安徽IgGZEROIdeS蛋白酶

Genovis的FabRICATOR（IdeS）酶 可用于 IgG 的所有人類亞類以及人源化和嵌合 IgG。該酶對(duì)其他物種的 IgG 也有活性，包括來(lái)自大鼠、猴子、兔子和綿羊的某些類別的 IgG。因此，F(xiàn)abRICATOR的高特異性在某些情況下會(huì)使其對(duì)鉸鏈區(qū)域的突變敏感，并損害酶活性。來(lái)自小鼠 IgG2a 和 IgG3 的片段可以由 FabRICATOR Z 生成，與 FabRICATOR 相比，F(xiàn)abRICATOR Z 在消化這些 IgG 方面具有更高的效率。然而，小鼠 IgG1 在鉸鏈下方具有不同的序列，并且不被 FabRICATOR Z 消化。對(duì)于這種抗體種類，F(xiàn)abULOUS 和 FabULOUS Fab 試劑盒可用于制備 Fab 片段。Genovis的FabULOUS來(lái)源于化膿性鏈球菌，在大腸桿菌中表達(dá)，分子量為 29 kDa，該酶含有 His 標(biāo)簽。安徽IgGZEROIdeS蛋白酶

Genovis提供色譜柱形式的FabRICATOR（IdeS）酶，是在鉸鏈下方對(duì)IgG進(jìn)行柱上消化的固定化酶。Genovis的FabRICATOR（IdeS）是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶，可消化鉸鏈下方單個(gè)氨基酸位點(diǎn)的抗體，產(chǎn)生均質(zhì)的F（ab'）2和Fc片段。酶解后，可以使用反相HPLC、質(zhì)譜或其他分析方法分析片段?？贵w消化和亞基生成的自動(dòng)化使生物反應(yīng)器的在線監(jiān)測(cè)應(yīng)用成為可能，例如，作為2D-LC-MS設(shè)置的一部分，將反應(yīng)器直接耦合到MS。這種自動(dòng)化的抗體亞基分析方法減少了操作人員的時(shí)間、樣品處理時(shí)間并提高了通量。山西GlySERIASIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶zhiliao性抗體和基于IgG的生物制藥的結(jié)構(gòu)表征和監(jiān)測(cè)關(guān)鍵質(zhì)量屬性。

與IdeS不同，為了獲得更均勻的度拉糖肽融合蛋白的消化產(chǎn)物，用Genovis的GlySERIAS固定化蛋白質(zhì)消化該蛋白質(zhì)，該蛋白由與瓊脂糖珠共價(jià)偶聯(lián)的GlySERIAS酶組成。通過將酶偶聯(lián)到樹脂上，可以增加酶與蛋白質(zhì)的比率，從而可以進(jìn)一步加速反應(yīng)，以獲得更完整的連接子消化。此外，該酶不會(huì)存在于樣品制備中，可能會(huì)干擾樣品分析。為了進(jìn)行比較，度拉糖肽在37°C下用GlySERIAS固定化過夜，或用GlySERIAS凍干1小時(shí)并在37°C下過夜消化。 為了降低樣品復(fù)雜性，使用內(nèi)切糖苷酶GlycINATOR凍干去除Fc聚糖，并減少鏈間二硫鍵。通過反相LC-MS對(duì)樣品的分析表明，GlySERIAS Immobilized幾乎完全消化了Fc結(jié)構(gòu)域中的連接子，留下了接近均質(zhì)的Fc/2產(chǎn)物，其中含有來(lái)自連接子的一個(gè)絲氨酸殘基。用 GlySERIAS 凍干 1 小時(shí)或過夜消化，兩者都會(huì)產(chǎn)生幾種 Fc 產(chǎn)物，并附著不同數(shù)量的絲氨酸和甘氨酸殘基。GLP-1肽在所有三個(gè)樣品中以兩種變體存在。使用GlySERIAS固定化消化的均質(zhì)Fc/2能夠詳細(xì)研究特定于Fc區(qū)域的質(zhì)量屬性。此外，在樣品中未觀察到干擾分析的酶峰。作為補(bǔ)充，F(xiàn)c/2 產(chǎn)物在用 GlySERIAS 凍干消化后殘留部分連接子，有助于研究位于 GS 連接子的修飾。

與IdeS不同，Genovis的IgMBRAZOR是一種獨(dú)特的IgM特異性蛋白酶，可在重鏈中CH2結(jié)構(gòu)域下方的一個(gè)特定位點(diǎn)消化人IgM，產(chǎn)生均質(zhì)的F（ab'）2和Fc片段。該酶能夠?qū)?fù)雜和高分子量的人IgM進(jìn)行中級(jí)分析，從而促進(jìn)疫苗、zhiliao和診斷等過程中的IgM表征。獨(dú)特-可實(shí)現(xiàn)IgM的中級(jí)表征和質(zhì)量控制；快速–在30分鐘內(nèi)生成均勻的F（ab'）2和Fc片段；高度特異性–人IgM重鏈中的一個(gè)消化位點(diǎn)。IgMBRAZOR是一種獨(dú)特的IgM特異性酶，可在重鏈中CH2結(jié)構(gòu)域下方的一個(gè)特定位點(diǎn)消化人IgM，產(chǎn)生F（ab'）2和Fc片段。消化在30分鐘內(nèi)完成，并且由于酶的特異性，如果孵育時(shí)間延長(zhǎng)，則不存在過度消化的風(fēng)險(xiǎn)。該酶在pH值為5.5至9.0時(shí)具有活性，不需要還原條件或輔助因子即可發(fā)揮活性。良好的活性是在37°C下，但也可以在室溫下使用增加孵育時(shí)間進(jìn)行消化。IgMBRAZOR在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有His標(biāo)簽，分子量為38kDa。自動(dòng)抗體亞基分析可減少操作人員的時(shí)間和樣品處理錯(cuò)誤的風(fēng)險(xiǎn)，并提高通量。

在Genovis，我們的策略是幫助客戶進(jìn)行中級(jí)（或亞基）分析，這是我們的工作，特別是我們的蛋白質(zhì)酶切產(chǎn)品。完整質(zhì)量和肽圖譜是蛋白質(zhì)表征的常用方法，我們發(fā)現(xiàn)，與簡(jiǎn)單但信息有限的完整質(zhì)量和高度復(fù)雜但信息豐富的肽圖譜相比，中級(jí)方法具有優(yōu)勢(shì)。通過執(zhí)行中級(jí)描述，您可以生成從完整的質(zhì)量實(shí)驗(yàn)中獲得的所有信息，具有額外的優(yōu)勢(shì)。在對(duì)抗體進(jìn)行完整質(zhì)量分析時(shí)，很難明確地識(shí)別某些修飾。質(zhì)譜儀器正在改進(jìn)，可以更有效地分析更大的分子，但通過使用我們的SmartEnzymes，如IdeS，可以將抗體分解成更小的片段，這提高了這些實(shí)驗(yàn)可以執(zhí)行的分辨率，因此，增加了鑒定修飾的信心。此外，你不僅能夠更好地識(shí)別修改，而且你能夠?qū)⑺鼈兌ㄎ坏降鞍踪|(zhì)上的單個(gè)結(jié)構(gòu)域，這是你在完整水平上無(wú)法做到的。IgASAP酶是獨(dú)特的酶促工具，可實(shí)現(xiàn) IgA 的中級(jí)表征和質(zhì)量控制，用于疫苗診斷的開發(fā)過程。遼寧GlySERIASIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

Genovis的FabRICATOR（IdeS）酶將ADC（基于 IgG）消化成其亞基，用于表征這類復(fù)雜的藥物。安徽IgGZEROIdeS蛋白酶

與IdeS不同，Genovis的GingisKHAN（Kgp）是一種半胱氨酸蛋白酶，可在鉸鏈上方的單個(gè)位點(diǎn)（KSCDK/THTCPPC）消化人IgG1，產(chǎn)生完整且均質(zhì)的Fab和Fc片段。GingisKHAN是一種賴氨酸特異性蛋白酶。單一的消化位點(diǎn)是人IgG1三維結(jié)構(gòu)的結(jié)果，使這種賴氨酸暴露于酶中。如果去除N-聚糖，則Fc上暴露的賴氨酸處可能會(huì)出現(xiàn)額外的消化位點(diǎn)。GingisKHAN需要溫和的還原條件才能具有活性，并且在37°C和pH8下獲得活性。還原劑（2mM半胱氨酸）與酶一起提供。GingisKHAN是從牙齦卟啉單胞菌中純化的。該酶用于使用LC-MS表征基于抗體的生物zhiliao藥物，研究Fc聚糖分析、雙特異性抗體、親和力和親和力效應(yīng)，并鑒定翻譯后修飾。安徽IgGZEROIdeS蛋白酶