tetrametrylrhodarnineisothiocyante,TRITC)是一種紫紅色粉末,較穩(wěn)定,是羅達(dá)明(rhodamine)的衍生物。更大吸收光譜550urn,更大發(fā)射光譜620urn呈橙紅色熒光,與FITC發(fā)射的黃綠色熒光對比鮮明,常用于雙標(biāo)記染色。按照抗原抗體反應(yīng)的結(jié)合步聚,免疫熒光法可分為以下三種。1.直接法用熒光素標(biāo)記的特異性抗體直接與相應(yīng)的抗原結(jié)合,以檢查出相應(yīng)的抗原成分。2.間接法先用特異性抗體與相應(yīng)的抗原結(jié)合,洗去未結(jié)合的抗體,再用熒光素標(biāo)記的抗特異性抗體(間接熒光抗體)與特異性抗體相結(jié)合,形成抗原一特異性抗體一間接熒光抗體的復(fù)合物。在此復(fù)合物上帶有比直接法更多的熒光抗體,所以,此法較直接法靈敏。3.補(bǔ)體法用特異性的抗體和補(bǔ)體的混合液與標(biāo)本上的抗原反應(yīng),補(bǔ)體就結(jié)合在抗原抗體復(fù)合物上,再用抗補(bǔ)體的熒光抗體與之相結(jié)合,就形成了抗原一抗體一補(bǔ)體一抗補(bǔ)體熒光抗體的復(fù)合物。熒光顯微鏡下所見到的發(fā)出熒光的部分即是抗原所在的部位。補(bǔ)體法具有敏感性強(qiáng)的優(yōu)勢,同時適用于各種不同種屬來源的特異性抗體的標(biāo)記顯示,在各種不同種屬動物抗體的檢測上為更常用的技術(shù)方法熒光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱。南京D-熒光素鉀鹽測試公司哪家便宜。上海熒光素鉀鹽D-熒光素鉀鹽溶液怎么保存
螢火蟲熒光素酶(Luciferase)是一種常用的信號分子,可以用來標(biāo)記腫瘤細(xì)胞.一.細(xì)胞方法將帶有熒光素luc轉(zhuǎn)酶報告基因的真核表達(dá)重組質(zhì)粒pRc/CMV2-7,利用G418篩選,獲得穩(wěn)染人乳腺哎細(xì)胞株MCF-7-luc,并在穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶基因的細(xì)胞克隆MCF-7體外評價其發(fā)光能力。通過建立裸鼠移植瘤模型,利用活題生物發(fā)光成像系統(tǒng)檢測腫大的瘤生長及轉(zhuǎn)移情況,為下一步監(jiān)測裸鼠移植瘤對藥物作用的變化情從而為分析藥物對腫大的瘤的治的好效果提供理想的狀況.G418篩選濃度的確定:37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中常培養(yǎng),G418按0、200、400、600、800、1000μg/ml設(shè)置6個濃度梯度。在細(xì)胞接種24h后,加入6孔板中,每個濃度設(shè)2個孔在10~14d內(nèi)全部死亡。每天觀察細(xì)胞生長情況,死亡更低的G418濃度,即為篩選質(zhì)粒轉(zhuǎn)染克隆MCF-7細(xì)胞的濃度。1)細(xì)胞轉(zhuǎn)染取對數(shù)生長期的MCF-7細(xì)胞,將細(xì)胞接種于6孔板內(nèi)待細(xì)胞融合度達(dá)到80%~90%孔培養(yǎng)板中,TM即可轉(zhuǎn)染。按照Lipofectamine2000試劑盒操作指南進(jìn)行轉(zhuǎn)染。在250μl無血清、無雙抗的DMEM培培養(yǎng)基中加入luc質(zhì)粒8μg/ml的pRc/CMV2-在250μl無血清、無雙抗的DMEM培養(yǎng)基中加入10μlLipofectamineTM2000,室溫培育5min。將上述2種稀釋液混勻。鹽城ATPD-熒光素鉀鹽生物公司南京翌科生物科技有限公司D-熒光素鉀鹽比較靠譜。
是新型底物開發(fā)的一個早期實例。[1]2012NanoLuc?螢光素酶基于定向進(jìn)化和新型底物開發(fā)方面的經(jīng)驗,研究人員從蝦的螢光素酶改造設(shè)計出一種新型螢光素酶報告基因,即NanoLuc?螢光素酶。這是一種小分子(19kDa)單體酶,具有獨(dú)特的底物,其靈敏度比已具備高靈敏度的螢火蟲或海腎螢光素酶系統(tǒng)高約100倍。這種新型的報告基因有著范圍廣的應(yīng)用前景,為進(jìn)一步的技術(shù)開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。[1]2015NanoBRET?技術(shù)NanoLuc?的小體積和非常明亮的光輸出是作為蛋白質(zhì)標(biāo)簽的理想特征。這些特征還很適合作為生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移(BRET)的供體。一項針對各種能量受體熒光基團(tuán)的深入研究發(fā)現(xiàn),紅色光譜中的可選擇性有助于消除與BRET測定相關(guān)的一些挑戰(zhàn)??蓪⑦@些熒光基團(tuán)添加到蛋白質(zhì)配基等分子中以測量靶蛋白的結(jié)合,或與HaloTag?配基耦聯(lián)以進(jìn)行活細(xì)胞中蛋白質(zhì):蛋白質(zhì)相互作用的檢測。[1]2016NanoBiT?技術(shù)隨著NanoLuc?的誕生,Promega的科學(xué)家努力將該報告基因改造為多亞基系統(tǒng),即“NanoLuc?BinaryTechnology”或NanoBiT?。該系統(tǒng)由兩部分組成:11個氨基酸的小標(biāo)簽和一個更大,更精細(xì)的NanoLuc?亞基,LgBiT。這兩部分結(jié)構(gòu)互補(bǔ)結(jié)合。
2-乙磺酸)PIPES磷酸烯醇**酸三(環(huán)已胺)鹽PEP病毒保存液肝素鋰乙二胺四乙酸二鉀/EDTA二鉀血清分離膠/血液分離膠肝素抗凝劑乙二胺四乙酸三鉀/EDTA三鉀血液促凝劑高效促凝粉高效硅化劑水溶性硅化劑草酸鉀鈣離子螫合抗凝劑弱效抗凝劑吖啶酯己二酰阱NSP-DMAE-ADH吖啶酯-T4結(jié)合物吖啶酯-T3結(jié)合物吖啶磺酰胺鹽-N-乙胺基馬來酰亞胺吖啶磺酰胺鹽-T4結(jié)合物吖啶磺酰胺鹽-T3結(jié)合物生物素-T4結(jié)合物化學(xué)發(fā)光分析試劑及標(biāo)記物生物素-T3結(jié)合物生物素-NHS活性酯吖啶磺酰胺NSP-SA-ADH吖啶酯NSP-DMOAE-NHS吖啶酯NSP-DMOAE-PEG-GT-NHSCy3-NHS酯Cy7-NHS酯5-羧基熒光素-NHS酯6-羧基熒光素-NHS酯5(6)-羧基熒光素-NHS酯6-羧基熒光素D熒光素鈉鹽D-Luciferin,SodiumSaltD-熒光素鉀鹽D-Luciferin,PotassiumSaltD-熒光素螢火蟲,游離酸D-LuciferinFirefly,freeacid螢火蟲熒光素酶fireflyluciferase海腎熒光素酶Renillaluciferase天然腔腸熒光素Coelenterazineh腔腸素hCoelenterazinef腔腸素fCoelenterazineh/腔腸素h腔腸熒光素運(yùn)輸和保存冰袋運(yùn)輸;-20℃干燥避光保存;有效期一年。使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1)用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鈉鹽,配制成30mg/mL的儲存液(100-200×),混勻。立即使用。做D-熒光素鉀鹽測試真的靠譜嗎?
重組為一個明亮的螢光素酶。這些亞基的親和力可以和SmBiT肽一樣低,從而可以進(jìn)行蛋白質(zhì)相互作用的測定;也可以和HiBiT一樣高,從而允許自我組裝。[1]2017HiBiT?技術(shù)基于NanoBiT?系統(tǒng)的研究,我們將與LgBiT具有極強(qiáng)親和作用的。HiBiT作為一種易于檢測且具有高靈敏度的蛋白質(zhì)標(biāo)簽,具有多種功能,例如當(dāng)與基于CRIPSR的標(biāo)簽一起使用時,可以創(chuàng)建內(nèi)源性報告基因模型。[1]2020Lumit?技術(shù)隨著NanoBiT?技術(shù)的發(fā)展,人們認(rèn)識到可以利用該系統(tǒng)通過結(jié)合免疫測定的組分檢測多種分析物。由此產(chǎn)生的平臺(現(xiàn)稱為“Lumit”)提供了具有高靈敏度的簡化免疫檢測法。熒光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱,其中更有代表性的是一種學(xué)名為Photinuspyrali'的螢火蟲體內(nèi)的熒光素酶。在相應(yīng)化學(xué)反應(yīng)中,熒光的產(chǎn)生是來自于螢光素的氧化,有些情況下反應(yīng)體系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。沒有熒光素酶的情況下,螢光素與氧氣反應(yīng)的速率非常慢,而鈣離子的存在常??梢赃M(jìn)一步加速反應(yīng)(與肌肉收縮的情況相似)。熒光生成反應(yīng)通常分為以下兩步:螢光素+ATP→螢光素化腺苷酸。做D-熒光素鉀鹽測試工作液是先用現(xiàn)配。南京專業(yè)做D-熒光素鉀鹽溶液怎么保存
D-熒光素有時候也叫游離酸。上海熒光素鉀鹽D-熒光素鉀鹽溶液怎么保存
酸化后消失,中和或堿化后又出現(xiàn),微溶于乙醇;比較大吸收波長(水)。中文名稱:熒光素鈉中文別名:熒光黃鈉;熒光橙紅鈉;熒光素二鈉英文名FLUORESCEINSODIUM等級:BS物性數(shù)據(jù)編輯播報1.性狀:未確定2.密度(g/cm3,25/4℃):.相對蒸汽密度(g/cm3,空氣=1):未確定4.熔點(diǎn)(oC):3205.沸點(diǎn)(oC,常壓):未確定6.沸點(diǎn)(oC,8kPa):未確定7.折射率:未確定8.閃點(diǎn)(oC):未確定9.比旋光度(o):未確定10.自燃點(diǎn)或引燃溫度(oC):未確定11.蒸氣壓(kPa,25oC):未確定12.飽和蒸氣壓(kPa,60oC):未確定13.燃燒熱(KJ/mol):未確定14.臨界溫度(oC):未確定15.臨界壓力(KPa):未確定16.油水(辛醇/水)分配系數(shù)的對數(shù)值:未確定17.上限(%,V/V):未確定18.下限(%,V/V):未確定19.溶解性:溶于水及乙醇,帶有強(qiáng)的綠色熒光,水溶性好。上海熒光素鉀鹽D-熒光素鉀鹽溶液怎么保存