天然高分子材料中相當(dāng)有代表性的是天然蛋白質(zhì)和天然多糖,多糖主要有軟骨素、HA(透明質(zhì)酸)、殼聚糖、肝素等,多糖復(fù)合材料比較集中于可吸收性外科縫線、藥物釋放的載體、皮膚替代物、透析膜、止血?jiǎng)?、醫(yī)用引導(dǎo)組織再生材料、骨替代材料、組織培養(yǎng)系統(tǒng)的支架。膠原作為醫(yī)用生物材料,較重要的特點(diǎn)在于其低免疫原性,與其它具有免疫原性的蛋白質(zhì)相比,膠原蛋白的免疫原性非常低。人們甚至曾認(rèn)為膠原不具有抗原性,研究表明:膠原具有低免疫原性,不含端肽時(shí)免疫原性尤其低。采用酶法提取膠原蛋白及其多肽的研究主要是從動(dòng)物皮及其加工副產(chǎn)物中。湖北海鯛魚膠原蛋白功效和作用
有人以豬骨為原料,用蛋白酶的酶解反應(yīng)代替?zhèn)鹘y(tǒng)制膠工藝,對(duì)骨膠原的酶解反應(yīng)與酶法制膠工藝進(jìn)行了試驗(yàn)研究。結(jié)果表明:以胃蛋白酶對(duì)骨膠原的提取率比較高(),其次是胰蛋白酶(),接下來(lái)是中性蛋白酶(),現(xiàn)在是堿性蛋白酶()。并且通過單因素和正交試驗(yàn)對(duì)胃蛋白酶酶解反應(yīng)中各主要影響因素進(jìn)行了優(yōu)化。試驗(yàn)結(jié)果表明,胃蛋白酶提取的比較好條件是,胃蛋白酶的濃度是1%,在,然后在濃度為10%(w/v)的NaCL溶液中鹽析24h,現(xiàn)在骨膠原的回收率為,骨膠原的提取率為。還有人用胃蛋白酶提取豬皮膠原蛋白,分別在水解0、2、6、10、14、18、22、26h時(shí)對(duì)四種不同胃蛋白酶用量(分別為1%、2%、、3%)的試樣取樣檢測(cè),采用一階HILL方程模擬胃蛋白酶提取豬皮膠原蛋白的進(jìn)程以及胃蛋白酶水解速率的衰減過程,現(xiàn)在得出2%的胃蛋白酶用量和6-7h的水解時(shí)間提取率比較大。還有人用以新鮮豬皮為原料,在50-52℃的條件下用胰酶進(jìn)行水解,在酶用量為5000:1~10000:1,pH值為9,反應(yīng)2-3h,原料:水為1:2的條件下酶解。結(jié)果表明:總蛋白質(zhì)的提取率≥80%。 河北口服膠原蛋白原料廠家膠原蛋白是一類蛋白質(zhì)家族,已至少發(fā)現(xiàn)了30余種膠原蛋白鏈的編碼基因。
一般是白色、透明的粉狀物,分子呈細(xì)長(zhǎng)的棒狀,相對(duì)分子質(zhì)量從約2kD至300kD不等。膠原蛋白具有很強(qiáng)的延伸力,不溶于冷水、稀酸、稀堿溶液,具有良好的保水性和乳化性。膠原蛋白不易被一般的蛋白酶水解,但能被動(dòng)物膠原酶斷裂,斷裂的碎片自動(dòng)變性,可被普通蛋白酶水解。當(dāng)環(huán)境pH為酸性時(shí),膠原的變性溫度為38~39℃。[42]膠原蛋白紅外光譜圖冊(cè)參考資料。膠原蛋白DSC圖譜膠原蛋白是一種兩性電解質(zhì),這取決于兩個(gè)因素,其一,膠原每個(gè)肽鏈具有許多酸性或堿性的側(cè)基;其二,每個(gè)肽鏈的兩端有α-羧基和α-氨基,都具有接受或給予質(zhì)子的能力,它們可在特定的pH值范圍內(nèi),解離產(chǎn)生正電荷或負(fù)電荷,換句話說,隨著介質(zhì)的pH值,不同膠原即成為帶有許多正電荷或負(fù)電荷的離子。膠原肽鏈側(cè)基的pKa值與其組成氨基酸側(cè)基的pKa值略有不同,這是由于在蛋白質(zhì)分子中受到鄰近電荷的影響所造成的。等電點(diǎn)是,呈現(xiàn)出偏堿性,因?yàn)槟z原的肽鏈中堿性氨基酸比酸性氨基酸多一點(diǎn)。由于是高分子,在水溶液中具有膠體性質(zhì)和一定粘度,粘度在等電點(diǎn)時(shí)比較低,而且溫度越低,粘度越大。
相對(duì)于較大分子膠原蛋白而言,膠原三肽更能有效的服務(wù)于人類的健康與美麗。膠原三肽主要具有以下功能:修復(fù):膠原三肽能直接滲入肌膚底層,且與周圍組織的親和性好,可協(xié)助細(xì)胞制造成膠原蛋白,促使皮膚細(xì)胞正常成長(zhǎng)。營(yíng)養(yǎng):膠原三肽對(duì)皮膚的滲透性強(qiáng),可透過角質(zhì)層與皮膚上皮細(xì)胞結(jié)合,參與和改善皮膚細(xì)胞的代謝,使皮膚中的膠原蛋白活性加強(qiáng)。它能保持角質(zhì)層水分及纖維結(jié)構(gòu)的完整性,改善皮膚細(xì)胞生存環(huán)境和促進(jìn)皮膚組織的新陳代謝,增強(qiáng)血液循環(huán),達(dá)到滋潤(rùn)皮膚的目的。豐。xiong:膠原三肽中獨(dú)有的羥脯氨酸具有收緊結(jié)締組織的作用,能使松弛的組織緊實(shí)、承托起下垂的乳房,使乳房挺拔、豐滿、富有彈性。膠原蛋白保持角質(zhì)層水分及纖維結(jié)構(gòu)的完整性,改善皮膚細(xì)胞生存環(huán)境和促進(jìn)皮膚組織的新陳代謝。
酶法提取是指可溶性膠原和酸溶性膠原被提取后,需用一些蛋白酶,如膠原酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰凝乳蛋白酶等水解,得到不同的酶促溶性膠原蛋白。所使用的蛋白酶主要分3種:動(dòng)物蛋白酶(如胰蛋白酶,胃蛋白酶),植物蛋白酶(如木瓜蛋白酶,菠蘿蛋白酶),微生物蛋白酶(如堿性蛋白酶,中性蛋白酶)。在對(duì)酶法水解膠原蛋白的研究中,以堿性蛋白酶應(yīng)用較多。將膠原進(jìn)行限制性降解,即將末端肽切割下來(lái),由于膠原肽鏈間的共價(jià)鍵都是通過分子末端肽里的賴氨酸或羥賴氨酸的相互作用形成的,末端肽被切下后,含三螺旋結(jié)構(gòu)的主體部分可溶于稀有機(jī)酸而被提取出來(lái)。用酶處理,可以水解掉膠原纖維蛋白的末端肽,提高膠原蛋白的產(chǎn)率;而且還不會(huì)破壞膠原蛋白的三股螺旋結(jié)構(gòu),保持其特性。影響酶提取的因素有很多,如酶濃度、酶與底物的比例、酶解時(shí)間、酶解溫度、pH值以及料液比等。在實(shí)際操作中,大多數(shù)采用酶復(fù)合法提取膠原蛋白,較多的是使用胃蛋白酶提取,有機(jī)酸多為乙酸。 羥脯氨酸殘基可通過形成分子內(nèi)氫鍵穩(wěn)定膠原蛋白分子。上海小分子膠原蛋白肽廠家
在這些酶的較適作用溫度下提取可能會(huì)破壞膠原蛋白的某些功能特性和生物活性。湖北海鯛魚膠原蛋白功效和作用
酸法提取是利用一定濃度的酸溶液在一定的條件下提取膠原蛋白,主要采用低離子濃度酸性條件破壞分子間鹽鍵和希夫堿,而引起纖維膨脹、溶解,采用酸法提取的膠原蛋白通常成為酸溶性膠原蛋白。酸溶解法可將沒有交聯(lián)的膠原分子溶解出來(lái),也可溶解含有醛胺類交聯(lián)鍵的膠原纖維,然后釋放到溶劑中。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法,用低溫酸法提取的膠原很大程度的保持了其三螺旋結(jié)構(gòu),適用于醫(yī)用生物材料及原料的制備。通常的做法是將適當(dāng)濃度的酸液按一定料液比加入到經(jīng)過預(yù)處理的骨粉中,于0~25℃攪拌提取一定時(shí)間。在采用酸法進(jìn)行膠原蛋白的提取時(shí),注意提取溫度不宜過高,以免膠原蛋白的生物活性發(fā)生破壞。取樣經(jīng)前處理后,勻漿在低溫下用酸浸提,離心即可得酸溶性膠原蛋白(acid-solublecollagen,ASC)。作為溶劑使用的酸,主要有鹽酸、磷酸、甲酸、乙酸、蘋果酸、檸檬酸等,但大多數(shù)研究集中于乙酸抽提,像MariaSadowska等用,其提取率略低于乙酸提取。檸檬酸因不產(chǎn)生顏色和異味得以比較廣使用于食品工業(yè)的膠原蛋白的提取。 湖北海鯛魚膠原蛋白功效和作用
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