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所以,若想提取結(jié)構(gòu)完整、使用安全的膠原蛋白,很少采用此方法。有關(guān)單獨(dú)采用堿法提取膠原蛋白的報(bào)道不多,一般是堿法提取和酸法提法結(jié)合使用。比如在4℃條件下,魚(yú)骨用0.1moL/L的NaOH浸泡6h,再用2.5%NaCl浸泡6h去除雜蛋白,用10%的異丙醇溶液去除脂肪,0.1moL/L的檸檬酸浸泡3d,現(xiàn)在得到無(wú)色無(wú)味的膠原蛋白,提取率為11.87%。注意,無(wú)論酸法或堿法,均可有效地提取膠原蛋白,有人分別采用醋酸-鹽酸的混合酸液(pH3.0)和NaOH溶液(pH12.0)提取骨膠原蛋白,提取率基本相當(dāng)。但是,這兩種方法提取膠原蛋白不僅容易影響膠原蛋白的生物活性,而且提取后產(chǎn)生的酸性或堿性廢液必須進(jìn)行適當(dāng)處理,以避免對(duì)環(huán)境造成污染。膠原蛋白分子經(jīng)水解后主要形成相對(duì)分子量較小的膠原多肽。江西魚(yú)膠原蛋白廠家
酸法處理時(shí),反應(yīng)強(qiáng)烈,水解徹底,多生成氨基酸混合物,而且使用酸提取時(shí),根據(jù)酸濃度、水解溫度、水解時(shí)間等條件的不同,可以得到分子量不均的膠原水解物。但是在即使中等濃度酸徹底水解過(guò)程中色氨酸也會(huì)全部被破壞,絲氨酸和酪氨酸也會(huì)部分被破壞,且設(shè)備腐蝕嚴(yán)重。因此,酸法溶出生物醫(yī)用膠原要準(zhǔn)確控制酸度、溫度、時(shí)間等影響因素。由于各種不足,酸法很少單獨(dú)使用,一般和酶法配合。比如以豬皮為原料,在檸檬酸()和胃蛋白酶協(xié)同下提取膠原蛋白。在處理后的豬皮中加()處理一段時(shí)間,然后再用NaCL鹽析,現(xiàn)在提取率為,提取物保持了完整三股螺旋結(jié)構(gòu)的I型膠原蛋白。還有人以雛雞胸軟骨為原材料,在,在4℃,20000r條件下離心20min,現(xiàn)在應(yīng)用DEAE-SephadexA-50進(jìn)行離子交換層析,之后透析,再用NaCL鹽析,現(xiàn)在得到純化的膠原蛋白Ⅱ型。 云南牡蠣膠原蛋白肽原液海南省華上生物科技有限公司,是一家專業(yè)從事生產(chǎn)加工膠原蛋白肽的企業(yè)。
有人對(duì)海參膠原研究發(fā)現(xiàn),刺參體壁含蛋白,其中70%為膠原蛋白。氨基酸分析,膠原富含丙氨酸和羥脯氨酸,但羥賴氨酸含量較少,SDS電泳及SP凝膠柱分析發(fā)現(xiàn)其膠原組成為(α1)2α2。還有人從仿刺參()提取膠原蛋白,利用EDTA和Tris-HCl浸泡溶漲,用氫氧化鈉除去雜質(zhì)和非膠原蛋白,采用胃蛋白酶促溶提取粗制膠原,通過(guò)鹽析和透析獲取精致膠原蛋白,并進(jìn)一步利用SephacrylS-300HR凝膠過(guò)濾和DEAE-52陰離子交換除去多糖,獲取膠原蛋白純品。SDS-PAGE電泳表明膠原分子的組成為(α1)3,且α鏈類似于脊椎動(dòng)物Ⅰ型膠原的α1鏈,熱收縮溫度為57℃,低于牛皮膠原5℃。還有人對(duì)采自日本Senzaki海灣的Stomolopusmeleagri水母的外傘組織進(jìn)行了分析。整個(gè)中膠層被分成三部分,利用醋酸首先將凍干的水母中膠層分為酸溶性蛋白和酸不溶性物質(zhì),利用NaCl溶液將酸溶性蛋白分為酸溶性膠原蛋白和酸溶性非膠原蛋白,而不溶入醋酸的中膠層經(jīng)胃蛋白酶處理后大多變?yōu)榭扇苄缘哪z原質(zhì)。然后利用氨基酸分析儀對(duì)分離得到的三部分的組成分別進(jìn)行分析。發(fā)現(xiàn)該水母外傘中膠原蛋白含量很高,大約占干重的。經(jīng)SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳分析其膠原蛋白是由三個(gè)獨(dú)特α鏈組成。
隨著各類香腸制品在肉制品中所占的比例越來(lái)越大,天然的腸衣制品嚴(yán)重缺乏。研究人員正致力于替代品的開(kāi)發(fā),以膠原蛋白質(zhì)為主要的膠原腸衣本身是營(yíng)養(yǎng)豐富的高蛋白物質(zhì),在熱處理過(guò)程中隨著水分和油脂的蒸發(fā)與溶化,膠原幾乎與肉食品的收縮率一致,而其他的可食用包裝材料還沒(méi)有被發(fā)現(xiàn)具有這種品質(zhì)。另外,膠原蛋白本身具有固定化酶的功能,具有抗氧化性,可以改善食品的風(fēng)味和質(zhì)量。產(chǎn)品應(yīng)力與膠原蛋白含量的多少成正比,而應(yīng)變則成反比。膠原蛋白是人體骨骼,尤其是軟骨組織中的重要組成成分。膠原蛋白就像骨骼中的一張充滿小洞的網(wǎng),它會(huì)牢牢地留住就要流失的鈣質(zhì)。沒(méi)有這張充滿小洞的網(wǎng),即便是補(bǔ)充了過(guò)量的鈣,也會(huì)白白地流失掉。而膠原蛋白的特征氨基酸羥基脯氨酸是血漿中運(yùn)輸鈣到骨細(xì)胞的工具。骨細(xì)胞中的骨膠原是羥基磷灰石的黏合劑,它與羥基磷灰石共同構(gòu)成了骨骼的主體。而骨質(zhì)疏松的實(shí)質(zhì)是合成骨膠原的速度跟不上需要,換言之,新的骨膠原的生成速度低于老的骨膠原發(fā)生變異或老化速度。研究表明,如果缺少膠原蛋白,補(bǔ)充再多的鈣質(zhì)也無(wú)法防止骨質(zhì)疏松,因此,只有攝入足夠的可與鈣結(jié)合的膠原蛋白,才能使鈣在體內(nèi)被較快消化吸收,且能較快的達(dá)到骨骼部位而沉積。 這些食物中的膠原蛋白分子量非常大,極不容易被人體吸收。
膠原的相對(duì)分子質(zhì)量大,電泳圖有3條泳帶,在100kD附近出現(xiàn)的2條泳帶分別是膠原分子的α1鏈和α2鏈,在200kD附近出現(xiàn)的1條泳帶是膠原分子的β鏈。即膠原的每條多肽鏈相對(duì)分子質(zhì)量可達(dá)100kD,1個(gè)膠原分子相對(duì)分子質(zhì)量為300kD。多肽分子量的測(cè)定方法常用SDS-PAGE,凝膠色譜法以及質(zhì)譜法。有人采用凝膠過(guò)濾色譜法測(cè)定脫鉻革屑中膠原水解產(chǎn)物分子量分布在。飛行時(shí)間質(zhì)譜法測(cè)定比目魚(yú)皮膠原寡肽分子量的分布主要集中在~。動(dòng)物蛋白酶水解后的膠原多肽的分子量在2~7kD,比植物蛋白酶水解的膠原多肽分子量范圍更廣。膠原的熱穩(wěn)定性是指測(cè)定其在水系中纖維的熱收縮溫度(Ts),或溶液中分子的熱變性溫度(Td)。Ts和Td之差一般在20~25℃,而Ts值較Td值容易測(cè)定。Td還可以表示膠原螺旋被破壞的溫度,另外還與其亞氨基酸(脯氨酸和羥脯氨酸)的含量有關(guān),尤其是羥脯氨酸含量,它們之間存在正相關(guān),冷水性魚(yú)類的羥脯氨酸含量比較低,所以冷水性魚(yú)類膠原蛋白Td值明顯低于暖水性魚(yú)類,而又都低于陸生動(dòng)物。但魚(yú)皮膠原蛋白與魚(yú)肉膠原蛋白相比,其真皮的Td要比肌肉的低1℃左右,這與肌肉膠原中脯氨酸的羥基化率較真皮膠原高有關(guān)。有人測(cè)定了多種魚(yú)皮可溶性膠原蛋白的氨基酸組成。 采用酶法提取膠原蛋白及其多肽的研究主要是從動(dòng)物皮及其加工副產(chǎn)物中。湖北膠原蛋白液體飲品
采用不同濃度的氯化鈉對(duì)提取的膠原蛋白進(jìn)行鹽析處理,可以沉淀出不同類型的膠原蛋白。江西魚(yú)膠原蛋白廠家
不同分子量分布膠原蛋白溶液的黏度與溶質(zhì)濃度、溶劑、pH、溫度和外加電解質(zhì)有關(guān)。在等電點(diǎn)時(shí)膠原蛋白溶液的黏度比較低,pH值低于或高于等電點(diǎn)時(shí),膠原蛋白及多肽均將帶一定電荷,溶液的黏度相應(yīng)增大,離等電點(diǎn)越遠(yuǎn),溶液的黏度越大;不同分子量分布膠原蛋白及多肽溶液的黏度均隨溫度升高而下降。膠原蛋白分子量越大,濃度越大,溶液的黏度越高,高分子量膠原蛋白溶液的黏度隨濃度增加呈指數(shù)上升,而低分子量膠原蛋白溶液的黏度則隨濃度增加近似直線上升;在膠原蛋白及多肽溶液中加入電解質(zhì)會(huì)導(dǎo)致其黏度明顯上升。膠原蛋白的水解產(chǎn)物含有多種氨基酸,其中以甘氨酸較為豐富。其次為丙氨酸、谷氨酸和精氨酸,半胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及蛋氨酸等必需氨基酸含量低,因此,膠原蛋白屬不完全蛋白質(zhì)。水解豬皮膠原所得的肽類產(chǎn)物中含有19種氨基酸,其中包括7種成人必需氨基酸和2種幼兒必需的半必需氨基酸;而且氨基酸總量高達(dá)90%以上。在八種人體必需氨基酸中含有六種:異亮氨酸(Ile)為,亮氨酸(Leu)和苯丙氨酸(Phe)為,纈氨酸(Val),蘇氨酸(Thr)為,賴氨酸(Lys)為。 江西魚(yú)膠原蛋白廠家
海南省華上生物科技有限公司專注技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)品研發(fā),發(fā)展規(guī)模團(tuán)隊(duì)不斷壯大。一批專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì),是實(shí)現(xiàn)企業(yè)戰(zhàn)略目標(biāo)的基礎(chǔ),是企業(yè)持續(xù)發(fā)展的動(dòng)力。公司業(yè)務(wù)范圍主要包括:膠原蛋白肽,酵素蛋白肽,蠶蛹牡蠣肽等。公司奉行顧客至上、質(zhì)量為本的經(jīng)營(yíng)宗旨,深受客戶好評(píng)。公司憑著雄厚的技術(shù)力量、飽滿的工作態(tài)度、扎實(shí)的工作作風(fēng)、良好的職業(yè)道德,樹(shù)立了良好的膠原蛋白肽,酵素蛋白肽,蠶蛹牡蠣肽形象,贏得了社會(huì)各界的信任和認(rèn)可。