超微量分光光度計主要是用來快速檢測一些樣品，比如蛋白、核酸等，幾乎每一個分析實驗室都離不開分光光度計，那么，超微量分光光度計怎么使用呢？***小編就Micro Drop為例，給大家介紹一下超微量分光光度計使用方法。
在此之前，我們先來了解一下超微量分光光度計的原理，微量分光光度計是利用光源通過光片調(diào)整光坡長，射入樣品液體中，再射入光電檢測器將光能轉(zhuǎn)換成電訊號。由樣本及空白水樣間所吸收之光能量差，與標(biāo)準(zhǔn)液之能量吸收值相比較，便可定樣本中待測物濃度。Micro Drop為一款全光譜波長超微量分光光度計，適用于更寬濃度范圍的樣品檢測，操作簡便，即擦即測。
寶予德MicroDrop超微量分光光度計既可使用超微量基座，也可使用常規(guī)比色皿檢測。湖北全光譜波長超微量分光光度計紫外檢測
Micro Drop細(xì)胞檢測功能：
細(xì)胞檢測是使用分光光度計檢測光透過細(xì)胞懸液的散射光，得出對應(yīng)吸光值。對于Micro Drop而言，基座檢測和比色皿檢測之間比較大的不同是光程不一樣，光譜圖顯示的是從250nm到700nm范圍內(nèi)的光譜檢測結(jié)果。
樣本均一性：在檢測前要確保樣品的均一性，使用基座檢測前要把樣品混合均一再加到基座上檢測，使用比色皿檢測時可以使用攪拌功能。
檢測范圍：由于采用了比較短的檢測光程，Micro Drop可以檢測比較高濃度的細(xì)胞懸液。由于可以顯示較**段的光譜。比較稀的樣品可以在較低的波長下檢測，比如說可以在400nm處檢測。用戶還可以使用比色皿來檢測比較稀的樣品。
檢測基座的消毒：如果需要消毒，請使用消毒液，如可以使用0.5%的次氯酸鈉來清潔基座，以保證基座上沒有生物活性物質(zhì)殘留。
貴州性價比高超微量分光光度計蛋白檢測不同的光源都有其特有的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。
使用Micro Drop可以方便地使用微量樣品進行紫外－可見分光檢測：
1. 不用稀釋就可以檢測濃度小于15000ng/μl（dsDNA）的核酸濃度；
2. 普通的紫外－可見分光光度檢測；
3. 純蛋白濃度檢測（A280）；
4. 微陣列和Protein & Labels應(yīng)用中的熒光染料基團檢測；
5. BCA蛋白定量分析；
6. Bradford蛋白定量分析；
7. Lowry法蛋白定量分析；
8. Pierce 660nm蛋白定量分析；
9. 微生物細(xì)胞培養(yǎng)檢測。
上海寶予德科學(xué)儀器有限公司主營超微量分光光度計，歡迎大家來電咨詢！
超微量分光光度計比色法測定蛋白質(zhì)濃度：
BCA法：這是一種較新的、更敏感的蛋白測試法。要分析的蛋白在堿性溶液里與Cu2+反應(yīng)產(chǎn)生Cu+，后者與BCA形成螯合物，形成紫色化合物，吸收峰在562nm波長。此化合物與蛋白濃度的線性關(guān)系極強，反應(yīng)后形成的化合物非常穩(wěn)定。相對于Lowry法，操作簡單，敏感度高。但是與Lowry法相似的是容易受到蛋白質(zhì)之間以及去污劑的干擾。
Bradford法：這種方法的原理是蛋白質(zhì)與考馬斯亮蘭結(jié)合反應(yīng)，產(chǎn)生的有色化合物吸收峰595nm。其比較大的特點是，敏感度好，是Lowry和BCA兩種測試方法的2倍；操作更簡單，速度更快；只需要一種反應(yīng)試劑；化合物可以穩(wěn)定1小時，方便結(jié)果；而且與一系列干擾Lowry，BCA反應(yīng)的還原劑(如DTT，巰基乙醇)相容。但是對于去污劑依然是敏感的。**主要的缺點是不同的標(biāo)準(zhǔn)品會導(dǎo)致同一樣品的結(jié)果差異較大，無可比性。
蛋白質(zhì)在280nm波長處有較大吸光值。
Micro Drop蛋白質(zhì)檢測功能：
Protein Lowry檢測方式：
Lowry法是蛋白與硫酸銅在堿性環(huán)境下反應(yīng)形成銅-蛋白復(fù)合物。Folin－Ciocalteu試劑可以有效的還原銅復(fù)合物，產(chǎn)生與蛋白量成比例的藍色產(chǎn)物。檢測該藍色產(chǎn)物在650nm處的吸光值，并在405nm處做基線校正，計算得出蛋白的濃度。試驗中使用的試劑可以從多個廠家購買。與其他比色法一樣，Lowry法進行蛋白定量檢測前也需要構(gòu)建一個標(biāo)準(zhǔn)曲線。
推薦使用20μl的蛋白樣品和100μl Lowry試劑來做反應(yīng)。在Micro Drop上可以檢測的樣品濃度范圍為0.20mg/ml到4mg/ml。
按照試劑盒生產(chǎn)廠家的說明來準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品和和構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。確保在所有檢測過程中，每個樣品的處理時間及環(huán)境溫度一致?？梢詮脑噭┖猩a(chǎn)廠家購買用于構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品（BSA）。
A320nm 或A340nm——是基線校準(zhǔn)波長，為檢測溶液樣品的濁度和其他干擾因子。貴州性價比高超微量分光光度計蛋白檢測
使用光譜進行定性分析的儀器叫做光譜儀。湖北全光譜波長超微量分光光度計紫外檢測
A260:是核酸比較高吸收峰的吸收波長，比較好測量值的范圍為0.1至1.0。如果不在此范圍，稀釋或濃縮樣品，使之在此范圍內(nèi)；如果吸光度小于0.05，檢查是否存 在操作因素（如移液不準(zhǔn)確，樣品內(nèi)有懸浮物等）影響。DNA樣品的A260 吸光度值是否>0.1。（請注意，這個值跟儀器無關(guān)，核酸的吸光度必需大于0.1，其值才有效和可靠，因為樣品中的雜質(zhì)和顆粒這些不純物的干擾通常 會對光有一定吸收，其值<0.1）；
A280:是蛋白比較高吸收峰的吸收波長.
A230:是碳水化合物比較高吸收峰的吸收波長：
A260/A280:是核酸純度的指示值。純度好的DNA或RNA，在pH7-8.5 下A260 / A280的比值應(yīng)該在2.0 或2.5。 純凈的樣品比值大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）。如果比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白質(zhì)或者酚類物質(zhì)的影響。
A260/A230:純DNA和 RNA的A260/A230比值為2.5。若比值小于2.0標(biāo)明樣品被碳水化合物（糖類）、鹽類或有機溶劑污染，需要純化樣品。
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