即用型功能性B細(xì)胞糖尿病細(xì)胞模型參考文獻(xiàn)

在EndoC-βH5細(xì)胞中檢測到所有對(duì)β細(xì)胞身份和功能重要的轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)。與成人b細(xì)胞相比，EndoC-βH5細(xì)胞中的表達(dá)水平相似（FOXA2、MNX1、NKX2.2）或更高（HOPX、MAFB、NEUROD1、PAX6、PDX1）。GLIS3、NKX6.1和MAFA在EndoC-βH5細(xì)胞中以較低水平表達(dá)EndoC-βH5細(xì)胞中表達(dá)與胰島素分泌相關(guān)的受體，包括腎上腺素(ADRA2A)、脂肪酸(FFAR1、FFAR3)、GABA(GABRB3)、胰hao xue tang素(GCGR)、生長抑素(SSTR2)和腸jiang xue tang素受體，例如胰gao xue tang素樣受體肽-1(GLP1R)和胃抑制多肽(GIPR)。重要的是，EndoC-βH5細(xì)胞中的GLP1R、GIPR和GCGR比EndoC-bH1細(xì)胞中更豐富。EndoC-B h1是一種永生細(xì)胞系，可進(jìn)行反復(fù)的復(fù)蘇凍融，有效節(jié)約成本。即用型功能性B細(xì)胞糖尿病細(xì)胞模型參考文獻(xiàn)

根據(jù)從嚙齒動(dòng)物β細(xì)胞獲得的數(shù)據(jù)來看，葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC2A2頭次被認(rèn)為是葡萄糖感知的主要決定因素，而后來的研究表明，葡萄糖激酶(GLK)是主要決定因素。在人類β細(xì)胞中，GLK被認(rèn)為是葡萄糖感知的主要決定因素。為了克服這些限制，在HumanCellDesign中生成了新的β細(xì)胞系。EndoC-βH1是通過將表達(dá)SV40LT的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)到人類胎兒胰腺芽中來開發(fā)的。隨后將轉(zhuǎn)導(dǎo)的芽移植到SCID小鼠體內(nèi)，生成的表達(dá)SV40LT的細(xì)胞增殖并形成胰島素瘤。湖北慢病毒構(gòu)建型糖尿病細(xì)胞模型表達(dá) EndoC-BH5 的 HLA-A2 重新利用抗yan藥物或發(fā)現(xiàn) I 類抗原肽加工和呈遞的抑制劑,其細(xì)胞因子反應(yīng)與原發(fā)性類似。

Human Cell Design 的細(xì)胞模型不僅在基礎(chǔ)研究中發(fā)揮重要作用，還在新藥開發(fā)和臨床前研究中具有重要應(yīng)用價(jià)值。通過這些高質(zhì)量的細(xì)胞模型，科學(xué)家們能夠更好地理解糖尿病的病理機(jī)制，篩選出具有潛力的新藥物，并驗(yàn)證其在細(xì)胞水平上的療效。這些細(xì)胞模型為糖尿病zhi liao的創(chuàng)新提供了新的希望。HCD 的科學(xué)家們通過不斷的實(shí)驗(yàn)和優(yōu)化，成功開發(fā)出了一系列高效的人源胰島β細(xì)胞模型。這些模型不僅在胰島素分泌方面表現(xiàn)出色，還能夠在不同的實(shí)驗(yàn)條件下穩(wěn)定生長，為研究人員提供了可靠的實(shí)驗(yàn)工具。HCD 的細(xì)胞模型已經(jīng)在全球多個(gè)實(shí)驗(yàn)室中被廣泛應(yīng)用，為糖尿病研究和治療帶來了新的可能。

Human Cell Design 開發(fā)了創(chuàng)新且安全的人類β細(xì)胞系生產(chǎn)方法。首先，將每個(gè)轉(zhuǎn)導(dǎo)的人類胎兒胰腺芽移植到 2 或 3 只 SCID 小鼠的腎被膜下，因?yàn)樵摬课皇侨祟愐认侔l(fā)育的允許部位。在 6 到 8 個(gè)月內(nèi)，所有移植的小鼠都發(fā)生了原發(fā)性胰島素瘤，這導(dǎo)致它們的血糖水平下降。與其他胰腺移植相比，原發(fā)性胰島素瘤是高度血管化的。然后將原發(fā)性胰島素瘤中這些高度血管化的區(qū)域分離，用在大鼠胰島素啟動(dòng)子控制下表達(dá) hTERT 的慢病毒進(jìn)行轉(zhuǎn)導(dǎo)，并移植到其他 SCID 小鼠中。這些小鼠在 2 至 3 個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)低血糖，胰島素陽性細(xì)胞大量擴(kuò)增。這種體內(nèi)擴(kuò)增有助于維持大量增殖的胰島素細(xì)胞，并允許定義允許的培養(yǎng)條件，在這種條件下，可以在體外建立永生化細(xì)胞系。Human Cell Design（HCD）開發(fā)了一種用于在人類胎兒組織中使用靶向Zhong Liu產(chǎn)生功能的人類β細(xì)胞系。在胰島素啟動(dòng)子的控制下，用表達(dá) SV40LT 的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)人類胎兒胰腺芽。糖尿病細(xì)胞模型接近原代成人 B 細(xì)胞，是更好地了解人類 B 細(xì)胞生理學(xué)和開發(fā)糖尿病新療法的重要模型。

EndoC-βH5GLTx、EndoC-βH5HLA-A2、EndoC-βH5等細(xì)胞可在體外在葡萄糖劑量刺激下產(chǎn)生正常的胰島素分泌反應(yīng)，對(duì)GLP-1R/GLP-1等胰島素刺激因子產(chǎn)生正常響應(yīng)，可以響應(yīng)細(xì)胞因子刺激，表達(dá)HLA-A2等T細(xì)胞受體，因此可用于糖尿病炎癥相關(guān)等多種藥物開發(fā)實(shí)驗(yàn)。EndoC-βH5細(xì)胞可批量穩(wěn)定生產(chǎn)，因此可以進(jìn)行基于siRNA的高通量篩選研究中，用于鑒定出潛在的2型糖尿病藥物靶點(diǎn)。HumanCellDesign(HCD)是專門從事人源胰島β細(xì)胞系構(gòu)建和開發(fā)的公司。人源胰島β細(xì)胞模型構(gòu)建技術(shù)性文章早期發(fā)表于2011年，相關(guān)文章總引用量達(dá)到600+，人源胰島β細(xì)胞模型已經(jīng)被全球200多家生物醫(yī)藥和生命科研機(jī)構(gòu)作為糖尿病細(xì)胞模型使用。HCD具有代表性的細(xì)胞系有EndoC-BH1，EndoC-BH3，EndoC-BH5，GLTxEndoC-BH5，HLA-A2EndoC-BH5等，細(xì)胞系可作為糖尿病細(xì)胞模型和糖尿病替代細(xì)胞zhi liao模型使用。糖尿病細(xì)胞模型—EndoC-BH1是永生化胰島細(xì)胞，分泌的胰島素接近天然胰島細(xì)胞。高質(zhì)量糖尿病細(xì)胞模型無菌環(huán)境操作

EndoC-BH1 和增殖的 EndoC-BH5 細(xì)胞分別在 Opti-B1 和 Ulti-b1 培養(yǎng)基中的 BCoat涂層塑料板上培養(yǎng)。即用型功能性B細(xì)胞糖尿病細(xì)胞模型參考文獻(xiàn)

表達(dá)HLA-A2的EndoC-βH5-HLA-A2系是通過每105細(xì)胞使用100ngp24衣殼蛋白與pTRIPDU3CMVHLA-A2IRESPURO慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)EndoC-βH5來產(chǎn)生的。在1mg/ml嘌呤霉素存在下將細(xì)胞擴(kuò)增三周以選擇轉(zhuǎn)導(dǎo)的細(xì)胞。為了完全成熟，將EndoC-βH5和EndoC-βH5-HLA-A2細(xì)胞再培養(yǎng)3周，并用5mM他莫昔芬和0.5mM更昔洛韋處理，以切除永生化基因并選擇切除的細(xì)胞。使用胰蛋白酶（25300e054）收集所得細(xì)胞，表達(dá)EndoC-βH5細(xì)胞的修飾HLA-A2引發(fā)同種異體反應(yīng)性T淋巴細(xì)胞ji huo，概括了1型糖尿病中涉及的一些自身免疫機(jī)制。即用型功能性B細(xì)胞糖尿病細(xì)胞模型參考文獻(xiàn)