更為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲,而其所采用不同的熒光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇(發(fā)光類臍菇,Omphalotusolearius)或許多海洋生物都不相同。在螢火蟲中,發(fā)光反應所需的氧氣是從被稱為腹部氣管(abdominaltrachea)的管道中輸入。一些生物,如叩頭蟲,含有多種不同的熒光素酶,能夠催化同一熒光素底物,而發(fā)出不同顏色的熒光。螢火蟲有2000多種,而叩甲總科(包括螢火蟲、叩頭蟲和相關昆蟲)則有更多,因此它們的熒光素酶對于分子系統(tǒng)學研究很有用。目前研究得更透徹的熒光素酶是來自Photinini族螢火蟲中的北美螢火蟲(Photinuspyralis)。免疫熒光法免疫熒光法的基本原理是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素,當與其相對應的抗原或抗體起反應時,在形成的復合物上就帶有一定量的熒光素,在熒光顯微鏡下就可以看見發(fā)出熒光的抗原抗體結合部位,檢測出抗原或抗體。常用的熒光素有①異硫氰酸熒光素(fluoreceinisothiocyante,F(xiàn)ITC),為黃色、橙黃色或褐黃色結晶粉末,有兩種異構體,易溶于水和酒精等溶劑。分子量為389,更大吸收光譜為490~495,更大發(fā)射光譜為520~530urn,呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光,是更常用的標記抗體的熒光素。②四甲基異氰酸羅達明。D-熒光素鉀鹽的測試方法有哪幾種?鹽城ATPD-熒光素鉀鹽公司
短期保存:4℃干燥避光長期保存:-20℃干燥避光母液保存:-20℃避光有效期長期保存:有效期一年工作液:先用現(xiàn)配使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1)用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,配制成30mg/mL的儲存液(100-200×),混勻。立即使用,或分裝于-20℃避光保存,避免反復凍融。2)用預熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度。3)去除細胞培養(yǎng)基。作者:思存鏈接:zhuanlan./p/來源:知乎著作權歸作者所有。商業(yè)轉載請聯(lián)系作者獲得授權,非商業(yè)轉載請注明出處。高斯熒光素酶近年來,其他熒光素酶(例如高斯熒光素酶)的使用有所增加,因為這些報告基因較小,并且不需要ATP的存在。高斯熒光素酶是一種20kD的蛋白質,可通過氧氣催化腔腸素氧化,產(chǎn)生光。來自于海洋足類高斯氏菌的生物發(fā)光酶在表達后可有效地從哺乳動物細胞中分泌出來。Amplite?高斯熒光素酶報告基因檢測試劑盒(#AAT-12530)使用專有的發(fā)光配方來定量細胞培養(yǎng)基中的熒光素酶活性。當該試劑與高斯熒光素酶相互作用時,產(chǎn)sheng發(fā)光產(chǎn)物,該發(fā)光產(chǎn)物提供強發(fā)光。Amplite高斯熒光素酶報告基因測定試劑盒特點:提供了與HTS液體處理儀器兼容的所有基本組件它們具有高靈敏度。連云港熒光素酶編碼基因D-熒光素鉀鹽使用說明做D-熒光素鉀鹽測試價格是多少。
從而實時監(jiān)測疾病發(fā)展狀態(tài)或藥物的***功效等。也可以利用ATP對此反應體系的影響,根據(jù)生物發(fā)光強度的變化來指示能量或生命體征。,PotassiumSalt/D-熒光素鉀鹽分子式:NaC11H7N2O3S2·H2O分子量:g/mol純度:高級純()應用:1)活細胞、組織或生物體內(nèi)luc標記基因和熒光素酶-融合基因體內(nèi)/體外表達的成像分析;2)***用于報告基因分析,免疫分析和ATP熒光衛(wèi)生監(jiān)測分析;Protocol1:InVitroBioluminescentAssays/體外生物發(fā)光檢測1)配制成100mM的儲存液(200×,濃度30mg/ml)?;靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b后-20℃凍存。2)用預熱好的組織培養(yǎng)基1∶200稀釋儲存液,配制工作液(終濃度150μg/mL)。3)去除培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基直至無殘留。4)圖像分析前立即向細胞內(nèi)添加1×熒光素工作液,然后進行圖像分析(或者細胞放在37℃短時間孵育后檢測可增強信號)。D-熒光素鉀鹽注:螢光素、螢光素酶、螢火蟲螢光素酶、螢光素鉀鹽、螢光素鉀鹽鹽也經(jīng)常被稱作熒光素、熒光素酶、螢火蟲熒光素酶、熒光素鉀鹽、熒光素鈉鹽。Protocol2:Invivoanalysisinmice/小鼠***成像分析1)用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制D-熒光素鉀鹽溶液(15mg/mL),。一旦使用,保持冰冷且避光。
8.取剩余裂解液測定LacZ的活性,其讀數(shù)作為內(nèi)標用以矯正熒光素酶的讀數(shù)。9.用矯正后的讀數(shù)作圖,分析數(shù)據(jù)。注:熒光素見光易氧化,已稀釋未用的熒光素應丟棄。注意事項:1.熒光素酶檢測試劑需在15-25℃條件下預平衡后再進行反應,而后依據(jù)具體條件進行自動或手動檢測。當用液閃計數(shù)儀時,加入熒光素酶檢測試劑后立即輕輕混勻。2.如果細胞裂解后不能立即對提取物進行檢測,樣品可以在冰上保存大約5h,在-70℃可保存數(shù)月。不要反復凍融以避免酶活性的降低。3.利用上述方法檢測冷的樣品時,其信號強度將下降5-15%。4.在熒光素酶活性較高的情況下,導致信號超出線性范圍(信號溢出)可用裂解液將樣品進行稀釋。5.不要儲存稀釋過的樣品。如果必須保存,要在稀釋的樣品中加入BSA至終濃度為,這樣可以保持樣品的穩(wěn)定性。6.一些熒光儀在進行檢測前需要1-2s的穩(wěn)定,因此建議在開機后過一段時間再進行檢測操作。熒光素酶報告基因檢測主要有哪些用途?a.啟動子結構分析,將啟動子區(qū)域序列(通常2k左右)進行分段截短,或對特定位點進行突變,再分別構建入luciferase報告載體,檢測其啟動子活性。b.啟動子SNP分析,一些基因的啟動子區(qū)域存在單核苷酸多態(tài)性。做D-熒光素鉀鹽測試找哪家公司?
或分裝于-20℃避光保存,避免反復凍融。2)用預熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度。3)去除細胞培養(yǎng)基。4)待圖像分析前,向細胞內(nèi)添加熒光素工作液,37℃孵育5-10min,然后進行圖像分析。2.***成像分析1)用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液,混勻。2)用μm濾膜過濾除菌。立即使用,或分裝于-20℃避光保存,避免反復凍融。3)腹腔注射(.),按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進行注射。4)注射入體內(nèi)10-15min(待光信號達到更強穩(wěn)定平臺期)后進行成像分析。注:建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學曲線,從而確定更高信號檢測時間和信號平臺期。注意事項1)本品(fireflyluciferin)和甲蟲熒光素(beetleluciferin)只只是不同公司在命名上的差異,都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-carboxylicacid。2)注射方式、動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射,因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學曲線,確定更佳信號平臺期和更佳的檢測時間。3)如果要進行ATP的檢測,盡量避免外源ATP的污染,如操作時戴手套并使用ATP-free的實驗耗材,在進行熒光素的溶解時應使用ATP-free無菌水。D-熒光素鉀鹽測試需要滿足哪些條件?南京體外研究D-熒光素鉀鹽
D-熒光素鉀鹽檢測的安全性如何保障?鹽城ATPD-熒光素鉀鹽公司
螢光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱,其中**有代表性的是一種學名為Photinuspyrali'的螢火蟲體內(nèi)的螢光素酶,螢火蟲發(fā)光的腹部或海洋的藍色發(fā)光波浪將大自然中生物發(fā)光奇跡呈現(xiàn)于世。在生物化學和分子生物學的早期,這一現(xiàn)象被認為是發(fā)展生物分析的有力平臺。1991年,Promega發(fā)布了***代螢光素酶分析產(chǎn)品,并啟動了基于螢光素酶的進一步創(chuàng)新計劃,通過持續(xù)致力于研究和創(chuàng)新生物發(fā)光系統(tǒng)建立了各種不同的分析技術。Promega螢光素酶技術發(fā)光史里程碑AGlo-ingHistoryofInnovationandDiscovery1990年12月,Promega***提出螢火蟲螢光素酶(Luc)作為一種新興報告基因技術的應用可能性。當時的人們認為,螢火蟲螢光素酶具備的生物發(fā)光特性、極高的靈敏度和快速簡單的檢測流程等特點,可能會對分子生物學家的研究產(chǎn)生重要的影響。幾個月后,***代螢火蟲螢光素酶報告基因載體和檢測試劑在Promega誕生,使這項新技術正式并更***地為全球研究人員服務。隨后30年里,Promega不斷在螢光素酶實驗工具領域推陳出新,保持技術***的地位。這里提到的螢光素酶即熒光素酶。[1]1991螢光素酶檢測系統(tǒng)。鹽城ATPD-熒光素鉀鹽公司
南京翌科生物科技有限公司致力于商務服務,以科技創(chuàng)新實現(xiàn)***管理的追求。翌科生物作為翌科生物基于團隊十余年的研發(fā)基礎,建立了行業(yè)前端的外泌體與非編碼 RNA 研究和轉化平臺。公司目前擁有豐富的產(chǎn)品線,包括外泌體提取與檢測試劑、非編碼 RNA 提取與檢測試劑、轉染試劑、microRNA 表達文庫、臨床大數(shù)據(jù)庫及涵蓋分子、細胞、動物的綜合科技服務等 100 多種試劑和科研外包服務。公司堅持國產(chǎn)試劑自主研發(fā),服務全國各級高校、研究所、醫(yī)院、第三方檢測機構、生物醫(yī)藥公司等數(shù)千家客戶。的企業(yè)之一,為客戶提供良好的外泌體提取,非編碼RNA試劑,檢測試劑,轉染試劑。翌科生物致力于把技術上的創(chuàng)新展現(xiàn)成對用戶產(chǎn)品上的貼心,為用戶帶來良好體驗。翌科生物始終關注自身,在風云變化的時代,對自身的建設毫不懈怠,高度的專注與執(zhí)著使翌科生物在行業(yè)的從容而自信。