生工高通量測序測序

來源: 發(fā)布時間:2022-09-01

什么是KBSeq全質(zhì)粒測序?它基于第二代測序技術(shù),一次性對大量質(zhì)粒(比較多可達(dá)6000個樣本)進(jìn)行并行測序,利用生物信息學(xué)分析,對數(shù)據(jù)進(jìn)行序列組裝并獲得每一個質(zhì)粒的完整序列信息。所以我們也稱它為,可以部分替代一代測序的高通量測序技術(shù)。測序長度:對于測序長度較長,如果我們用Sanger測序往往需要花費大量的時間,而我們KBSeq全質(zhì)粒測序則只需要5-7天,就可以測通片段長度小于30kb以下的片段。樣本用量:KBSeq全質(zhì)粒測序?qū)τ跇颖镜牧?,要求的也比較少,比如質(zhì)粒我們的樣本要求DNA的濃度需≥ 1 ng/μl, 體積需≥5 μl,如果比較珍貴的樣本或者是樣本比較難提取的,KBSeq就更為適合了。Life Ion torrentPGM 運行314、316、318芯片,可以承接擴(kuò)增子測序、靶區(qū)域測序、基因組重測序服務(wù)。生工高通量測序測序

生工其他PCR產(chǎn)物測序,項目介紹:隨著基因編輯技術(shù)(尤其是CRISPR-cas9技術(shù))的發(fā)展,科研人員使用傳統(tǒng)的Sanger測序無法快速有效鑒定基因編輯效率。但是,通過對靶基因區(qū)域附近設(shè)計引物,進(jìn)行PCR擴(kuò)增,并對PCR產(chǎn)物進(jìn)行高通量測序,可以快速高效的獲得目標(biāo)區(qū)域的突變頻率信息,尤其是對低頻突變的檢測效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于一代測序,性價比極高??侱NA 或者包裝完好的原始樣品(如土壤、糞便、 水體和口腔物);樣品名稱清晰,冷藏運輸。如有對照與實驗樣品的區(qū)分,標(biāo)明正常樣品與實驗樣品,如有分組,詳細(xì)描述分組分析信息,以及分組比較的分析需求信息。上海ITS高通量測序測序10xGenomics Chromium X多通道+高捕獲+10x的CellPlex多樣本混樣技術(shù)。

RNA樣品:1.請務(wù)必提供每個樣品具體的濃度、體積、制備時間以及物種來源。比較好附上電泳膠圖或者 Agilent Bioanalyzer 儀器檢測數(shù)據(jù)等;2.對于普通轉(zhuǎn)錄組樣品,請?zhí)峁舛取?00 ng/μl、總量≥2 μg 的總 RNA 樣品,樣品請去蛋白并進(jìn)行 DNase處理;一般情況下,普通轉(zhuǎn)錄組測序需要 RNA 樣品的 OD260/OD280為 2.0~2.2,Agilent Bioanalyzer 2100 器檢測獲得的總RNA 28S:18S≥1,RIN≥8;對于全長轉(zhuǎn)錄組測序樣品(ISO-seq),請?zhí)峁舛却笥?00 ng/ul,總量大于5 μg的總RNA樣品。樣品請去蛋白并進(jìn)行 DNase 處理;全長轉(zhuǎn)錄組測序需要 RNA 樣品的 OD260/OD280 為 2.0~2.2,2.3Agilent Bioanalyzer 2100 器檢測獲得的總RNA 28S:18S≥1,RIN≥8.5;

使用顯微鏡進(jìn)行懸液質(zhì)檢操作時應(yīng)注意:1.使用血球計數(shù)板時,可以提前鏡檢觀察每小格計數(shù)室內(nèi)是否潔凈無雜質(zhì)。若有雜質(zhì)灰層,則需要多次清洗,直至計數(shù)室潔凈無瑕;2.質(zhì)檢前將懸液輕微震蕩或使用擴(kuò)口gun頭吹打混勻;3.臺盼藍(lán)染色后需要盡快完成細(xì)胞計數(shù),一般建議不要超過10分鐘;4.如果方格中細(xì)胞數(shù)目過多,難以數(shù)清,應(yīng)當(dāng)對細(xì)胞懸液進(jìn)行稀釋以便于計數(shù);5.對于壓在方格界線上的細(xì)胞應(yīng)當(dāng)計數(shù)同側(cè)相鄰兩邊上的細(xì)胞數(shù),一般可采取“數(shù)上線不數(shù)下線,數(shù)左線不數(shù)右線”的原則處理,另兩邊不計數(shù)。組織材料樣品(提取RNA用),請預(yù)先用液氮速凍,然后轉(zhuǎn)移到干冰中運輸。

真核/原核無參mRNA-Seq,項目介紹;測序使用Illumina Xten平臺,測序原始數(shù)據(jù)質(zhì)控后進(jìn)行拼接,并進(jìn)一步對拼接所得轉(zhuǎn)錄本進(jìn)行功能注釋、CDD、CDS分析,SNP分析,SSR標(biāo)記開發(fā)等分析。在計算基因的表達(dá)量后,進(jìn)行基因表達(dá)差異及差異基因GO、KOG(原核生物為COG)、KEGG功能富集分析,KEGG pathway等分析。對于多個樣本,可進(jìn)行重復(fù)相關(guān)性檢查、共表達(dá)分析、PCA主成分分析。另外,還可以進(jìn)行基因功能互作、蛋白網(wǎng)絡(luò)互作等分析,深入研究基因功能,進(jìn)一步揭示基因間互作網(wǎng)絡(luò)等信息,為研究網(wǎng)絡(luò)調(diào)控機理提供方向。 組織材料樣品(提取RNA用)建議將標(biāo)簽用膠帶貼到管壁,干冰運輸。上海市SNP高通量測序技術(shù)

生物信息分析經(jīng)驗豐富,可以滿足客戶標(biāo)準(zhǔn)分析到定制分析作圖的需求。生工高通量測序測序

長鏈非編碼RNA(lncRNA)測序(只限有參考基因組物種),項目介紹:長鏈非編碼RNAs(Long non-coding RNAs,LncRNAs)是一類轉(zhuǎn)錄本長度大于200 nt且不編碼蛋白質(zhì)的RNAs(不含rRNA),普遍存在于各種生物體內(nèi)。哺乳動物基因組序列中4%~9%的序列產(chǎn)生的轉(zhuǎn)錄本是LncRNA(相應(yīng)的蛋白編碼RNA比例是1%)。近年來研究表明,LncRNA參與了多種重要的調(diào)控過程,如X染色體沉默、基因組印記及染色質(zhì)修飾等。通過LncRNA測序,可以快速獲得與其生物學(xué)過程或者疾病相關(guān)的LncRNA的表達(dá)變化,從而促進(jìn)LncRNA的深入研究。生工高通量測序測序

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