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所以,若想提取結(jié)構(gòu)完整、使用安全的膠原蛋白,很少采用此方法。有關(guān)單獨(dú)采用堿法提取膠原蛋白的報(bào)道不多,一般是堿法提取和酸法提法結(jié)合使用。比如在4℃條件下,魚骨用0.1moL/L的NaOH浸泡6h,再用2.5%NaCl浸泡6h去除雜蛋白,用10%的異丙醇溶液去除脂肪,0.1moL/L的檸檬酸浸泡3d,現(xiàn)在得到無色無味的膠原蛋白,提取率為11.87%。注意,無論酸法或堿法,均可有效地提取膠原蛋白,有人分別采用醋酸-鹽酸的混合酸液(pH3.0)和NaOH溶液(pH12.0)提取骨膠原蛋白,提取率基本相當(dāng)。但是,這兩種方法提取膠原蛋白不僅容易影響膠原蛋白的生物活性,而且提取后產(chǎn)生的酸性或堿性廢液必須進(jìn)行適當(dāng)處理,以避免對環(huán)境造成污染。溫度過高會引起酶的失活和膠原蛋白的變性。北京海參膠原蛋白液體飲品
膠原蛋白的熱變性溫度可以通過測定膠原蛋白溶液增比黏度的變化來確定。其方法是將膠原蛋白樣品溶于一定量的緩沖溶液中,并配制成一定濃度的溶液,然后用烏式黏度計(jì)測量溶液在一定溫度區(qū)間內(nèi)保持一定時間后的增比黏度,以增比黏度對溫度作圖,當(dāng)增比黏度變化50%時所對應(yīng)的溫度即為熱變性溫度。熱變性溫度還可通過拉曼光譜和差示掃描量熱法等進(jìn)行測定。有人測得鱸魚、鯽魚和鳙魚魚皮膠原蛋白的熱變性溫度分別為25、27和30℃,它們的棲息水溫分別為26~27、29和32℃,亞氨基酸含量分別為、,與3種魚皮膠原的熱變性溫度相吻合Ⅱ型膠原和Ⅺ型膠原Ⅱ型膠原由三條α1肽鏈組成,即[α1(Ⅱ)]3,富含羥賴氨酸,并且糖化率高,含糖量可達(dá)4%,是軟骨中的主要膠原。另外,即使同一生物,皮和骨膠原蛋白的熱變形溫度也可能不一,像來自日本海鱸、鮐魚、大頭鯊和眼斑鲀的皮膠原蛋白的變性溫度為℃,而骨膠原蛋白的變性溫度則為℃。附帶結(jié)論是骨膠原蛋白的變性溫度范圍整體上比皮膠原蛋白的變性溫度范圍要高。而且骨膠原蛋白和皮膠原蛋白在不同pH時的溶解度不同。這表明皮和骨膠原蛋白的分子特性和構(gòu)型存在差異。 北京膠原蛋白肽口服液鹽法提取是利用各種不同的鹽在不同的濃度條件下提取鹽溶性膠原蛋白的方法。
堿法提取即利用一定濃度的堿在一定的外界條件下提取膠原蛋白,堿處理法中常用的處理劑為石灰、氫氧化鈉、碳酸鈉等,用氫氧化鈉浸提時效果較好。一般的是把樣品勻漿后,用堿溶液多次溶脹后,再離心提取。但由于易引起蛋白質(zhì)變性,如膠原肽鍵水解,含羥基、疏基的氨基酸全部被破壞;所得產(chǎn)物等電點(diǎn)pH值較低,天冬酞胺和谷氨酞胺分別轉(zhuǎn)變?yōu)樘於彼岷凸劝彼幔玫降乃猱a(chǎn)物分子量較在酸性溶液中比低等問題,若比較嚴(yán)重的話,還會產(chǎn)生D、L-型氨基酸消旋混合物,若D型氨基酸含量高過L型氨基酸,則會抑制L-型氨基酸的吸收,有些D型氨基酸有毒,甚至有致ai、致畸和致突變的作用。而且堿法提取的含量較低,用氫氧化鈉從魷魚皮中提取堿溶性膠原蛋白,其得率只有3%(以濕基計(jì))。所以,若想提取結(jié)構(gòu)完整、使用安全的膠原蛋白,很少采用此方法。有關(guān)單獨(dú)采用堿法提取膠原蛋白的報(bào)道不多,一般是堿法提取和酸法提法結(jié)合使用。比如在4℃條件下,魚骨用,再用,用10%的異丙醇溶液去除脂肪,,現(xiàn)在得到無色無味的膠原蛋白,提取率為。
膠原蛋白就好比一鍋才煮了一會兒的奶白色雞湯,待一段時間后,又變?yōu)榍鍦?,現(xiàn)在煮成一鍋高湯,就如膠原蛋白被不斷分解后,現(xiàn)在分解成為較小的氨基酸,氨基酸分子進(jìn)入人體后,合成膠原蛋白,較終被人體吸收。膠原三肽的分子量極小,目前全球較小的CTP膠原三肽,CTP膠原三肽的分子量只280道爾頓,是目前全球分子量較小的,與皮膚膠原蛋白相同的基本結(jié)構(gòu),無需分解,能夠被皮膚直接吸收,吸收率高達(dá)99%,是普通膠原蛋白的36倍。在我們?nèi)粘I钪?,我們會觀察到下面的現(xiàn)象,它們很好的解釋了膠原蛋白、多肽、氨基酸之間的關(guān)系。膠原蛋白質(zhì)為主要的膠原腸衣本身是營養(yǎng)豐富的高蛋白物質(zhì)。
海南省華上生物科技有限公司,是一家專業(yè)從事生產(chǎn)加工膠原蛋白肽的企業(yè)。公司可以生產(chǎn)加工魚膠原蛋白肽、深海魚低聚肽、牛骨髓肽、大豆肽、牡蠣肽、蠶蛹肽、豌豆肽等等膠原蛋白肽制品。公司秉承“用效果說話、用口碑經(jīng)營”的宗旨,用質(zhì)量的產(chǎn)品給消費(fèi)者以信賴,用質(zhì)量的服務(wù)給消費(fèi)者以安心,為人類的健康美麗保駕護(hù)航。海南省華上生物科技有限公司旗下生產(chǎn)的膠原蛋白肽系列產(chǎn)品中,以膠原三肽(固體飲料)為表示的重點(diǎn)產(chǎn)品。膠原三肽,原料是由豬皮、魚皮,通過先進(jìn)的生物工程技術(shù)制備而成的膠原蛋白較小結(jié)構(gòu)單位,是一種含有甘氨酸、脯氨酸(或羥脯氨酸)外加一個其他氨基酸的三肽。簡單的說,膠原三肽其實(shí)就是利用先進(jìn)的生物工程技術(shù)截取大的膠原蛋白分子中的對皮膚有用的小分子結(jié)構(gòu)。其結(jié)構(gòu)可以簡單的表示為Gly-x-y。其平均分子量為280道爾頓,由于膠原三肽的分子量很小,因而能夠被人體充分吸收,與此同時,膠原三肽還能夠極有效的滲入角質(zhì)層,真皮層和頭發(fā)根部細(xì)胞內(nèi)。 在這些酶的較適作用溫度下提取可能會破壞膠原蛋白的某些功能特性和生物活性。山東深海鱈魚膠原蛋白原液
膠原蛋白是一類蛋白質(zhì)家族,已至少發(fā)現(xiàn)了30余種膠原蛋白鏈的編碼基因。北京海參膠原蛋白液體飲品
預(yù)處理除膠原蛋白外,動物骨中還含有油脂、多種礦物質(zhì)和其他雜質(zhì),因此在被用于提取膠原蛋白之前必須進(jìn)行預(yù)處理。先剔除動物骨上殘留的肉質(zhì)和肌腱等雜物,粉碎后用正丁醇或正己烷萃取出骨油。現(xiàn)在除去骨中無機(jī)物以提高膠原蛋白的得率。除去骨中的礦物質(zhì)可用稀酸或EDTA溶液。有人用原料用5倍質(zhì)量的,用正乙烷脫脂后再用胃蛋白酶酶解,在加酶量150U/g,pH值,37℃條件下處理120min,然后在固液比1∶6的情況下抽提5h,在此條件下,提取率可達(dá)18%;還有人用EDTA溶液()浸泡骨料5d,可有效脫去骨料中的羥基磷灰石。[87-89]膠原蛋白的提取一般有三種方法:一是高壓輔助的物理方法;二是用溶劑預(yù)處理結(jié)合低溫或熱水抽提的化學(xué)方法,根據(jù)溶劑的不同,可分為熱水浸提法、酸法、堿法、鹽法;三是用酶的生物化學(xué)法。一般來說,高壓輔助和熱水抽提針對明膠的提取,而低溫抽提和酶法針對膠原的提取,但其基本原理都是根據(jù)膠原蛋白的特性改變蛋白質(zhì)所在的外界環(huán)境,把膠原蛋白從其他蛋白質(zhì)中分離出來。 北京海參膠原蛋白液體飲品
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