無(wú)動(dòng)物源成分PEI轉(zhuǎn)染試劑價(jià)格多少

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法：1.接種細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)（不建議用胰酶）。調(diào)整細(xì)胞濃度，將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿，每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線(xiàn)性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個(gè)需要客戶(hù)自行摸索配比，每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會(huì)稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線(xiàn)性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請(qǐng)勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí)，請(qǐng)用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞：直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí)，去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基，替換成無(wú)血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。用PEI轉(zhuǎn)染試劑時(shí)出現(xiàn)沉淀什么原因?無(wú)動(dòng)物源成分PEI轉(zhuǎn)染試劑價(jià)格多少

產(chǎn)品特點(diǎn)：PEIMAX40K是線(xiàn)性聚乙烯亞胺鹽酸鹽形式（LinearPolyethylenimineHydrochloride），是線(xiàn)性化聚乙烯亞胺PEI25K的升級(jí)產(chǎn)品。相比于PEI25K，PEIMAX40K：1.完全水解（去乙酰化）；2.鹽酸鹽形式，具更高的水溶特性；3.含更長(zhǎng)連續(xù)性乙烯亞胺片段，其質(zhì)子化氮水平比PEI25K提高11%以上。應(yīng)用領(lǐng)域：PEIMAX40K（cat#24765）是一款非GMP等級(jí)的PEI轉(zhuǎn)染試劑，適用于基礎(chǔ)學(xué)術(shù)研究和藥物研發(fā)早期階段，以固體粉末形式提供，需用戶(hù)自行配置（詳情見(jiàn)使用方法）。如想申請(qǐng)PEI試用裝，請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”，即可參加！血清兼容PEI轉(zhuǎn)染試劑運(yùn)輸方式PEI轉(zhuǎn)染試劑會(huì)有毒性嗎?

材料：質(zhì)粒DNA指數(shù)生長(zhǎng)的真核細(xì)胞PEI（聚乙烯亞胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI儲(chǔ)存液（100μM）：稱(chēng)取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中，0.2μm濾膜過(guò)濾，儲(chǔ)存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS（pH7.4）：將8.76gNaCl溶解于900ml超純水，加入20ml1M的HEPES，調(diào)pH值到7.4，定容至1L，過(guò)濾（0.2μm濾膜）后儲(chǔ)存于4℃?zhèn)溆?。方法?．細(xì)胞分盤(pán)：通過(guò)胰酶消化收集細(xì)胞，用適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細(xì)胞/cm2的密度平鋪細(xì)胞于60mm組織培養(yǎng)皿上（根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇培養(yǎng)皿，使細(xì)胞貼壁后所占總面積達(dá)到培養(yǎng)皿面積的70-90％）。根據(jù)細(xì)胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當(dāng)細(xì)胞貼壁完全后即可開(kāi)始轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染前換入2mL預(yù)熱的無(wú)血清培養(yǎng)基。更多產(chǎn)品信息，歡迎咨詢(xún)上海曼博生物！

抗體藥物研發(fā)客戶(hù)提供小眾創(chuàng)新產(chǎn)品，包括從Researchgrade到cGMP等級(jí)的無(wú)動(dòng)物源培養(yǎng)基質(zhì)，轉(zhuǎn)染試劑、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑、基因編輯工具等產(chǎn)品和定制服務(wù)，支持ATMP（AdvanceTherapyMedicinalProducts）藥物研發(fā)從R&D到Clinicaltrial以及后期商業(yè)化的無(wú)縫轉(zhuǎn)化；以及提供藥物開(kāi)發(fā)和探索的抗體文庫(kù)定制和商業(yè)授權(quán)靈活的CHO工程細(xì)胞株以支持抗體藥物的商業(yè)化生產(chǎn)，以此希望幫助國(guó)內(nèi)科研工作者快速地接觸世界范圍內(nèi)的技術(shù)，分享研發(fā)工具進(jìn)步帶來(lái)的技術(shù)紅利，終為細(xì)胞、基因產(chǎn)業(yè)以及再生醫(yī)學(xué)行業(yè)等乃至整個(gè)生命科學(xué)行業(yè)賦能！更多關(guān)于轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問(wèn)題，歡迎咨詢(xún)上海曼博生物！也歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-bio ，私信回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)“即可申請(qǐng)PEI試用裝！PEI轉(zhuǎn)染試劑對(duì)復(fù)合物孵化的時(shí)間是有要求的，一般建議5~20分鐘之間.

注意事項(xiàng)質(zhì)粒質(zhì)量：請(qǐng)務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級(jí)無(wú)內(nèi)質(zhì)粒（推薦使用QIAGEN或者M(jìn)N公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒）。通過(guò)260nm光吸收測(cè)定DNA濃度，260nm/280nm比值確定DNA純度（比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi)）。如有可能，請(qǐng)通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)質(zhì)粒的完整性。細(xì)胞條件：使用適當(dāng)保存和經(jīng)常傳代的健康細(xì)胞。確保培養(yǎng)基沒(méi)有被細(xì)菌、或支原體污染。如果細(xì)胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細(xì)胞，請(qǐng)?jiān)谵D(zhuǎn)染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細(xì)胞。近期還有PEIfree申請(qǐng)活動(dòng)，歡迎咨詢(xún)上海曼博生物！關(guān)注曼博生物公眾號(hào)：Mine-bio，私信回復(fù)關(guān)鍵詞：PEI申請(qǐng)，即可參加試用裝申請(qǐng)活動(dòng)。用PEI轉(zhuǎn)染試劑時(shí)出現(xiàn)沉淀是為什么？線(xiàn)性PEI轉(zhuǎn)染試劑說(shuō)明書(shū)

有哪些比較好的轉(zhuǎn)染試劑嗎?無(wú)動(dòng)物源成分PEI轉(zhuǎn)染試劑價(jià)格多少

PEI在于可以應(yīng)用于體內(nèi)試驗(yàn)。當(dāng)初試驗(yàn)經(jīng)費(fèi)很有限，被逼無(wú)奈只能放棄脂質(zhì)體2000，選擇PEI，以至于相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)，轉(zhuǎn)染試驗(yàn)都不順利。下面是幾點(diǎn)關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染的注意要點(diǎn)：1.PEI的使用量可以參照脂質(zhì)體2000的說(shuō)明書(shū)，所用質(zhì)粒盡量去內(nèi)2.轉(zhuǎn)染時(shí)，一定要把PEI+DMEM加入到質(zhì)粒+DMEM中，順序不可錯(cuò)，輕微混勻，靜止20min3.轉(zhuǎn)染后4小時(shí)，一定要換液！換含有FBS的完全培養(yǎng)液！因?yàn)镻EI對(duì)細(xì)胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗(yàn)涉及到穩(wěn)定篩選，建議把血清濃度適當(dāng)提高。PS：事實(shí)證明，PEI是可行的，已經(jīng)做出穩(wěn)定細(xì)胞系了。Polysciences轉(zhuǎn)染與遞送相關(guān)產(chǎn)品已正式移交KyforaBio，相關(guān)產(chǎn)品標(biāo)簽將變更為KyforaBiobyPolysciences，后續(xù)購(gòu)買(mǎi)請(qǐng)認(rèn)準(zhǔn)備新品牌。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)的信息，可咨詢(xún)上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司！無(wú)動(dòng)物源成分PEI轉(zhuǎn)染試劑價(jià)格多少