中藥的功效與作用評價

我們將受測試斑馬魚分成三組，分別是底物對照組、正常對照和服用供試品組（供試品通過溶解到養(yǎng)魚用水中攝入到斑馬魚體內(nèi)），并加入ROS特異性熒光檢測試劑。服用供試品一段時間后，我們使用酶標(biāo)儀對斑馬魚體內(nèi)ROS進(jìn)行熒光定量?？梢钥吹?，服用供試品組斑馬魚體內(nèi)熒光值比正常對照組有明顯升高。1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實(shí)驗(yàn)，服用供試品組的斑馬魚ROS水平明顯高于正常對照組，與正常對照組存在明顯性差異。2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了該供試品誘發(fā)斑馬魚氧化應(yīng)激。利用斑馬魚模型評價腸道消化功能。中藥的功效與作用評價

藥物評價是研究藥物與人體之間的相互作川及其規(guī)律。藥物安全性評價的重要性任何藥物都具有兩重性,如藥物,它一方面可以殺滅病源菌,使病人的生理,生化機(jī)能恢復(fù)正常,另一方面也可危害機(jī)體,產(chǎn)生不良反應(yīng).尤其是20世紀(jì)60年代初,在歐洲發(fā)生反應(yīng)停(thalidomide)事件,累及28個國家后,對藥物的安全性評價,引起各國和世界衛(wèi)生組織的高度重視.近年來,在新藥臨床試驗(yàn)中,要實(shí)施新藥臨床試驗(yàn)規(guī)范(Good Clinical Practice,GCP),執(zhí)行赫爾辛基宣言,保護(hù)受試者權(quán)益,使病人在藥物治療中獲得比較大效益,而冒小風(fēng)險.因此對藥物進(jìn)行評價,藥物的有效性和安全性兩者應(yīng)放在同等位置,均不容忽視.藥物有效性評價利用斑馬魚模型評價酒精性肝損傷保護(hù)作用。

斑馬魚的基因與人類基因的相似度達(dá)到87％，斑馬魚肝臟中有許多與哺乳動物同源的脂質(zhì)代謝酶，與哺乳動物對外源化學(xué)物質(zhì)的防御機(jī)制相當(dāng)，包括酶的誘導(dǎo)和氧化應(yīng)激。而且斑馬魚幼魚通體透明，容易觀察到毒性表型。酒精性肝損傷是全世界發(fā)病率和死亡率的主要原因，酒精性肝損傷是過量飲酒的結(jié)果。當(dāng)患者繼續(xù)飲酒時，會誘發(fā)嚴(yán)重的肝損傷形式，如脂肪性肝炎，纖維化，肝硬化和肝細(xì)胞。用乙醇可以誘發(fā)斑馬魚肝臟損傷，模擬人的肝臟疾病。我們評價斑馬魚肝臟毒性有4個指標(biāo)：1.肝臟面積；2.肝臟變性程度；3.卵黃囊吸收延遲的發(fā)生率（卵黃囊是脂肪，卵黃囊吸收與肝功能密切相關(guān)）；4.肝臟病理切片。

基于斑馬魚模型實(shí)驗(yàn)，可進(jìn)行活性化合物發(fā)現(xiàn)、高通量藥物篩選、藥效評價、安全性評價、生物學(xué)質(zhì)量控制等臨床前研究，實(shí)驗(yàn)周期短、成本低，結(jié)果直觀，助力醫(yī)藥企業(yè)的藥物研發(fā)、品控及宣傳推廣。利用斑馬魚模型評價抗腫瘤作用【評價原理】近三十年來，世界**發(fā)病率以年均3-5%的速度遞增，*類已成為人類**死因。1.**生長、轉(zhuǎn)移將熒光標(biāo)記的人腫瘤細(xì)胞（呈紅色）移植到野生型斑馬魚體內(nèi)，腫瘤細(xì)胞在斑馬魚體內(nèi)的生長和轉(zhuǎn)移情況可以被觀察到。2.腫瘤部位新生血管將熒光標(biāo)記的人腫瘤細(xì)胞（呈紅色）移植到轉(zhuǎn)基因血管熒光斑馬魚（呈綠色）體內(nèi)，腫瘤細(xì)胞刺激斑馬魚新生血管情況可以被觀察到。3.腫瘤細(xì)胞凋亡將人腫瘤細(xì)胞移植到野生型斑馬魚體內(nèi)，通過特異性熒光染色（凋亡細(xì)胞呈綠色），細(xì)胞凋亡情況可以被觀察到。4.腫瘤部位炎癥將人腫瘤細(xì)胞移植到轉(zhuǎn)基因中性粒細(xì)胞熒光斑馬魚（呈綠色）體內(nèi)，腫瘤部位炎癥反應(yīng)可以被觀察到。5.**病理將人腫瘤細(xì)胞移植到野生型斑馬魚體內(nèi)，制作成病理切片，觀察腫瘤細(xì)胞的形態(tài)變化。6.生存期將人腫瘤細(xì)胞移植到野生型斑馬魚體內(nèi)，統(tǒng)計斑馬魚每日存活率、計算其生存期。新一輪基本藥物目錄調(diào)整在即。

腦出血是指非外傷性腦實(shí)質(zhì)內(nèi)部血管破裂引發(fā)的腦內(nèi)出血病癥，占全部腦卒中的20%～30%，急性期病死率為30%～40%。羥甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMGCR)是他汀類藥物發(fā)揮抑制作用的直接作用點(diǎn),HMGCR功能被抑制會影響血管的完整性和穩(wěn)定性，誘發(fā)腦出血。由于斑馬魚大腦具有典型脊椎動物腦部形態(tài)學(xué)特征，血管與神經(jīng)系統(tǒng)在分子信號通路上與人和哺乳動物的同源性達(dá)到85%以上。在大量攝入辛伐他汀后，斑馬魚腦部也會出現(xiàn)腦出血的情況，患有腦出血的斑馬魚的腦部會出現(xiàn)明顯的片狀出血，而正常斑馬魚沒有；由于腦出血斑馬魚的心搏輸出量和血流速度也會降低，利用血流分析儀可明顯觀察到。腦出血可直接造成反應(yīng)遲鈍、運(yùn)動功能障礙，可通過行為分析軟件觀察斑馬魚的行為軌跡。我們評價斑馬魚腦出血有4個指標(biāo)：1.腦出血發(fā)生率；2.心搏輸出量；3.血流速度；4.行為學(xué)（運(yùn)動改善）。斑馬魚模型評價胚胎毒性。創(chuàng)新藥安全性評價

利用斑馬魚模型評價帕金森病防治作用。中藥的功效與作用評價

我們將受測試斑馬魚分成三組，分別是正常對照組、模型對照組和藥物組。其中正常對照組未攝入霉酚酸嗎啉乙酯，模型對照組與服用眼保護(hù)劑組都攝入了等量的霉酚酸嗎啉乙酯（霉酚酸嗎啉乙酯通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)）。眼保護(hù)劑組在攝入霉酚酸嗎啉乙酯的同時攝入藍(lán)莓葉黃素酯之類的眼保護(hù)劑。服用一段時間眼保護(hù)劑后，我們對斑馬魚整體做凋亡細(xì)胞特異性染色，觀察細(xì)胞凋亡，同時制作成病理切片觀察眼部的病理結(jié)構(gòu)變化。中藥的功效與作用評價

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