Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(5U/μl):高效除PCR污染的關(guān)鍵酶在分子生物學(xué)研究中,PCR技術(shù)的應(yīng)用極為廣,但PCR產(chǎn)物的交叉污染問題一直是影響實驗準確性和可靠性的關(guān)鍵因素之一。Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(UDG)作為一種高效的酶工具,憑借其獨特的性能和廣的應(yīng)用,已成為解決這一問題的理想選擇。一、產(chǎn)品特點高效水解尿嘧啶Uracil-DNAGlycosylase(UDG)能夠特異性地催化DNA中尿嘧啶(dU)堿基與脫氧核糖之間的N-糖苷鍵水解,釋放游離尿嘧啶。這種酶對單鏈和雙鏈DNA均有效,但對RNA或長度不超過6個堿基的DNA寡核苷酸無活性。防止PCR產(chǎn)物污染UDG的主要應(yīng)用之一是防止PCR產(chǎn)物的交叉污染。通過在PCR反應(yīng)中使用dUTP替代dTTP,生成含有dU的PCR產(chǎn)物,UDG可以特異性地切割這些含有dU的DNA,從而防止其在后續(xù)反應(yīng)中作為模板被擴增。反應(yīng)條件兼容性UDG在pH8.0左右表現(xiàn)出活性,且不需要二價陽離子,可在較寬的pH范圍內(nèi)工作。它對高離子強度(>200mM)敏感,因此在使用時需注意反應(yīng)體系的離子濃度。盡管Phusion酶具有高保真性,但其擴增速度并未受到影響。它在短時間內(nèi)完成長片段DNA的擴增提高了實驗效率。Recombinant Human NKp30/NCR3/CD337(hFc Tag)
GoldenView 吖啶橙核酸染料:安全高效的核酸可視化工具GoldenView 吖啶橙核酸染料是一種新型的核酸染色劑,可替代傳統(tǒng)的溴化乙錠(EB),廣應(yīng)用于瓊脂糖凝膠電泳和細胞染色實驗。它與核酸結(jié)合后能產(chǎn)生強烈的熒光信號,其靈敏度與EB相當,但在安全性方面更具優(yōu)勢。產(chǎn)品特點高靈敏度:GoldenView與核酸結(jié)合后能產(chǎn)生明亮的熒光信號,雙鏈DNA在紫外光下呈現(xiàn)綠色熒光,而單鏈DNA或RNA呈現(xiàn)紅色熒光。安全性高:與EB不同,GoldenView在多項致突變性試驗中未表現(xiàn)出致疾病性,對皮膚和眼睛的刺激性較小。適用范圍廣:不僅適用于DNA染色,還可用于RNA染色,同時可用于細胞凋亡檢測。應(yīng)用場景瓊脂糖凝膠電泳:用于檢測DNA片段和RNA條帶,尤其適合大片段DNA的檢測。細胞染色:用于區(qū)分正常細胞、凋亡細胞和壞死細胞,常與碘化丙啶(PI)聯(lián)合使用。細胞凋亡檢測:吖啶橙可穿透細胞膜,結(jié)合細胞核DNA,用于熒光顯微鏡或流式細胞儀分析。GoldenView 吖啶橙核酸染料是一種高效、安全的核酸染色試劑,適用于多種實驗場景。其雙重?zé)晒馓匦允蛊湓诤怂犭娪竞图毎芯恐斜憩F(xiàn)出色,是實驗室中理想的EB替代品。Recombinant Biotinylated Human Notch 3 Protein,His-Avi Tag,Ultra-Long Master Mix (2×)(With Dye)憑借其強大的長片段擴增能力、高保真性、高特異性、便捷的操作流程。
robe qPCR Mix (2×, High ROX):高特異性與強校正能力的qPCR解決方案Probe qPCR Mix (2×, High ROX) 是一種為實時熒光定量PCR(qPCR)設(shè)計的即用型預(yù)混液,特別適用于需要高濃度ROX校正染料的qPCR儀器。該預(yù)混液結(jié)合了熱啟動Taq DNA聚合酶、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液、dNTPs以及高濃度ROX,能夠?qū)崿F(xiàn)高效、特異的基因定量檢測。產(chǎn)品特點高特異性和靈敏度:采用熱啟動Taq DNA聚合酶,結(jié)合抗體或化學(xué)修飾技術(shù),有效減少非特異性擴增,提高檢測靈敏度。高濃度ROX校正:含有高濃度ROX染料,適用于需要高濃度ROX作為校正染料的qPCR儀器,如ABI 7000、7900HT等。防污染系統(tǒng):部分產(chǎn)品含有dUTP和UNG(尿嘧啶DNA糖基化酶),能夠有效降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止假陽性。快速反應(yīng):支持快速qPCR程序,可在短時間內(nèi)完成檢測,提高實驗效率。操作簡便:2×預(yù)混液設(shè)計,只需加入引物、探針和模板即可進行反應(yīng),減少了操作步驟和污染風(fēng)險。應(yīng)用場景基因表達分析:用于定量檢測特定基因的表達水平。病原體檢測:快速檢測病毒、細菌等病原體的DNA。SNP分型和拷貝數(shù)變異分析:通過探針法實現(xiàn)高特異性的基因分型。多重qPCR:可在同一反應(yīng)中同時檢測多個目標基因。
10× DNA Loading Buffer 是一種高濃度的即用型試劑,廣泛應(yīng)用于DNA凝膠電泳實驗中。它通過添加特定的染料和高密度成分(如甘油或蔗糖),使DNA樣品在電泳過程中更容易沉降并被觀察,是DNA分析實驗中不可或缺的工具。產(chǎn)品特點高密度與染料標記:10× DNA Loading Buffer 含有高濃度的甘油或蔗糖,能夠使DNA樣品在電泳時沉降于凝膠孔底部,避免漂浮。同時,其中的染料(如溴酚藍或二甲苯藍)可以指示DNA遷移的位置,便于實時觀察電泳進程。即用型設(shè)計:無需額外配制,直接與DNA樣品混合即可使用,簡化了實驗操作。兼容性強:適用于多種類型的DNA樣品,包括PCR產(chǎn)物、質(zhì)粒DNA、基因組DNA片段等,也兼容瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠電泳。穩(wěn)定保存:常溫保存,穩(wěn)定性高,無需特殊處理。應(yīng)用場景DNA片段分離:在瓊脂糖凝膠電泳中,用于分離和分析DNA片段,如PCR產(chǎn)物、質(zhì)粒DNA、限制性酶切片段等。電泳指示:染料的遷移速率可以作為DNA片段大小的參考,幫助判斷目標片段的位置。DNA回收:在DNA回收實驗中,幫助定位目標條帶,便于后續(xù)的切膠回收操作。這種預(yù)混液結(jié)合了熱啟動技術(shù)和優(yōu)化的反應(yīng)體系,為準確的基因擴增提供了強大的支持。
Pfu DNA聚合酶是一種從嗜熱古細菌 Pyrococcus furiosus 中提取的高保真DNA聚合酶,因其準確性和熱穩(wěn)定性而被廣應(yīng)用于分子生物學(xué)研究。Pfu DNA聚合酶具有5'-3' DNA聚合酶活性和3'-5'外切酶活性,這種獨特的校正功能使其能夠在DNA合成過程中糾正錯誤摻入的堿基,從而提高擴增的保真性。與Taq DNA聚合酶相比,Pfu酶的錯誤率更低,其保真性是Taq酶的10倍以上。這種高保真性使其成為需要準確擴增的實驗(如基因克隆、突變研究和測序準備)的理想選擇。此外,Pfu DNA聚合酶具有出色的熱穩(wěn)定性,能夠在95°C的高溫下保持活性,適合PCR反應(yīng)的高溫變性步驟。其擴增產(chǎn)物為平末端,適用于平末端克隆,但需注意,Pfu酶擴增的DNA片段不適合常規(guī)的T載體克隆。Pfu DNA聚合酶的應(yīng)用領(lǐng)域廣,包括高保真PCR、基因克隆、點突變、全基因合成以及高質(zhì)量測序樣本的準備。它還常與其他酶(如Taq酶)聯(lián)合使用,以結(jié)合高保真性和快速擴增的優(yōu)點??傊琍fu DNA聚合酶憑借其高保真性、熱穩(wěn)定性和廣的應(yīng)用場景,已成為分子生物學(xué)實驗中不可或缺的工具,為科學(xué)研究提供了強有力的支持。與一些其他 DNA 聚合酶不同,T4 DNA 聚合酶不具有 5’→3’外切酶活性,不會對 DNA 鏈的 5’端進行切割和修飾。Recombinant Mouse CPM Protein,His Tag
Pfu DNA Polymerase的熱穩(wěn)定性和保真性使其在優(yōu)化PCR條件時更為靈活,比如在GC含量較高的模板中。Recombinant Human NKp30/NCR3/CD337(hFc Tag)
Probe qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus):高效、特異且防污染的qPCR解決方案Probe qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus) 是一種為探針法實時熒光定量PCR(qPCR)設(shè)計的即用型預(yù)混液,結(jié)合了低濃度ROX校正染料和UDG防污染系統(tǒng),能夠有效提高檢測的特異性和準確性。產(chǎn)品特點高特異性和靈敏度:采用抗體修飾的熱啟動Taq DNA聚合酶,結(jié)合優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液,有效減少非特異性擴增,提高檢測靈敏度。UDG防污染系統(tǒng):含有UDG酶和dUTP,可在反應(yīng)前降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止氣溶膠污染。低濃度ROX校正:含有低濃度ROX染料,適用于需要低濃度ROX作為校正染料的qPCR儀器,如ABI 7500、ViiA 7、QuantStudio系列等。多重檢測能力:支持多重qPCR反應(yīng),可在同一反應(yīng)中同時檢測多個目標基因。操作簡便:2×預(yù)混液設(shè)計,只需加入引物、探針和模板即可進行反應(yīng),減少了操作步驟和污染風(fēng)險。應(yīng)用場景基因表達分析:用于定量檢測特定基因的表達水平。病原體檢測:快速檢測病毒、細菌等病原體的DNA。多重檢測:可在同一反應(yīng)中同時檢測多個目標基因。