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培養(yǎng)基的制備:正確制備培養(yǎng)基時(shí)微生物檢驗(yàn)的較基礎(chǔ)步驟之一。使用脫水培養(yǎng)基和其他成分,尤其是含有有毒物質(zhì)(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時(shí),應(yīng)遵守良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范和生產(chǎn)廠商提供的使用說(shuō)明。培養(yǎng)基的不正確制備會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基出現(xiàn)質(zhì)量問(wèn)題。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)嚴(yán)格按照廠商提供的使用說(shuō)明配置。記錄所有相關(guān)數(shù)據(jù),如質(zhì)量/體積、pH、制備日期、滅菌條件和制備人員等。使用各別成分制備培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)按照配方準(zhǔn)確配制,記錄所有細(xì)節(jié)信息,如;培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級(jí)別、每個(gè)成分物質(zhì)含量、制造商、批號(hào)、pH、培養(yǎng)基體積(分裝體積)、無(wú)菌措施(包括實(shí)施的方式、溫度及時(shí)間)、配置日期、人員等,以便潮源?;A(chǔ)培養(yǎng)基:含有細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需的基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),可供大多數(shù)細(xì)菌生長(zhǎng)。安徽瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備儀
培養(yǎng)基制備器:主要應(yīng)用于液體培養(yǎng)基及微生物培養(yǎng)基的培養(yǎng)基制備器。高效的加熱和冷卻,良好的加熱元件能確??焖偌訜帷E囵B(yǎng)基容器外壁的水循環(huán)能保證快速冷卻。通過(guò)熱交換器不斷地將熱的去離子水冷卻??傃h(huán)時(shí)間為60至120分鐘,包括加熱、滅菌和冷卻,具體時(shí)間取決于容器的大小,培養(yǎng)基的量和冷卻水的溫度。無(wú)菌過(guò)濾的支持壓力可以防止培養(yǎng)基發(fā)泡或溢沸。觸摸屏技術(shù),新使滅菌器操作起來(lái)有了更多的選擇,增加了靈活性。加塞后,將全部試管用麻繩或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一層牛皮紙,以防止滅菌時(shí)冷凝水潤(rùn)濕棉塞,其外再用一道線繩或橡皮筋扎好,用記號(hào)筆注明培養(yǎng)基名稱、組別、配制日期。安徽瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備儀半固體培養(yǎng)基,指在液體培養(yǎng)基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。
培養(yǎng)基的安全分裝:無(wú)菌補(bǔ)料:通過(guò)分裝口可以定量添加無(wú)菌添加劑。大尺寸的分裝口帶有安全鎖。通過(guò)使用一個(gè)瓶子將添加劑添加到分裝開口或通過(guò)一個(gè)septum膜,使用注射器將添加劑加入,確保了添加劑的無(wú)菌添加。無(wú)菌分裝:培養(yǎng)基制備器的分裝口可以在分裝的時(shí)候打開,用于無(wú)菌分裝培養(yǎng)基。硅膠管是使用分裝接頭連接到分裝口。為了確保培養(yǎng)基的無(wú)菌分裝,硅膠管和分裝接頭必須提前在滅菌器中滅菌。培養(yǎng)基可以通過(guò)集成的空壓機(jī)產(chǎn)生的無(wú)菌空氣壓力分裝或通過(guò)連接到常見的蠕動(dòng)泵或其他集成成泵的裝置,來(lái)進(jìn)行培養(yǎng)基的分裝。分裝選項(xiàng):制備和滅菌過(guò)的培養(yǎng)基可以通過(guò)一個(gè)軟管進(jìn)行分裝。在每次滅菌進(jìn)程中,內(nèi)吸管和分裝口也通過(guò)進(jìn)入的蒸汽進(jìn)行了滅菌。分裝軟管和連接到該軟管的分裝接頭必須使用合適的蒸汽滅菌工藝預(yù)先滅菌,并且必須在無(wú)菌條件下連接到分裝口。
培養(yǎng)基的使用:1.瓊脂培養(yǎng)基的融化:將培養(yǎng)基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高壓鍋中的蒸汽)融化。經(jīng)過(guò)高壓滅菌的培養(yǎng)基盡量減少重新加熱的時(shí)間,避免過(guò)度加熱。培養(yǎng)基融化后立即移開,室溫靜置片刻(約2min),以免玻璃容器發(fā)生破裂。融化后的培養(yǎng)基放入47℃~50℃恒溫水浴鍋中保溫,冷卻到47℃~50℃所需的時(shí)間取決于培養(yǎng)基的類型、體積和在水鍋里的分裝量。融化后內(nèi)培養(yǎng)基應(yīng)盡快使用,放置時(shí)間一般不超過(guò)4h。剩余的培養(yǎng)基固后不得再次融化使用。特別是靈敏性培養(yǎng)基,應(yīng)根據(jù)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn),縮短融化后放置的時(shí)間。固體培養(yǎng)基,一類配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)。
配制培養(yǎng)基需要哪些制備:(1)稱出規(guī)定數(shù)量的瓊脂和蔗糖,加水直到培養(yǎng)基較終容積的34,加熱溶解,完全融解后的溶液是透明的。在配制液體培養(yǎng)基(不加瓊脂)時(shí)無(wú)需加熱。(2)按需要加入一定量的各種貯存母液,包括生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)和其他特殊附加物。吸取母液要使用專一的移液管。如有必要,培養(yǎng)基中所需的維生素,可在高壓滅菌之后通過(guò)減壓過(guò)濾裝置或微孔過(guò)濾器滅菌后再加入。(3)蒸餾水定容。充分混合后調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,一般以5.66.0為好。(4)培養(yǎng)基分裝,分裝量一般以占培養(yǎng)容器的1514為宜。之后在24h內(nèi)完成高壓滅菌,也可以高壓滅菌后再進(jìn)行培養(yǎng)基的無(wú)菌分裝,室溫下存放備用。暫時(shí)不用的培養(yǎng)基應(yīng)放置于10攝氏度下保存,而含有生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)的培養(yǎng)基在45攝氏度保存更佳。選擇性培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基。安徽瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備儀
液體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基的對(duì)應(yīng)詞,是微生物或動(dòng)植物細(xì)胞的液狀培養(yǎng)基。安徽瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備儀
培養(yǎng)基制備技術(shù):一、玻璃器皿的清洗:在制備培養(yǎng)基的過(guò)程中,首先要使用一些玻璃器皿,如試管、三角瓶、培養(yǎng)皿、燒杯和吸管等。這些器皿在使用前都要根據(jù)不同的情況,經(jīng)過(guò)一定的處理,洗刷干凈。有的還要進(jìn)行包裝,經(jīng)過(guò)滅菌等準(zhǔn)備就緒后,才能使用。1、新購(gòu)的玻璃器皿:除去包裝沾染的污垢后,先用熱肥皂水刷洗,流水沖凈,再浸泡于1~2%的工業(yè)鹽酸中數(shù)小時(shí),使游離的堿性物質(zhì)除去,再以流水沖凈。對(duì)容量較大的器皿,如大燒瓶、量筒等,洗凈后注入濃鹽酸少許,轉(zhuǎn)動(dòng)容器使其內(nèi)部表面均沾有鹽酸,數(shù)分鐘后傾去鹽酸,再以流水沖凈,倒置于洗滌架上將水空干,即可使用。2、用過(guò)的玻璃器皿:凡確無(wú)病原菌或未被帶菌物污染的器皿,使用后可隨時(shí)沖洗,吸取過(guò)化學(xué)試劑的吸管,可先浸泡于清水中,待到一定數(shù)量后再集中進(jìn)行清洗。有可能被病原菌污染的器皿,必須經(jīng)過(guò)適當(dāng)消毒后,將污垢除去,用皂液洗刷,再用流水沖洗干凈。安徽瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備儀
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