1:50~l:800)后,按行進(jìn)行包被、洗滌。按列分別加入用稀釋液1:100稀釋的強(qiáng)陽(yáng)性、弱陽(yáng)性、陰性參考血清及稀釋液(作空白對(duì)照),保溫,洗滌。加工作濃度酶標(biāo)抗體,洗滌,加底物顯色,加酸終止反應(yīng)后讀取A值。選擇強(qiáng)陽(yáng)性參考血清A值;為0.8左右,陰性參考血清A值<0.1的包被抗原稀釋度為工作濃度。?方陣(棋盤)法選擇包被抗體和酶標(biāo)抗體的工作濃度將抗體用包被液稀釋為10mg/L、lmg/L、/L三個(gè)濃度按行包被,每一個(gè)濃度包被三行(每行3孔),分別在每個(gè)濃度包被的***、二、三行中分別加入強(qiáng)陽(yáng)性抗原,弱陽(yáng)性抗原和陰性對(duì)照,將酶標(biāo)抗抗體用稀釋液稀釋為1:l000、l:5000、l:10000三個(gè)濃度,分別加入每個(gè)濃度包被的***、二、三列中。加底物顯色,加酸終止反應(yīng),分別讀取A值。以強(qiáng)陽(yáng)性抗原液A值在,陰性參考A值<**適條件。據(jù)此選擇包被抗體和酶標(biāo)抗體的**佳工作濃度。?二、ELISA**適工作濃度的選擇及標(biāo)準(zhǔn)化操作1**適工作濃度的選擇?1.1間接法測(cè)抗體?????酶標(biāo)抗體工作濃度的選擇:①用IgG進(jìn)行包被,洗滌。②將酶標(biāo)IgG用稀釋液作一系列稀釋后分別加入已包被的孔中,保溫、洗滌。③加酸終止反應(yīng)后,讀取吸光度(A)。讀取A值在1.0時(shí)的酶標(biāo)抗體稀釋度,作為酶標(biāo)抗體的工作濃度。緩沖溶液在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中有著重要的意義。新疆有酚紅緩沖液常見(jiàn)問(wèn)題
只要知道緩沖對(duì)的PH值,和要配制的緩沖液的pH值(及要求的緩沖液總濃度),就能按公式計(jì)算[鹽]和[酸]的量。這個(gè)算法涉及對(duì)數(shù)換算,較麻煩,前人為減少后人的計(jì)算麻煩,已為我們總結(jié)出pH值與緩沖液對(duì)離子用量的關(guān)系并列出了表格。只要我們知道要配制的緩沖液的pH,經(jīng)查表便可計(jì)算出所用緩沖劑的比例和用量。例如配制100nm pH5.8濃度為0.1M磷酸緩沖液。經(jīng)查表知pH5.8濃度為0.2M Na2HPO48.0毫升(1M=1 mol/L),而0.2M Na2HPO492.0毫升。依此可推論出配制100ml 0.1M的磷酸緩沖液需要0.1M Na2HPO48.0毫升,而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升。計(jì)算好后,按計(jì)算結(jié)果準(zhǔn)確稱好固態(tài)化學(xué)成分,放于燒杯中,加少量蒸餾水溶解,轉(zhuǎn)移入100ml容量瓶,加蒸餾水至刻度,搖勻,就能得到所需的緩沖液。各種緩沖溶液的配制,均按表格按比例混合,某些試劑,必須標(biāo)定配成準(zhǔn)確濃度才能進(jìn)行,如醋酸、氫氧化鈉等。另外,所有緩沖溶劑的配制計(jì)量都能從以上的算式準(zhǔn)確獲得。 [2]新疆有酚紅緩沖液常見(jiàn)問(wèn)題通過(guò)選擇合適的緩沖液可以確保酶在條件下進(jìn)行催化反應(yīng)。
pH緩沖液的使用方法和配制保存
pH緩沖液是確保pH測(cè)量值精確的重要因素。標(biāo)準(zhǔn)緩沖液用于校準(zhǔn)pH傳感器和檢查其性能。pH緩沖液的緩沖能力是其重要的屬性。即使將外部物質(zhì)加入緩沖液中,這一屬性仍可使pH緩沖液保持恒定的pH值。pH緩沖液使用方法:首先取少量校正液潤(rùn)洗小量杯,然后加入適量校正液(液面高度沒(méi)過(guò)電極的感應(yīng)探頭即可)。按照電子pH測(cè)試筆使用說(shuō)明書進(jìn)行校正。由于校正液是高精密的液體,是電子ph測(cè)試筆精確度的保障,因此用過(guò)的校正液不能再倒回瓶中,以免影響校正液精度,帶入細(xì)菌等,造成校正液無(wú)法繼續(xù)使用。
1MTris-HCl(,,)組份濃度:1MTris-HCl配制量:1L配制方法:1.稱量gTris置于1L燒杯中。2.加入約800ml的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙狻?.按下表量加入濃鹽酸調(diào)節(jié)所需要的pH值。4.將溶液定容至1L。5.高溫高壓**后,室溫保存。注意:應(yīng)使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值,因?yàn)門ris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大,溫度每升高1℃,溶液的pH值大約降低。10&timeTEBuffer(,,)組份濃度:100mMTris-HCl,10mMEDTA配制量:1L配制方法:1.量取下列溶液,置于1L燒杯中。2.向燒杯中加入約800ml的去離子水,均勻混合。3.將溶液定容至1L后,高溫高壓**。4.室溫保存。MTris-HCl()組份濃度:MTris-HCl配制量:1L配制方法:1.稱量gTris置于1L燒杯中。2.加入約800ml的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙狻?.用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至。4.將溶液定容至1L。5.高溫高壓**后,室溫保存。注意:應(yīng)使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值,因?yàn)門ris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大,溫度每升高1℃,溶液的pH值大約降低。3M醋酸鈉()組份濃度:3M醋酸鈉配制量:100ml配制方法:1.稱量NaAc·3H2O置于100-200ml燒杯中,加入月40ml的去離子水?dāng)嚢枞芙?.加入冰醋酸調(diào)節(jié)pH值至3.加去離子水將溶液定容至100ml4高溫高壓**后,室溫保存。一般情況下,磷酸鹽緩沖液對(duì)人體無(wú)害,其不但能增加食品的口感,還能夠促進(jìn)人體對(duì)鈣的吸收。
法蘭10沿圓周方向排列開(kāi)設(shè)有固定孔18,固定孔18位于密封墊圈二19的外側(cè),通過(guò)密封墊圈二19起到密封的作用;頂蓋9:頂蓋9置于法蘭10的上表面,頂蓋9上表面邊沿的通孔內(nèi)沿圓周方向排列設(shè)有固定螺栓6,固定螺栓6的底端穿過(guò)固定孔18延伸至法蘭10的下表面,固定螺栓6的底端設(shè)有螺母5,頂蓋9上表面的一側(cè)設(shè)有進(jìn)液管7,進(jìn)液管7的底端與筒體3的內(nèi)腔連通,進(jìn)液管7的頂端設(shè)有密封蓋8,通過(guò)密封蓋8對(duì)進(jìn)液管7進(jìn)行密封,頂蓋9下表面的中部設(shè)有攪拌單元17,攪拌單元17包括伺服電機(jī)171、攪拌軸172和葉片173,攪拌軸172通過(guò)軸承轉(zhuǎn)動(dòng)連接在頂蓋9下表面的中部,葉片173陣列設(shè)在攪拌軸172的圓周面,伺服電機(jī)171固定在頂蓋9的上表面,伺服電機(jī)171的輸出軸與攪拌軸172的頂端固定連接,伺服電機(jī)171的輸入端與plc控制器2的輸出端電連接,通過(guò)伺服電機(jī)171的轉(zhuǎn)動(dòng),帶動(dòng)攪拌軸172和葉片173的轉(zhuǎn)動(dòng),可以對(duì)筒體內(nèi)的液體進(jìn)行攪拌;出液斗11:出液斗11設(shè)在固定座1的底部,出液斗11的頂端與筒體3的內(nèi)腔連通,出液斗11的底端設(shè)有出液管13,出液管13上對(duì)應(yīng)設(shè)有電磁閥12,通過(guò)出液斗11和出液管13將液體排出,通過(guò)電磁閥12控制出液管13的開(kāi)閉;其中:還包括plc控制器2,plc控制器2設(shè)在固定座1的上表面。緩沖液(Buffer solution)通常是由弱酸及其共軛堿或弱堿及其共軛酸緩沖對(duì)所組成的溶液。中國(guó)香港緩沖液供應(yīng)商家
長(zhǎng)時(shí)間或過(guò)量使用PBS緩沖液可能會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生耐受性,導(dǎo)致惡心、嘔吐、腹瀉等癥狀。新疆有酚紅緩沖液常見(jiàn)問(wèn)題
ph值測(cè)定常用的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液有哪幾種
ph值測(cè)定常用的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液草酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液酒石酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液苯二甲酸氫鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液硼酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液氫氧化鈣標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液在一定程度上能抵抗外加少量酸、堿或稀釋,而保持溶液pH值基本不變的作用稱為緩沖作用。具有緩沖作用的溶液稱為緩沖溶液。緩沖溶液性質(zhì)a.抗酸/堿,抗稀釋作用因?yàn)榫彌_溶液中具有抗酸成分和抗堿成分,所以加入少量強(qiáng)酸或強(qiáng)堿,其pH值基本上是不變的。稀釋緩沖溶液時(shí),酸和堿的濃度比值不改變,適當(dāng)稀釋不影響其pH值。b.緩沖容量緩沖容量是衡量緩沖溶液緩沖能力大小的尺度。緩沖容量的大小與緩沖組分濃度和緩沖組分的比值有關(guān)。緩沖組分濃度越大,緩沖容量越大;緩沖組分比值為1時(shí),緩沖容量比較大。 新疆有酚紅緩沖液常見(jiàn)問(wèn)題