酶法提取是指可溶性膠原和酸溶性膠原被提取后,需用一些蛋白酶,如膠原酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰凝乳蛋白酶等水解,得到不同的酶促溶性膠原蛋白。所使用的蛋白酶主要分3種:動物蛋白酶(如胰蛋白酶,胃蛋白酶),植物蛋白酶(如木瓜蛋白酶,菠蘿蛋白酶),微生物蛋白酶(如堿性蛋白酶,中性蛋白酶)。在對酶法水解膠原蛋白的研究中,以堿性蛋白酶應用較多。將膠原進行限制性降解,即將末端肽切割下來,由于膠原肽鏈間的共價鍵都是通過分子末端肽里的賴氨酸或羥賴氨酸的相互作用形成的,末端肽被切下后,含三螺旋結構的主體部分可溶于稀有機酸而被提取出來。用酶處理,可以水解掉膠原纖維蛋白的末端肽,提高膠原蛋白的產率;而且還不會破壞膠原蛋白的三股螺旋結構,保持其特性。影響酶提取的因素有很多,如酶濃度、酶與底物的比例、酶解時間、酶解溫度、pH值以及料液比等。在實際操作中,大多數(shù)采用酶復合法提取膠原蛋白,較多的是使用胃蛋白酶提取,有機酸多為乙酸。 而魚皮和魚骨所含的Ⅰ型膠原蛋白是其主要膠原蛋白。湖北海鯛魚膠原蛋白功效和作用
作為生物高分子,膠原的強度不大,有研究表明膠原蛋白的凝膠強度與其濃度的平方幾乎成正比關系,強度測定可用凝膠強度計。特別提示:明膠、膠原蛋白和水解膠原蛋白并不相同。明膠是膠原在高溫作用下的變性產物,其組成復雜,相對分子質量分布寬,由于高溫造成膠原蛋白變性,膠原分子的3股螺旋結構被破壞,但可能有部分α鏈的螺旋鏈還存在,因此一定濃度的明膠溶液能成凝膠狀。在食品工業(yè)、攝影和制藥業(yè)中被廣泛應用。據(jù)報道,全世界每年生產的明膠產品中,有65%用于食品工業(yè),20%用于照相工業(yè),10%用于制藥工業(yè)。水解膠原蛋白是在較高溫度下用蛋白酶水解膠原或明膠得到的,受溫度和酶的雙重作用,使水解膠原蛋白的相對分子質量比明膠更小,由于在較高溫度條件下,蛋白酶對膠原肽鍵的水解是隨機的,使水解得到的蛋白液組成也很復雜,是相對分子質量從幾千到幾萬的蛋白多肽的混合物。由于分子量小,水解膠原蛋白容易降解,所以在營養(yǎng)保健品和日用化學品開發(fā)方面擁有一定的市場。水解膠原蛋白可用于生物發(fā)酵培養(yǎng)基,也可以作為一種高蛋白飼料營養(yǎng)添加劑替代進口魚粉用于混、配合飼料生產。膠原、明膠和水解膠原蛋白這3種物質雖具有同源性,但在結構和性能上卻有很大的區(qū)別。 湖南小分子膠原蛋白原料廠家結合保濕和抑制皺紋的作用,共同達到舒展粗紋,淡化細紋的功效!
氨基酸分析表明,,每1000個氨基酸殘基含有309個甘氨酸,其次為谷氨酸、脯氨酸和丙氨酸,分別為98、82和82個殘基,羥基脯氨和羥基賴氨酸數(shù)也較較高別為40和27。外傘中高的膠原蛋白含量表明水母資源是一個潛在的膠原蛋白源。Ⅰ型膠原分子長度約300nm,直徑約,呈棒狀,由三條肽鏈組成,其中有兩條α(Ⅰ)鏈,一條Ⅰ型膠原蛋白的電泳圖譜[29]α(Ⅱ)鏈。對機體功能作用較強。α(Ⅰ)鏈和α(Ⅱ)鏈之間的氨基酸序列只有微小的差異。有人利用Ⅰ型膠原蛋白的電腦模型來模擬結締組織的外基質結構,結果表明,用其它一些基團取代Ⅰ型膠原蛋白兩條鏈上氨基乙酸就會導致骨合成異常。第3條α鏈多存在于絕大多數(shù)真骨魚類,尤其是魚皮,其他陸生脊椎動物沒有。由3條異種α鏈形成的單一型雜分子α1(Ⅰ)α2(Ⅰ)α3(Ⅰ)組成,而非[α1(Ⅰ)]2α2(Ⅰ)。有人研究了黑石首魚和羊頭海鯛的骨和鱗的酸性膠原蛋白(ASC)的電泳類型,發(fā)現(xiàn)在電泳譜帶上可以清楚地看到β、γ、α1和α2組分,且α1的分子量為130kD,α2的分子量為110kD。因此,在某些魚類中,與其他組織,如肌肉和膀胱相比較,魚皮膠原蛋白中的α3(Ⅰ)鏈更適宜傳遞。
一般是白色、透明的粉狀物,分子呈細長的棒狀,相對分子質量從約2kD至300kD不等。膠原蛋白具有很強的延伸力,不溶于冷水、稀酸、稀堿溶液,具有良好的保水性和乳化性。膠原蛋白不易被一般的蛋白酶水解,但能被動物膠原酶斷裂,斷裂的碎片自動變性,可被普通蛋白酶水解。當環(huán)境pH為酸性時,膠原的變性溫度為38~39℃。[42]膠原蛋白紅外光譜圖冊參考資料。膠原蛋白DSC圖譜膠原蛋白是一種兩性電解質,這取決于兩個因素,其一,膠原每個肽鏈具有許多酸性或堿性的側基;其二,每個肽鏈的兩端有α-羧基和α-氨基,都具有接受或給予質子的能力,它們可在特定的pH值范圍內,解離產生正電荷或負電荷,換句話說,隨著介質的pH值,不同膠原即成為帶有許多正電荷或負電荷的離子。膠原肽鏈側基的pKa值與其組成氨基酸側基的pKa值略有不同,這是由于在蛋白質分子中受到鄰近電荷的影響所造成的。等電點是,呈現(xiàn)出偏堿性,因為膠原的肽鏈中堿性氨基酸比酸性氨基酸多一點。由于是高分子,在水溶液中具有膠體性質和一定粘度,粘度在等電點時比較低,而且溫度越低,粘度越大。 在這些酶的較適作用溫度下提取可能會破壞膠原蛋白的某些功能特性和生物活性。
膠原蛋白就好比一鍋才煮了一會兒的奶白色雞湯,待一段時間后,又變?yōu)榍鍦?,現(xiàn)在煮成一鍋高湯,就如膠原蛋白被不斷分解后,現(xiàn)在分解成為較小的氨基酸,氨基酸分子進入人體后,合成膠原蛋白,較終被人體吸收。膠原三肽的分子量極小,目前全球較小的CTP膠原三肽,CTP膠原三肽的分子量只280道爾頓,是目前全球分子量較小的,與皮膚膠原蛋白相同的基本結構,無需分解,能夠被皮膚直接吸收,吸收率高達99%,是普通膠原蛋白的36倍。在我們日常生活中,我們會觀察到下面的現(xiàn)象,它們很好的解釋了膠原蛋白、多肽、氨基酸之間的關系。真皮中含有豐滿的膠原蛋白層,而補充膠原三肽,能更有效的將皮膚細胞撐起。湖北口服膠原蛋白液體飲品
而且膠原蛋白對環(huán)境的污染也較小。湖北海鯛魚膠原蛋白功效和作用
采用酶法提取膠原蛋白時,必須嚴格控制提取條件:首先,酶作用時間必須適當。如果時間過短,膠原蛋白就不能充分釋放到提取液中,影響提取率;如果酶作用時間過長,膠原蛋白會水解過度,產生過多的苦味小分子低聚肽,不僅會增加分離純化的難度,也會影響膠原蛋白的功能特性和生物活性。其次,酶解溫度要適宜。溫度過低,酶的作用效果不明顯;溫度過高會引起酶的失活和膠原蛋白的變性。據(jù)報道,當介質pH略低于中性時,膠原蛋白的變性溫度為40~41℃,當介質pH為酸性時,膠原蛋白的變性溫度為38~39℃,而且魚皮膠原蛋白的變性溫度要比豬皮膠原蛋白的變性溫度低7~12℃。所以,如果要使提取的膠原蛋白具有良好的生物活性,在提取過程中應使提取溫度低于變性溫度。第三,需選用適當?shù)拿浮R话銖年懮溉閯游锝M織中提取膠原蛋白時,采用胃蛋白酶在其較適作用溫度下進行提取是合理的,但對于魚類等水生動物,由于其膠原蛋白的變性溫度比陸生哺乳動物低,因此許多蛋白酶便不適用,如果在這些酶的較適作用溫度下提取可能會破壞膠原蛋白的某些功能特性和生物活性。采用酶法提取膠原蛋白及其多肽的研究主要是從動物皮及其加工副產物中。 湖北海鯛魚膠原蛋白功效和作用
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