細(xì)胞培養(yǎng)基基礎(chǔ)成分:氨基酸:細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的基本單位,包括必需氨基酸和非必需氨基酸。維生素:作為細(xì)胞合成酶的輔因子,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和代謝過(guò)程至關(guān)重要,如維生素B群、維生素C、維生素E等。無(wú)機(jī)鹽:如鈉、鉀、鈣、鎂、磷等,對(duì)維持細(xì)胞滲透壓平衡、調(diào)節(jié)細(xì)胞膜功能等起到重要作用。葡萄糖:常用的碳源,為細(xì)胞提供能量和碳元素。血清:血清是細(xì)胞培養(yǎng)基中常見(jiàn)的添加物,它富含生長(zhǎng)因子和附著因子,有助于細(xì)胞的增殖和分化。但血清的使用可能引入變異性和污染風(fēng)險(xiǎn)。無(wú)血清培養(yǎng)基適合于需要無(wú)血清環(huán)境的細(xì)胞系。重慶無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基供應(yīng)商
以及無(wú)血清培養(yǎng)的基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基。RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基專(zhuān)門(mén)針對(duì)淋巴細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)計(jì),含有BSS、21種氨基酸、維生素等,***適于多種正常細(xì)胞和腫*細(xì)胞的培養(yǎng),也用做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。HamF12細(xì)胞培養(yǎng)基含微量元素,可在血清含量低時(shí)用,適用于克隆化培養(yǎng)。F12適用于CHO細(xì)胞,也是無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基中常用的基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基。DMEM/F12細(xì)胞培養(yǎng)基將DMEM和F12按照1:1比例混合,混合后營(yíng)養(yǎng)成份豐富,血清使用量也減少。常作為開(kāi)發(fā)無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)的基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基。與天然培養(yǎng)基相比,有些天然的未知成分尚無(wú)法用已知的化學(xué)成分所替代,因此,細(xì)胞培養(yǎng)中使用合成培養(yǎng)基時(shí)必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分,以克服合成培養(yǎng)基的不足。**普遍的做法是添加5~10%的血清,這樣才能維持細(xì)胞活力,促進(jìn)細(xì)胞增殖。針對(duì)不同的動(dòng)物細(xì)胞,現(xiàn)已開(kāi)發(fā)了多種商業(yè)化、個(gè)性化的低血清細(xì)胞培養(yǎng)基配方,營(yíng)養(yǎng)成份更加豐富,血清使用量可降低至1~3%,由此可減少了血清等動(dòng)物來(lái)源成份對(duì)生物制品安全性的影響。(serumfreemedium,SFM)經(jīng)歷了天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基后,無(wú)血清培養(yǎng)基和無(wú)血清培養(yǎng)成為當(dāng)今細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域的一大趨勢(shì)。采用無(wú)血清培養(yǎng)可降低生產(chǎn)成本,簡(jiǎn)化分離純化步驟,避免**污染造成的危害。F12細(xì)胞培養(yǎng)基價(jià)格F12培養(yǎng)基在生物醫(yī)學(xué)研究中表現(xiàn)出優(yōu)越的性能。
細(xì)胞培養(yǎng)基的種類(lèi)按照細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史,細(xì)胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基、無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基、限定化學(xué)成分細(xì)胞培養(yǎng)基等幾大種類(lèi)。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無(wú)機(jī)鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡,保持pH穩(wěn)定及提供簡(jiǎn)單的營(yíng)養(yǎng)。其主要用于細(xì)胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個(gè)主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因?yàn)镃a2+、Mg2+是細(xì)胞膜的重要組成成份,參與細(xì)胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細(xì)胞結(jié)團(tuán)。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液,前者緩沖能力較弱,適合于密閉培養(yǎng);后者緩沖能力較強(qiáng),適合于5%CO2的培養(yǎng)條件。表1-1幾種常用的BSS配方(g/L)天然培養(yǎng)基指來(lái)自動(dòng)物體液或利用**分離提取的一類(lèi)培養(yǎng)基,如血漿、血清、***、雞胚浸出液等。其***是營(yíng)養(yǎng)成分豐富,培養(yǎng)效果良好,但缺點(diǎn)是成分復(fù)雜,來(lái)源受限且制作過(guò)程復(fù)雜、批間差異大。目前***使用的天然培養(yǎng)基是血清,另外各種**提取液、促進(jìn)細(xì)胞貼壁的膠原類(lèi)物質(zhì)在培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也是必不可少。
細(xì)胞培養(yǎng),作為生物醫(yī)學(xué)研究和藥物開(kāi)發(fā)的關(guān)鍵環(huán)節(jié),指的是將細(xì)胞從生物體內(nèi)取出并在特定的人工環(huán)境中培育的過(guò)程。這一過(guò)程中,細(xì)胞培養(yǎng)基扮演著至關(guān)重要的角色,它為細(xì)胞提供了生長(zhǎng)和增殖所必需的多種營(yíng)養(yǎng)成分,如氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)鹽和碳源等。在市場(chǎng)上,有多種基礎(chǔ)培養(yǎng)基可供選擇,如DMEM、RPMI1640和MEM等。這些培養(yǎng)基通常還需額外添加血清,以提供生長(zhǎng)因子和附著因子,從而促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁。然而,血清的使用也帶來(lái)了一些問(wèn)題,如實(shí)驗(yàn)結(jié)果的變量增加和潛在的污染風(fēng)險(xiǎn)。DMEM高糖培養(yǎng)基能穩(wěn)定細(xì)胞的增殖狀態(tài)。
體外培養(yǎng)時(shí),一定的濃度范圍條件下,葡萄糖主要經(jīng)糖酵解循環(huán)轉(zhuǎn)化成乳酸來(lái)為細(xì)胞提供能量。(氨基酸)氨基酸在細(xì)胞內(nèi)的重要生理作用主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:①是蛋白質(zhì)的基本組成單位,用于合成蛋白質(zhì)和多肽;②可用于合成某些具有重要生理作用的含氮化合物,如核酸、尼克酰胺等;③某些氨基酸還具有獨(dú)特的生理作用,如甘氨酸參與生物轉(zhuǎn)化作用,丙氨酸和谷氨酰胺參與細(xì)胞內(nèi)氨的運(yùn)輸?shù)龋虎芸赊D(zhuǎn)變成糖類(lèi)和脂肪,參與氧化供能。細(xì)胞所能利用的氨基酸是L型同分異構(gòu)體,D型氨基酸不能被利用。不同的細(xì)胞對(duì)氨基酸的需求各異,但有些必需氨基酸是細(xì)胞不能自身合成的,必須依靠外源的細(xì)胞培養(yǎng)液提供。其余非必需氨基酸,細(xì)胞可以自己合成,或通過(guò)轉(zhuǎn)氨作用由其他物質(zhì)轉(zhuǎn)化而來(lái),但是在細(xì)胞培養(yǎng)基中添加適當(dāng)濃度的非必需氨基酸可以減輕細(xì)胞在合成方面的負(fù)擔(dān),提高谷氨酰胺及其它必需氨基酸的利用率。絕大部分細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺有較高的要求,可能因其不僅是細(xì)胞的主要氮源,且可作為細(xì)胞生長(zhǎng)的能源物質(zhì)和嘌呤、嘧啶核苷酸的前體,另外還可直接作為細(xì)胞增殖和產(chǎn)物合成中的蛋白質(zhì)和多肽的組成成分。在缺少谷氨酰胺時(shí),細(xì)胞會(huì)生長(zhǎng)不良,甚至死亡。由于谷氨酰胺具有多種生理作用。無(wú)酚紅培養(yǎng)基確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。福建無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基一般多少錢(qián)
1640培養(yǎng)基提高了實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性。重慶無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基供應(yīng)商
參與細(xì)胞的代謝活動(dòng)。此外,通過(guò)提供鈉,K+和Ca2+,幫助細(xì)胞調(diào)節(jié)細(xì)胞膜功能。Na+是細(xì)胞外液中**主要的陽(yáng)離子,對(duì)維持滲透壓的恒定有決定性的作用,還與Cl-共同參與生物電活動(dòng)、維持水平衡和酸堿平衡等。K+主要分布在細(xì)胞內(nèi)液,對(duì)于***某些酶是必需的,并在調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的酸堿平衡上也有極重要意義。Ca2+和Mg2+主要參與信號(hào)傳導(dǎo)、能量代謝、脂肪酸合成、核糖體穩(wěn)定和蛋白質(zhì)合成等多種生理作用。PO43-、SO42-、HCO3-是基質(zhì)所需陰離子,同時(shí)是細(xì)胞內(nèi)電荷的調(diào)節(jié)者。磷對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)、代謝和調(diào)控都有重要的作用,含磷的化合物如核酸、磷脂、蛋白質(zhì)是構(gòu)成細(xì)胞的主要成分,ATP、ADP是能量生成、存儲(chǔ)和利用的不可或缺的化合物。上述離子對(duì)于細(xì)胞的作用各有不同,它們共同構(gòu)成了細(xì)胞賴(lài)以生存的滲透壓、pH和電化學(xué)平衡的微環(huán)境,細(xì)胞對(duì)于某種元素的吸收利用會(huì)受到其它元素的干擾,例如培養(yǎng)基中過(guò)高的鈣離子濃度會(huì)使鎂和鋅的吸收利用受到干擾。因此,在保證培養(yǎng)基中上述離子濃度滿足要求以外,還需保證上述離子之間種類(lèi)和比例的平衡。此外,微量元素如鐵、鈷、鎳、硒、碘、銅、鋅、錳、鉻、鉬、氟等對(duì)于細(xì)胞生長(zhǎng)代謝和產(chǎn)物合成都有促進(jìn)作用。重慶無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基供應(yīng)商