青海高重復(fù)性超微量分光光度計蛋白檢測

來源: 發(fā)布時間:2023-06-15

Micro Drop細胞檢測功能:
細胞檢測是使用分光光度計檢測光透過細胞懸液的散射光,得出對應(yīng)吸光值。對于Micro Drop而言,基座檢測和比色皿檢測之間比較大的不同是光程不一樣,光譜圖顯示的是從250nm到700nm范圍內(nèi)的光譜檢測結(jié)果。
樣本均一性:在檢測前要確保樣品的均一性,使用基座檢測前要把樣品混合均一再加到基座上檢測,使用比色皿檢測時可以使用攪拌功能。
檢測范圍:由于采用了比較短的檢測光程,Micro Drop可以檢測比較高濃度的細胞懸液。由于可以顯示較**段的光譜。比較稀的樣品可以在較低的波長下檢測,比如說可以在400nm處檢測。用戶還可以使用比色皿來檢測比較稀的樣品。
檢測基座的消毒:如果需要消毒,請使用消毒液,如可以使用0.5%的次氯酸鈉來清潔基座,以保證基座上沒有生物活性物質(zhì)殘留。
不同的光源都有其特有的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。青海高重復(fù)性超微量分光光度計蛋白檢測

Micro Drop蛋白質(zhì)檢測功能:
Protein A280檢測類型:
蛋白質(zhì)具有很強的多樣性,Protein A280功能主要用于檢測那些含有Trp,Tyr殘基或者含有Cys-Cys二硫鍵的純蛋白,這些蛋白在280nm處吸光值較大。這個方法不需要構(gòu)建標準曲線,在檢測吸光值后,軟件會直接計算蛋白濃度。與核酸檢測一樣,Protein A280光譜圖顯示的是10mm光程下的數(shù)據(jù)。
Micro Drop在基座模式下可以比較高檢測400mg/ml的BSA而不用稀釋。軟件可以自動使用不同光程來檢測每個樣品的吸光值。
在樣品的10mm吸光值>3.0(>4.5mg/ml BSA)時可以選擇小容量檢測。
遼寧超微量分光光度計Micro Drop為一款全光譜波長超微量分光光度計。

分光光度計是一種分析測量光譜的儀器,因為應(yīng)用需求的不同,分光光度計有著不同的種類。分光光度計按照波長及應(yīng)用領(lǐng)域的不同可以分為:
(1)可見光分光光度計:用來測量待測物質(zhì)對可見光(400~760nm)的吸光度并進行定量分析的儀器,稱為可見分光光度計??稍?00nm測定細菌細胞密度。
(2)紫外分光光度計:紫外可見分光光度計用來測量待測物質(zhì)對可見光或紫外光(200~760nm)的吸光度并進行定量分析的儀器??梢詼y定核酸和蛋白的濃度,也可以測定細菌細胞密度。紫外分光光度計又可分為單光束,假雙光束,雙光束。
(3)紅外分光光度計:一般的紅外光譜是指大于760nm的紅外光譜,這是研究有機化合物**常用的光譜區(qū)域,能分析各種狀態(tài)(氣、液、固)的試樣。
(4)熒光分光光度計:熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。應(yīng)用于科研、化工、醫(yī)藥、生化、環(huán)保以及臨床檢驗、食品檢驗、教學(xué)實驗等領(lǐng)域。
(5)原子吸收分光光度計:該法主要適用樣品中微量及痕量組分分析常規(guī)儀器之一。是材料分析及質(zhì)量控制部門進行常量、微量金屬(半金屬)元素分析的有力工具。
現(xiàn)今生命科學(xué)領(lǐng)域比較流行的超微量分光光度計是屬于紫外分光光度計的一種。

超微量分光光度計比色法測定蛋白質(zhì)濃度:
BCA法:這是一種較新的、更敏感的蛋白測試法。要分析的蛋白在堿性溶液里與Cu2+反應(yīng)產(chǎn)生Cu+,后者與BCA形成螯合物,形成紫色化合物,吸收峰在562nm波長。此化合物與蛋白濃度的線性關(guān)系極強,反應(yīng)后形成的化合物非常穩(wěn)定。相對于Lowry法,操作簡單,敏感度高。但是與Lowry法相似的是容易受到蛋白質(zhì)之間以及去污劑的干擾。
Bradford法:這種方法的原理是蛋白質(zhì)與考馬斯亮蘭結(jié)合反應(yīng),產(chǎn)生的有色化合物吸收峰595nm。其比較大的特點是,敏感度好,是Lowry和BCA兩種測試方法的2倍;操作更簡單,速度更快;只需要一種反應(yīng)試劑;化合物可以穩(wěn)定1小時,方便結(jié)果;而且與一系列干擾Lowry,BCA反應(yīng)的還原劑(如DTT,巰基乙醇)相容。但是對于去污劑依然是敏感的。**主要的缺點是不同的標準品會導(dǎo)致同一樣品的結(jié)果差異較大,無可比性。
A320nm 或A340nm——是基線校準波長,為檢測溶液樣品的濁度和其他干擾因子。

超微量分光光度計比色法測定蛋白質(zhì)濃度:
蛋白質(zhì)通常是多種蛋白質(zhì)的化合物,比色法測定的基礎(chǔ)是蛋白質(zhì)構(gòu)成成分:氨基酸(如酪氨酸,絲氨酸)與外加的顯色基團或者染料反應(yīng),產(chǎn)生有色物質(zhì)。有色物質(zhì)的濃度與蛋白質(zhì)反應(yīng)的氨基酸數(shù)目直接相關(guān),從而反應(yīng)蛋白質(zhì)濃度。
比色方法一般有BCA,Bradford,Lowry等幾種方法。
Lowry法:以**早期的Biuret反應(yīng)為基礎(chǔ),并有所改進。蛋白質(zhì)與Cu2+反應(yīng),產(chǎn)生藍色的反應(yīng)物。但是與Biuret相比,Lowry法敏感性更高。缺點是需要順序加入幾種不同的反應(yīng)試劑;反應(yīng)需要的時間較長;容易受到非蛋白物質(zhì)的影響;含EDTA,Tritonx-100等物質(zhì)的蛋白不適合此種方法。
Micro Drop為一款全波長(185~910nm)超微量紫外可見分光光度計。云南性價比高超微量分光光度計價格優(yōu)惠

用來測量待測物質(zhì)對可見光(400~760nm)的吸光度并進行定量分析的儀器,稱為可見分光光度計。青海高重復(fù)性超微量分光光度計蛋白檢測

分光光度計采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長的光源,光線透過測試的樣品后,部分光線被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
單色光輻射穿過被測物質(zhì)溶液時,被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比,其關(guān)系如下式:
A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc
式中 :A 為吸光度;
I0為入射的單色光強度;
I 為透射的單色光強度;
T 為物質(zhì)的透射率;
k 為摩爾吸收系數(shù);
L 為被分析物質(zhì)的光程,即比色皿的邊長;
c 為物質(zhì)的濃度;
物質(zhì)對光的選擇性吸收波長,以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。當已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后可用同樣條件將該供試品配成溶液,測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質(zhì)的含量。在可見光區(qū),除某些物質(zhì)對光有吸收外,很多物質(zhì)本身并沒有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析。由于顯色時影響呈色深淺的因素較多,且常使用單色光純度較差的儀器,故測定時應(yīng)用標準品或?qū)φ掌吠瑫r操作。
青海高重復(fù)性超微量分光光度計蛋白檢測

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