)胞)的細(xì)胞核,呈現(xiàn)綠色熒光;碘化丙啶(PI)只能通過不完整的細(xì)胞膜,即死細(xì)胞的細(xì)胞膜,嵌入所有死細(xì)胞的細(xì)胞核,呈現(xiàn)紅色熒光。
拓開細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,擁有自動(dòng)化,合規(guī)化,高通量等優(yōu)勢(shì),能夠幫助您在實(shí)驗(yàn)室里高效率,高標(biāo)準(zhǔn)的完成細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)胞檢測(cè)等工作,是您細(xì)胞科研領(lǐng)域的強(qiáng)力伙伴。 全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀怎么檢測(cè)?標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀比較價(jià)格
如何讓細(xì)胞計(jì)數(shù)更加的準(zhǔn)確
優(yōu)化細(xì)胞計(jì)數(shù)的設(shè)備配置
無論是手動(dòng)計(jì)數(shù)還是依靠TANK-CA0008全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀自帶軟件算法計(jì)數(shù),調(diào)整焦距和曝光設(shè)置都很重要,以確保細(xì)胞盡可能有比較好的可見性/能見度,終獲得準(zhǔn)確的細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果。比較好的聚焦和曝光將在細(xì)胞膜和背景之間,有非常非常非常鮮明的對(duì)比。
血球計(jì)數(shù)板的腔室需要調(diào)整到合適的高度
血球計(jì)數(shù)板有多種型號(hào)規(guī)格可供選擇。不同型號(hào)的腔室高度和深度在設(shè)計(jì)上都差異巨大。實(shí)驗(yàn)人員在計(jì)算細(xì)胞數(shù)量時(shí)要注意一些細(xì)節(jié)以避免錯(cuò)誤。 北京通用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的成本。
眾所周知,活細(xì)胞密度(VCD)和活率(viability)是評(píng)估哺乳動(dòng)物細(xì)胞系生長(zhǎng)狀態(tài)的重要指標(biāo)。生物制藥研發(fā)人員進(jìn)行懸浮細(xì)胞培養(yǎng),每天所不能避免的工作,就是取樣計(jì)數(shù)。使用細(xì)胞計(jì)數(shù)板進(jìn)行人工計(jì)數(shù)無疑是金標(biāo)準(zhǔn)方法。
但這個(gè)傳統(tǒng)方法其勞動(dòng)強(qiáng)度十分驚人,樣品量少的時(shí)候還能吃得消,樣品量大一些,甚至于要做大規(guī)模的DOE實(shí)驗(yàn)時(shí),估計(jì)很多實(shí)驗(yàn)人員想死的心都會(huì)有。而且人工計(jì)數(shù)有較強(qiáng)的主觀性,對(duì)操作人員的經(jīng)驗(yàn)及操作熟練度有一定要求,導(dǎo)致有時(shí)候數(shù)據(jù)的重現(xiàn)性和可比性會(huì)受到質(zhì)疑。
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原代細(xì)胞培養(yǎng)后細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大,營(yíng)養(yǎng)障礙,影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞使得培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株),可以進(jìn)行細(xì)胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的比較大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料,便于實(shí)驗(yàn)。
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如何獲取高質(zhì)量的細(xì)胞懸液,下面就帶您一步步***從組織到細(xì)胞懸液的旅程,讓細(xì)胞懸液制備不再成為困擾您的難題。
樣本準(zhǔn)備
新鮮組織樣本是制備細(xì)胞懸液的首要條件,新鮮組織從***取下后,去除周圍的脂肪、結(jié)締組織或者壞死組織,用預(yù)冷的PBS或者生理鹽水沖洗干凈,快速轉(zhuǎn)移到解離實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行細(xì)胞懸液制備,一般1個(gè)黃豆大小的組織量(200 mg)即可滿足一次組織解離。如果收集到新鮮樣本后無法立即進(jìn)行懸液制備,可暫時(shí)用組織保存液4℃保存,盡快完成細(xì)胞懸液制備。 全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的耗材貴嗎?江蘇多功能細(xì)胞計(jì)數(shù)儀
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可否使用與原先不同的血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。
細(xì)胞為何生長(zhǎng)不均勻?
細(xì)胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻,或者放入時(shí)搖勻,但在細(xì)胞貼壁前,又移動(dòng)了培養(yǎng)瓶,頻繁開關(guān)培養(yǎng)箱引起的振動(dòng)或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少,培養(yǎng)箱擱板表面不平整,這些因素會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)不均勻。 標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀比較價(jià)格
上海拓開生物科技有限公司致力于電子元器件,是一家生產(chǎn)型公司。公司業(yè)務(wù)涵蓋葡萄糖乳酸分析儀,生化分析儀,智能控制系統(tǒng),細(xì)胞計(jì)數(shù)儀等,價(jià)格合理,品質(zhì)有保證。公司秉持誠(chéng)信為本的經(jīng)營(yíng)理念,在電子元器件深耕多年,以技術(shù)為先導(dǎo),以自主產(chǎn)品為重點(diǎn),發(fā)揮人才優(yōu)勢(shì),打造電子元器件良好品牌。上海拓開立足于全國(guó)市場(chǎng),依托強(qiáng)大的研發(fā)實(shí)力,融合前沿的技術(shù)理念,飛快響應(yīng)客戶的變化需求。