江西Systec培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基中血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：血清質(zhì)量高低取決于兩方面因素：一是取材對(duì)象，二是取材過程。用于取材的動(dòng)物應(yīng)健康無病并且在指定的出生天數(shù)之內(nèi)，取材過程應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程執(zhí)行，制備出的血清要經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定?！队脛?dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品規(guī)程》中的要求：牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國(guó)家。并應(yīng)具備適當(dāng)?shù)谋O(jiān)測(cè)系統(tǒng)。有些國(guó)家還要求牛血清來自未用過反芻動(dòng)物蛋白飼料的牛群。證明所用牛血清中不含對(duì)所生產(chǎn)疫苗病毒的抑制物。血清要通過濾膜過濾除菌，保證無菌。無細(xì)菌、霉菌、支原體和病毒的污染，有些國(guó)家要求無細(xì)菌噬菌體污染。對(duì)細(xì)胞有良好的支持繁殖作用。培養(yǎng)基的制備記錄：每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄，包括培養(yǎng)基名稱。江西Systec培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基制備技術(shù)：一、玻璃器皿的清洗：在制備培養(yǎng)基的過程中，首先要使用一些玻璃器皿，如試管、三角瓶、培養(yǎng)皿、燒杯和吸管等。這些器皿在使用前都要根據(jù)不同的情況，經(jīng)過一定的處理，洗刷干凈。有的還要進(jìn)行包裝，經(jīng)過滅菌等準(zhǔn)備就緒后，才能使用。1、新購(gòu)的玻璃器皿：除去包裝沾染的污垢后，先用熱肥皂水刷洗，流水沖凈，再浸泡于１～２％的工業(yè)鹽酸中數(shù)小時(shí)，使游離的堿性物質(zhì)除去，再以流水沖凈。對(duì)容量較大的器皿，如大燒瓶、量筒等，洗凈后注入濃鹽酸少許，轉(zhuǎn)動(dòng)容器使其內(nèi)部表面均沾有鹽酸，數(shù)分鐘后傾去鹽酸，再以流水沖凈，倒置于洗滌架上將水空干，即可使用。2、用過的玻璃器皿：凡確無病原菌或未被帶菌物污染的器皿，使用后可隨時(shí)沖洗，吸取過化學(xué)試劑的吸管，可先浸泡于清水中，待到一定數(shù)量后再集中進(jìn)行清洗。有可能被病原菌污染的器皿，必須經(jīng)過適當(dāng)消毒后，將污垢除去，用皂液洗刷，再用流水沖洗干凈。陜西進(jìn)口培養(yǎng)基制備器制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn)：成分基本上溶于水，沒有明顯的固形物，。

培養(yǎng)基的配制：分裝：一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。三角瓶：若作靜置培養(yǎng)，則100ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶，很多不能超過150ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶，否則滅菌時(shí)培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞，造成染菌；若作搖瓶培養(yǎng)，則15～20ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶，保證通氣良好。試管分裝：液體培養(yǎng)基一般裝4～5ml，約試管的1/4高度；固體斜面培養(yǎng)基一般裝3～4ml，約試管的1/5高度。包扎：分裝好后，塞上棉塞，在用牛皮紙將棉塞包裹好，防止滅菌時(shí)水份進(jìn)入把棉塞弄濕。滅菌：按配方上要求的溫度、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高，營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)被破壞，培養(yǎng)基中的糖、氨基酸會(huì)使培養(yǎng)基的顏色變深。擺斜面：滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放，使其凝固成為一個(gè)斜面，約占試管長(zhǎng)度的1/2。貯存：培養(yǎng)基在30℃下放置，無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。

培養(yǎng)基的制備：復(fù)水時(shí)不得用銅鍋或鐵鍋，以防有離子混入培養(yǎng)基中，影響微生物的生長(zhǎng)；容器的大小需大于復(fù)水后培養(yǎng)基總體積的2倍以上，避免在加熱溶解過程中，培養(yǎng)基溢出；含有瓊脂粉的培養(yǎng)基，在加熱溶解之前可以浸泡數(shù)分鐘；加熱培養(yǎng)基時(shí)一定要進(jìn)行攪拌，特別是瓊脂類培養(yǎng)基。為避免燒焦和沸騰溢出，對(duì)于少量的培養(yǎng)基很好使用沸水浴進(jìn)行加熱。燒糊的培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被破壞，并可產(chǎn)生有毒物質(zhì)，如發(fā)現(xiàn)焦化，或未溶解均勻前培養(yǎng)基有溢出，該培養(yǎng)基即不能使用，應(yīng)重新制備。對(duì)于瓊脂類培養(yǎng)基進(jìn)行再融化時(shí)應(yīng)使用沸水浴或流動(dòng)蒸汽進(jìn)行加熱，很多只能加熱兩次，第二次再融化后仍未用完的培養(yǎng)基應(yīng)棄去。全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn)：可連接電腦進(jìn)行打印。

調(diào)pH：雖然培養(yǎng)基中含有緩沖物質(zhì)成分，能使培養(yǎng)基的pH盡可能的保持在要求的范圍內(nèi)，但是配出的培養(yǎng)基若不符合要求，就要進(jìn)行必要的調(diào)整。如果有已校準(zhǔn)pH計(jì)，可用pH計(jì)。如果沒有，可用精密的pH試紙，再根據(jù)需要用1mol/L氫氧化鈉或1mol/L鹽酸（微調(diào)可用0.1mol/L氫氧化鈉或0.1mol/L鹽酸）調(diào)制所需的pH。培養(yǎng)基的pH一般為7.4~7.6，也有酸性或堿性的。用氫氧化鈉調(diào)整的需要高壓滅菌的培養(yǎng)基，在調(diào)整pH時(shí)要調(diào)至高出所需0.1個(gè)~0.2個(gè)單位，因用氫氧化鈉提哦啊正時(shí)，高壓滅菌后，培養(yǎng)基大的pH要降低0.1~0.2。如培養(yǎng)基中含有碳酸鈣成分，可不調(diào)pH。培養(yǎng)基制備器應(yīng)存放于冷暗處，較好能放于普通冰箱內(nèi)。江西Systec培養(yǎng)基制備器

制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn)：體培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分分布均勻。江西Systec培養(yǎng)基制備器

倒平板:滅菌溶化的培養(yǎng)基冷卻到50℃左右后，倒入無菌干燥的培養(yǎng)皿中。培養(yǎng)基的溫度不能過高，否則容易在培養(yǎng)皿的內(nèi)蓋上形成太多的冷凝水；溫度太低，培養(yǎng)基又容易凝固成塊，無法制成平板。倒平板時(shí)，應(yīng)在靠近酒精燈火焰進(jìn)行，以免外界的雜菌落入平板內(nèi)，左手拿培養(yǎng)皿，右手拿三角瓶的底部，用左手的小指和手掌部位把三角瓶的棉塞拔下，灼燒瓶口，用大拇指和食指把培養(yǎng)皿蓋打開一條縫，至瓶口剛好伸入，倒入培養(yǎng)基，以鋪滿底為限，不超過培養(yǎng)皿高度的三分之一，迅速蓋好蓋，放在桌面上，輕輕地轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿，使培養(yǎng)基分布均勻，冷凝后即可。江西Systec培養(yǎng)基制備器