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Buffer組份濃度:137mMNaCl,mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4配制量:1L配制方法:1.稱量下列試劑,置于1L燒杯中。2.向燒杯中加入約800ml的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙狻?.滴加濃鹽酸將pH值調(diào)節(jié)至,然后加入去離子水將溶液定容至1L。4.高溫高壓**后,室溫保存。注意:上述Buffer中無二價(jià)陽離子,如需要,可在配方中補(bǔ)充1mMCaCl2和mMMgCl2。10M醋酸銨組份濃度:10M醋酸銨配制量:100ml配制方法:1.稱量g醋酸銨置于100~200ml燒杯中,加入約30ml的去離子水?dāng)嚢枞芙狻?.加去離子水將溶液定容至100ml。3.使用mm濾膜過濾**。4.密封瓶口于室溫保存。注意:醋酸銨受熱易分解,所以不能高溫高壓**。Tris-HCl平衡苯酚配制方法:1.使用原料:大多數(shù)市售液化苯酚是清亮無色的,無需重蒸餾便可用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。但有些液化苯酚呈粉紅色或黃色,應(yīng)避免使用。同時(shí)也應(yīng)避免使用結(jié)晶苯酚,結(jié)晶苯酚必須在160℃對其進(jìn)行重蒸餾除去諸如醌等氧化產(chǎn)物,這些氧化產(chǎn)物可引起磷酸二酯鍵的斷裂或?qū)е翿NA和DNA的交聯(lián)等。因此,苯酚的質(zhì)量對DNA、RNA的提取極為重要,我們推薦使用高質(zhì)量的苯酚進(jìn)行分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。2.操作注意:苯酚腐蝕性極強(qiáng),并可引起嚴(yán)重灼傷,操作時(shí)應(yīng)戴手套及防護(hù)鏡等。生化實(shí)驗(yàn)室常常用的緩沖系主要有磷酸、檸檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tiris(三羥甲基氨基甲烷)等系統(tǒng)。湖北PBS緩沖液介紹
pbs緩沖液的配制配方是10X的PBS母液,然后再對其母液進(jìn)行1:10稀釋即可獲得PBS緩沖液。PBS是磷酸鹽緩沖液(PhosphateBufferSaline),是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室**常用的緩沖液之一。其主要成分包括:氯化鈉(NaCl)、氯化鉀(KCl)、磷酸氫二鈉(Na2HPO4)和磷酸二氫鉀(KH2PO4)。配制步驟:清洗干凈所需燒杯、轉(zhuǎn)子和量筒,向一個(gè)燒杯裝少量去離子水(約100ml)并放入一個(gè)轉(zhuǎn)子后放在稱量天平旁備用;向另一個(gè)燒杯裝約800ml去離子水并在微波爐或者水浴鍋(65°以上均可)中加熱。注意:由于實(shí)驗(yàn)室所購買的Na2HPO4常常帶有二水、七水或者十二水,與之對應(yīng)的重量分別為1.78g、2.68g、3.58g。向燒杯中加入預(yù)熱的去離子水,燒杯放置在磁力攪拌器上攪拌溶解。用量筒定容到1L,保存?zhèn)溆谩H?00ml10X的PBS母液,加入900ml去離子水即可獲得pH=7.4的PBS緩沖液(無需用pH計(jì)校準(zhǔn)PH值)。遼寧無酚紅緩沖液哪家便宜一種溶液是否是緩沖溶液,可以通過在溶液中加入少量的酸或堿,觀察pH值的變化來判斷。
所有操作均應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行,與苯酚接觸過的皮膚部位應(yīng)用大量水清洗,并用肥皂和水洗滌,忌用乙醇。3.苯酚平衡:因?yàn)樵谒嵝詐H條件下DNA分配于有機(jī)相,因此使用苯酚前必須對苯酚進(jìn)行平衡使其pH值達(dá)到,苯酚平衡操作方法如下:①液化苯酚應(yīng)貯存于-20℃,此時(shí)的苯酚呈結(jié)晶狀態(tài)。從冰柜中取出的苯酚首先在室溫下放置使其達(dá)到室溫,然后在68℃水浴中使苯酚充分融解。②加入羥基喹啉(8-Quinolinol)至終濃度。該化合物是一種還原劑、RNA酶的不完全抑制劑及金屬離子的弱螯合劑,同時(shí)因其呈黃色,有助于方便識(shí)別有機(jī)相。③加入等體積的1MTris-HCl(),使用磁力攪拌器攪拌15分鐘,靜置使其充分分層后,除去上層水相。④重復(fù)操作步驟③。⑤加入等體積的MTris-HCl(),使用磁力攪拌器攪拌15分鐘,靜置使其充分分層后,除去上層水相。⑥重復(fù)操作步驟⑤,稍微殘留部分上層水相。⑦使用pH試紙確認(rèn)有機(jī)相的pH值大于。⑧將苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。苯酚/氯仿/異戊醇(25:24:1)配制方法:1.說明:從核酸樣品中除去蛋白質(zhì)時(shí)常常使用苯酚/氯仿/異戊醇(25:24:1)。氯仿可使蛋白質(zhì)變性并有助于液相與有機(jī)相的分離,而異戊醇則有助于消除抽提過程中出現(xiàn)的氣泡。
PBS緩沖液什么是PBS緩沖液?PBS緩沖液是一種常用的生物化學(xué)緩沖液,全稱為磷酸鹽緩沖液(PhosphateBufferedSaline)。PBS緩沖液主要由磷酸鹽、鹽和水組成,pH值一般在。它被***用于生物實(shí)驗(yàn)室中,用于稀釋、洗滌和儲(chǔ)存生物樣品,保持生物樣品的穩(wěn)定性和活性。PBS緩沖液的組成PBS緩沖液的主要成分包括三個(gè)部分:1.磷酸鹽:PBS緩沖液中的磷酸鹽是為了維持緩沖液的酸堿平衡。磷酸鹽能夠抵抗外界酸堿環(huán)境的影響,并且能夠穩(wěn)定細(xì)胞的PH值,保護(hù)細(xì)胞免受外界環(huán)境的傷害。2.鹽:PBS緩沖液中的鹽主要是氯化鈉(NaCl),用于調(diào)節(jié)PBS緩沖液的離子濃度。PBS緩沖液中的適當(dāng)離子濃度可以提供細(xì)胞所需的離子環(huán)境,維持細(xì)胞的生理功能。3.水:水是PBS緩沖液的基礎(chǔ)成分,用于稀釋磷酸鹽和鹽。純凈的水可以保證PBS緩沖液的質(zhì)量,避免其他雜質(zhì)對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。 PBS緩沖液是一種常用的緩沖劑,用于調(diào)節(jié)pH值和保持溶液的穩(wěn)定性。
PBS緩沖液,是生物化學(xué)研究中使用**為***的一種緩沖液,主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,一般作為溶劑,起溶解保護(hù)試劑的作用。由于Na2HPO4和KH2PO4有二級解離,緩沖的pH值范圍很廣,而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補(bǔ)加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2,以提供二價(jià)陽離子。
配制方法播報(bào)稱取8.0g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4、0.24g KH2PO4溶于800mL蒸餾水中,用HCl調(diào)節(jié)溶液至7.4,***加蒸餾水定容至1L即可得0.01M PBS緩沖液。作用播報(bào)PBS是磷酸緩沖鹽溶液的簡稱,不僅偽狂犬病毒要用它稀釋,一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。原因就是它具有鹽平衡、可調(diào)整的適宜pH緩沖作用,蒸餾水不具有鹽平衡作用,可以破壞生物蛋白的結(jié)構(gòu)及生物特性;生理鹽水不具有調(diào)整pH的作用,對完整的、具有活性的物質(zhì)不能保證其在**適條件下參與生物反應(yīng),所以使用PBS是優(yōu)先。在細(xì)胞培養(yǎng)中,它通常用于洗滌傳代培養(yǎng)中的細(xì)胞,以及在計(jì)數(shù)細(xì)胞時(shí)作為稀釋溶液。 [2]PBS也不是***的,有的生物活性物質(zhì)需要的條件比PBS還要高,就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分,維持比較好的條件保證生物活性物質(zhì)保持其**完整的特性 [1]。 緩沖溶液是一種能夠抵抗pH變化的溶液。四川無酚紅緩沖液是什么
配制緩沖溶液作用有哪些?湖北PBS緩沖液介紹
圖中:1固定座、2plc控制器、3筒體、4觀察窗、5螺母、6固定螺栓、7進(jìn)液管、8密封蓋、9頂蓋、10法蘭、11出液斗、12電磁閥、13出液管、14支腿、15移動(dòng)單元、151萬向輪、152安裝座、16密封墊圈一、17攪拌單元、171伺服電機(jī)、172攪拌軸、173葉片、18固定孔、19密封墊圈二。具體實(shí)施方式下面將結(jié)合本實(shí)用新型實(shí)施例中的附圖,對本實(shí)用新型實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述,顯然,所描述的實(shí)施例**是本實(shí)用新型一部分實(shí)施例,而不是全部的實(shí)施例?;诒緦?shí)用新型中的實(shí)施例,本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例,都屬于本實(shí)用新型保護(hù)的范圍。請參閱圖1-3,本實(shí)用新型提供一種技術(shù)方案:一種fbs緩沖液處理裝置,包括固定座1、筒體3、頂蓋9和出液斗11;固定座1:固定座1底部的四角均設(shè)有支腿14,通過支腿14起到支撐的作用,支腿14的底端設(shè)有移動(dòng)單元15,移動(dòng)單元15包括萬向輪151和安裝座152,安裝座152固定在支腿14的底端,安裝座152上對應(yīng)設(shè)有萬向輪151,萬向輪151上對應(yīng)設(shè)有剎車片,通過萬向輪151可以實(shí)現(xiàn)裝置的移動(dòng);筒體3:筒體3設(shè)在固定座1的上表面,筒體3上表面的邊沿設(shè)有法蘭10,法蘭10的上表面設(shè)有密封墊圈二19。湖北PBS緩沖液介紹