圖6為本實(shí)用新型的細(xì)胞外泌體優(yōu)化培養(yǎng)系統(tǒng)的微流控芯片體在另一種實(shí)施方式下的示意圖;圖7為本實(shí)用新型的細(xì)胞外泌體優(yōu)化培養(yǎng)系統(tǒng)的pdms形變膜在未變形狀態(tài)下的細(xì)胞的示意圖;圖8為本實(shí)用新型的細(xì)胞外泌體優(yōu)化培養(yǎng)系統(tǒng)的pdms形變膜在變形狀態(tài)下的細(xì)胞的示意圖;圖9為采用本實(shí)用新型的細(xì)胞外泌體優(yōu)化培養(yǎng)系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)胞外泌體優(yōu)化培養(yǎng)方法中pdms膜輸注液體時(shí)鼓起的高度與細(xì)胞所受牽張力大小的關(guān)系圖;圖10至圖21為以軟骨細(xì)胞為例通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)檢驗(yàn)經(jīng)采用本實(shí)用新型的細(xì)胞外泌體優(yōu)化培養(yǎng)系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)胞外泌體優(yōu)化培養(yǎng)方法下的細(xì)胞分泌的外泌體的具體情況。圖中:微流控芯片體1、微流通道2、進(jìn)液通道201、出液通道202、透明玻璃支承板3、進(jìn)液口5、出液口6、pdms形變膜8、透明蓋板9、遮光條10、進(jìn)液管道11、出液管道12、進(jìn)液電磁控制閥13、出液電磁控制閥15、進(jìn)液控制泵17、出液控制泵18。具體實(shí)施方式為了使本實(shí)用新型的內(nèi)容更容易被清楚地理解,下面根據(jù)具體實(shí)施例并結(jié)合附圖,對(duì)本實(shí)用新型作進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明。請(qǐng)參閱圖1至圖8所示,本實(shí)施例提供了一種細(xì)胞外泌體優(yōu)化培養(yǎng)系統(tǒng),包括:細(xì)胞承載組件、設(shè)于細(xì)胞承載組件頂端面的pdms形變膜8,以及設(shè)于細(xì)胞承載組件底端面的透明蓋板9。做外泌體研究的公司有哪些?高校專(zhuān)業(yè)做外泌體
也不利于流體中的細(xì)胞、蛋白和外泌體與通道中的抗體結(jié)合。因此,急需一種特異性分離外泌體的芯片,高通量、體積小和操作簡(jiǎn)單,為**早期及伴隨診斷提供工具。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:有鑒于此,本發(fā)明的目的之一在于提供一種外泌體分離微流控芯片;本發(fā)明的目的之二在于提供利用所述外泌體分離微流控芯片捕獲外泌體的方法。為達(dá)到上述目的,本發(fā)明提供如下技術(shù)方案:1、外泌體分離微流控芯片,所述芯片包括多個(gè)交錯(cuò)人字型微混合器,每個(gè)shm的人字形凹槽呈周期性地交錯(cuò)排列。推薦的,所述人字型微混合器每個(gè)循環(huán)周期由十個(gè)人字形的不對(duì)稱(chēng)連續(xù)區(qū)域組成。推薦的,所述交錯(cuò)人字型微混合器組成八個(gè)單獨(dú)的人字形微通道,八個(gè)人字形微通道通過(guò)集管與入口連接。推薦的,通道的總高度(h)50μm,凹槽的高度與通道的高度(α)的比率設(shè)定為;v字形和通道軸的夾角(θ)為45°,主波矢量q=2π/100μm。2、利用所述外泌體分離微流控芯片捕獲外泌體的方法,包括如下步驟:在芯片通道內(nèi)包被捕獲抗體,加入體液樣本,用ph為~,收集洗脫液。推薦的,所述洗脫的緩沖液流速為80μl/min。推薦的,所述捕獲抗體的濃度為5~20μg/ml。推薦的,所述外泌體胰腺*血漿外泌體,包被抗體為gpc1抗體。全國(guó)做外泌體膜染料翌科生物做外泌體檢測(cè)服務(wù)嗎?
術(shù)語(yǔ)“中心”、“上”、“下”、“左”、“右”、“豎直”、“水平”、“內(nèi)”、“外”等指示的方位或位置關(guān)系為基于附圖所示的方位或位置關(guān)系,或者是該實(shí)用新型產(chǎn)品使用時(shí)慣常擺放的方位或位置關(guān)系,只是為了便于描述本實(shí)用新型和簡(jiǎn)化描述,而不是指示或暗示所指的裝置或元件必須具有特定的方位、以特定的方位構(gòu)造和操作,因此不能理解為對(duì)本實(shí)用新型的限制。此外,術(shù)語(yǔ)“***”、“第二”、“第三”等只用于區(qū)分描述,而不能理解為指示或暗示相對(duì)重要性。此外,術(shù)語(yǔ)“水平”、“豎直”、“懸垂”等術(shù)語(yǔ)并不表示要求部件相對(duì)水平或懸垂,而是可以稍微傾斜。如“水平”只只是指其方向相對(duì)“豎直”而言更加水平,并不是表示該結(jié)構(gòu)一定要完全水平,而是可以稍微傾斜。在本實(shí)用新型中,除非另有明確的規(guī)定和限定,***特征在第二特征之上或之下可以包括***和第二特征直接接觸,也可以包括***和第二特征不是直接接觸而是通過(guò)它們之間的另外的特征接觸。而且,***特征在第二特征之上、上方和上面包括***特征在第二特征正上方和斜上方,或只只表示***特征水平高度高于第二特征。***特征在第二特征之下、下方和下面包括***特征在第二特征正下方和斜下方。
細(xì)胞受到10%-40%的牽張力時(shí)更合適。牽張力過(guò)小則效果不明顯;牽張力過(guò)大,容易損傷細(xì)胞結(jié)構(gòu),本實(shí)施例根據(jù)實(shí)驗(yàn)確定當(dāng)pdms形變膜8向背離透明玻璃支承板3一側(cè)凸起變形的高度h范圍為~,細(xì)胞所受到的牽張力為10%-40%。此處需要特別說(shuō)明的是,不管微流通道2的形狀和具體的規(guī)格大小如何設(shè)置,均可以通過(guò)調(diào)整進(jìn)液電磁控制閥13和出液電磁控制閥15的開(kāi)閉時(shí)間,由兩者開(kāi)閉時(shí)間的調(diào)控來(lái)實(shí)現(xiàn)微流通道2內(nèi)液體的流通量,以此來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)于pdms形變膜8受到微流通道2內(nèi)的液體的壓力而產(chǎn)生的相對(duì)于微流控芯片體1凸起的高度的調(diào)整,使得pdms形變膜8向背離透明玻璃支承板3一側(cè)凸起變形的高度h范圍控制在~。需要加以說(shuō)明的是,采用本實(shí)施例的細(xì)胞外泌體優(yōu)化優(yōu)化培養(yǎng)方法對(duì)于細(xì)胞分泌的外泌體具體的“優(yōu)化”不僅表現(xiàn)在提高外泌體的產(chǎn)量,還表現(xiàn)在于提高外泌體的生物學(xué)質(zhì)量。以軟骨細(xì)胞為例通過(guò)下列實(shí)驗(yàn)來(lái)檢驗(yàn)經(jīng)本實(shí)施例的細(xì)胞外泌體優(yōu)化優(yōu)化培養(yǎng)方法下的細(xì)胞分泌的外泌體的具體情況:(1)請(qǐng)參閱圖10所示的對(duì)外泌體的鑒定,分別檢測(cè)在對(duì)應(yīng)2d培養(yǎng)組、3d培養(yǎng)組和本實(shí)施例的3d配合應(yīng)力刺激的培養(yǎng)組的細(xì)胞分泌的外泌體粒徑圖,具體為:三組外泌體粒徑珠峰在120nm附近,正常外泌體直徑范圍為50-200nm。翌科生物的外泌體提取做的怎么樣?
外泌體具有由甘油二酸酯、磷脂、甘油磷脂、聚甘油磷脂和高含量的膽固醇和鞘脂組成的脂雙層膜,與質(zhì)膜相比,外泌體膜更具有剛性,使其在外環(huán)境中表現(xiàn)出穩(wěn)定性。其中的一些脂質(zhì)還具有結(jié)構(gòu)外功能,包括在生物發(fā)生過(guò)程中的運(yùn)輸、識(shí)別和內(nèi)化。除結(jié)構(gòu)和運(yùn)輸成分外,外泌體還含有生物活性脂質(zhì),包括前列腺素、脂肪酸和可產(chǎn)生這些脂質(zhì)的活性酶,可與靶細(xì)胞中的外周G蛋白偶聯(lián)受體和核受體相互作用。當(dāng)外泌體在1980年***被發(fā)現(xiàn)后,其被認(rèn)為是細(xì)胞排泄廢物的一種方式,如今隨著大量對(duì)其生物來(lái)源、其物質(zhì)構(gòu)成及運(yùn)輸、細(xì)胞間信號(hào)的傳導(dǎo)以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能。外泌體的功能取決于其所來(lái)源的細(xì)胞類(lèi)型,其可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化、**侵襲等方方面面。有研究表明**來(lái)源的外泌體參與到腫瘤細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換,從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,促進(jìn)了**的生長(zhǎng)與侵襲。在臨床上,干細(xì)胞外泌體主要***燒傷、燙傷、皮膚潰瘍,再生健康皮膚;用在護(hù)膚方面,主要是對(duì)外傷受損、衰老中毒皮膚進(jìn)行修復(fù),***調(diào)理皮膚、改善膚質(zhì),令肌膚恢復(fù)年輕、健康的狀態(tài)。目前,在外泌體的研究領(lǐng)域中其應(yīng)用潛力已經(jīng)被看到,隨著醫(yī)學(xué)發(fā)展。趕緊告訴你如何選擇一家好的做外泌體的公司 ??!北京高效液相色譜外泌體鑒定
翌科生物是不是專(zhuān)做外泌體檢測(cè)服務(wù),醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn),醫(yī)學(xué)模型構(gòu)建嗎?高校專(zhuān)業(yè)做外泌體
除了RAB蛋白,外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白(包括膜聯(lián)蛋白1、2、4、5、6、7、11等)。外泌體膜上富含參與外泌體運(yùn)輸?shù)乃目缒さ鞍准易?CD63,CD81和CD9))、熱休克蛋白家族((HSP60,HSP70,HSPA5,CCT2和HSP90以及一些細(xì)胞特異性的蛋白包括A33(結(jié)腸上皮細(xì)胞來(lái)源)、MHC-Ⅱ(抗原提呈細(xì)胞來(lái)源)、CD86(抗原提呈細(xì)胞來(lái)源)以及乳凝集素(不成熟的樹(shù)突狀細(xì)胞)。其它一些外泌體中的蛋白包括多種的代謝類(lèi)的酶(數(shù)值DH,烯醇化酶1,醛縮酶1,PKM2,PGK1,PDIA3,GSTP1,DPP4,AHCY,TPL1,抗氧化蛋白,P4HB,LDH,親環(huán)素A,FASN,MDH1和CNP)、核糖體蛋白(RPS3)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子(黑色素瘤分化相關(guān)因子,ARF1,CDC42,人類(lèi)紅細(xì)胞膜整合蛋白,SLC9A3R1)、粘附因子(MFGE8、整合素)、細(xì)胞骨架蛋白以及泛素等。折疊編輯本段提純方式外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法,這是目前外泌體提取更常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,但是純度不足,電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,由于微泡和外泌體沒(méi)有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn),也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過(guò)濾離心,這種操作簡(jiǎn)單、省時(shí),不影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不足的問(wèn)題。高校專(zhuān)業(yè)做外泌體
南京翌科生物科技有限公司是一家翌科生物基于團(tuán)隊(duì)十余年的研發(fā)基礎(chǔ),建立了行業(yè)前端的外泌體與非編碼 RNA 研究和轉(zhuǎn)化平臺(tái)。公司目前擁有豐富的產(chǎn)品線,包括外泌體提取與檢測(cè)試劑、非編碼 RNA 提取與檢測(cè)試劑、轉(zhuǎn)染試劑、microRNA 表達(dá)文庫(kù)、臨床大數(shù)據(jù)庫(kù)及涵蓋分子、細(xì)胞、動(dòng)物的綜合科技服務(wù)等 100 多種試劑和科研外包服務(wù)。公司堅(jiān)持國(guó)產(chǎn)試劑自主研發(fā),服務(wù)全國(guó)各級(jí)高校、研究所、醫(yī)院、第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)、生物醫(yī)藥公司等數(shù)千家客戶(hù)。的公司,是一家集研發(fā)、設(shè)計(jì)、生產(chǎn)和銷(xiāo)售為一體的專(zhuān)業(yè)化公司。翌科生物深耕行業(yè)多年,始終以客戶(hù)的需求為向?qū)В瑸榭蛻?hù)提供***的外泌體提取,非編碼RNA試劑,檢測(cè)試劑,轉(zhuǎn)染試劑。翌科生物不斷開(kāi)拓創(chuàng)新,追求出色,以技術(shù)為先導(dǎo),以產(chǎn)品為平臺(tái),以應(yīng)用為重點(diǎn),以服務(wù)為保證,不斷為客戶(hù)創(chuàng)造更高價(jià)值,提供更優(yōu)服務(wù)。翌科生物始終關(guān)注商務(wù)服務(wù)行業(yè)。滿(mǎn)足市場(chǎng)需求,提高產(chǎn)品價(jià)值,是我們前行的力量。