培養(yǎng)基防止污染應(yīng)該注意以下事項(xiàng):確認(rèn)工作細(xì)胞庫(kù)是否被污染,確認(rèn)毒種工作種子批是否被污染,確認(rèn)所用培養(yǎng)基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用細(xì)菌、病菌及支原體無(wú)菌試驗(yàn)來(lái)確認(rèn)并排除。同時(shí)要對(duì)無(wú)菌試驗(yàn)培養(yǎng)基的靈敏度進(jìn)行驗(yàn)證。實(shí)際生產(chǎn)中,可以從配制好的培養(yǎng)液中取少量加入營(yíng)養(yǎng)瓊脂于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),48小時(shí)即可觀察有無(wú)污染。其它:高壓滅菌設(shè)備、過(guò)濾除菌設(shè)備均應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證,確保滅菌和除菌效果;前者應(yīng)在投產(chǎn)前及其后的每6個(gè)月進(jìn)行驗(yàn)證,后者應(yīng)在每次除菌前、后進(jìn)行驗(yàn)證工作(至少應(yīng)在除菌后進(jìn)行一次)。另外,應(yīng)將有毒區(qū)與無(wú)毒區(qū)嚴(yán)格分開(kāi),并有各自自立的空氣凈化系統(tǒng)及孵室,有毒區(qū)對(duì)無(wú)毒區(qū)應(yīng)保持相對(duì)負(fù)壓,防止病毒對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞(尤其是細(xì)胞庫(kù))的污染。有時(shí)需要在培養(yǎng)基中加入消泡沫劑以減少泡沫的產(chǎn)生,或適當(dāng)提高滅菌溫度。寧夏自動(dòng)攪拌培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基制備器:1.多功能蠕動(dòng)泵:該儀器的明顯特征是高精密度和高速度??蛇x擇從0.1到999ml不等的劑量量配器,實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)基定量分裝,系統(tǒng)運(yùn)行的精確度達(dá)到±0.5﹪。系統(tǒng)自動(dòng)調(diào)整供給樣品劑量保證了重現(xiàn)性結(jié)果。2.自動(dòng)管閥:經(jīng)濟(jì)的分配法。在培養(yǎng)基器皿中事先選好一定的輕微的余壓來(lái)推動(dòng)樣品流動(dòng)。MediaPreo控制閥門(mén)開(kāi)關(guān)。容量一達(dá)到所需,MediaPrep就會(huì)開(kāi)始運(yùn)行樣品量配器并根據(jù)培養(yǎng)基的黏度調(diào)整樣品劑量。3.其他系統(tǒng):可直接連接標(biāo)準(zhǔn)、通用的蠕動(dòng)泵和稀釋、充填培養(yǎng)皿系統(tǒng)。自動(dòng)攪拌培養(yǎng)基制備器哪家好培養(yǎng)基,是指供給微生物、植物或動(dòng)物(或組織)生長(zhǎng)繁殖的,由不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。
配置培養(yǎng)基注意問(wèn)題:1、根據(jù)不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需要配制不同的培養(yǎng)基。2、注意各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度及合適配比,保持合適滲透壓。3、將培養(yǎng)基的pH控制在適宜的范圍之內(nèi),以利于不同類(lèi)型微生物的生長(zhǎng)繁殖或代謝產(chǎn)物的積累。4、要注意各種原料的配比,每種培養(yǎng)基的配比合適的配比,可以按照老師的要求去做。5、如需要加熱的時(shí)候注意時(shí)間的把握。培養(yǎng)基,是指供給微生物、植物或動(dòng)物生長(zhǎng)繁殖的,由不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽、維生素和水等幾大類(lèi)物質(zhì)。培養(yǎng)基既是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。
制備的方法和注意事項(xiàng):1培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外,一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料,加以比較核對(duì),再依據(jù)自己的使用目的,加以選用,記錄其來(lái)源。2培養(yǎng)基的制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄,包括培養(yǎng)基名稱(chēng),配方及其來(lái)源,和各種成份的牌號(hào),好終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制備的日期和制備者等,記錄應(yīng)復(fù)制一份,原記錄保存?zhèn)洳?,?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。培養(yǎng)基制備器小倒管浸滿(mǎn)培養(yǎng)基(不留氣泡)后再加入到盛LST的試管中。
血清培養(yǎng)基主要問(wèn)題:血清的成份可能有幾百種之多,對(duì)其準(zhǔn)確的成份、含量及其作用機(jī)制不清楚,尤其是對(duì)其中一些多肽類(lèi)生長(zhǎng)因子、和脂類(lèi)等尚未充分認(rèn)識(shí),這給研究工作帶來(lái)許多困難。血清都是批量生產(chǎn),各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞,在體內(nèi)狀態(tài),血清不是它們接觸的生理學(xué)液體,只是在損傷愈合以及血液凝固過(guò)程中才接觸血清,因此使用血清有可能改變某種細(xì)胞在體內(nèi)的正常狀態(tài),血清可能促進(jìn)某些細(xì)胞的生長(zhǎng)(成纖維細(xì)胞)同時(shí)抑制另一類(lèi)細(xì)胞生長(zhǎng)(表皮細(xì)胞)。培養(yǎng)基的過(guò)濾澄清液體培養(yǎng)基必須澄清,瓊脂培養(yǎng)基也應(yīng)透明無(wú)明顯沉淀。黑龍江瓊脂培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基制備器內(nèi)部的管道和容器可以更換,方便移除和清洗。寧夏自動(dòng)攪拌培養(yǎng)基制備器
配制培養(yǎng)基的原則:根據(jù)培養(yǎng)目的需要選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。由于微生物營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型復(fù)雜,不同微生物有不同的營(yíng)養(yǎng)要求。因此,要根據(jù)不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需求選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),配制針對(duì)性強(qiáng)的培養(yǎng)基。自養(yǎng)微生物有較強(qiáng)的合成能力,能以簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物如co2和無(wú)機(jī)鹽合成復(fù)雜的細(xì)胞物質(zhì)。因此,培養(yǎng)自養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基應(yīng)由簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物組成。異養(yǎng)微生物的合成能力較弱,不能以CO2作為碳源或主要碳源,故應(yīng)在培養(yǎng)基中至少添加一種有機(jī)物。注意營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度與配比要合適:微生物只有在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度及其比例合適時(shí)才能良好生長(zhǎng)。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度過(guò)低不能滿(mǎn)足現(xiàn)生長(zhǎng)需要,過(guò)高又抑制其生長(zhǎng)。例如,適量的蔗糖是異養(yǎng)微生物的良好碳源和能源,但高濃度蔗糖則抑制菌體生長(zhǎng)。金屬離子是微生物生長(zhǎng)所不可缺少的礦質(zhì)養(yǎng)分,但濃度擴(kuò)大,尤其是重金屬離子,反而抑制其生長(zhǎng),甚至產(chǎn)生殺菌作用。寧夏自動(dòng)攪拌培養(yǎng)基制備器