SodiumSalt/D熒光素鈉鹽分子式:NaC11H7N2O3S2·H2O分子量:g/mol純度:高級(jí)純()應(yīng)用:1)體外化學(xué)發(fā)光分析(invitro);2)***成像實(shí)驗(yàn)(invivo);3)高靈敏度ATP分析;步驟:Protocol1:InVitroBioluminescentAssays/體外生物發(fā)光檢測1)用mL蒸餾水溶解gD-熒光素鈉鹽,配制成100mM的儲(chǔ)存液(200×,濃度30mg/ml)。混勻后立即使用或分裝后-20℃凍存。2)用組織培養(yǎng)基1∶200稀釋儲(chǔ)存液,配置工作液(終濃度150μg/mL)。3)去除培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基。4)待圖像分析前,向細(xì)胞內(nèi)添加1×熒光素工作液,然后進(jìn)行圖像分析。Protocol2:Invivoanalysis/***成像分析1)用無菌的PBS(w/oMg2+、Ca2+)配制D-熒光素鈉鹽工作液(15mg/mL),。一旦使用,保持冰冷且避光。D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍應(yīng)用于整個(gè)生物技術(shù)領(lǐng)域,尤其是體內(nèi)***成像技術(shù)。其作用機(jī)制是在ATP和熒光素酶的作用下,熒光素(底物)能夠被氧化發(fā)光(見下圖)。當(dāng)熒光素過量時(shí),產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性。將攜帶熒光素酶編碼基因(Luc)的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入細(xì)胞后,導(dǎo)入研究動(dòng)物如大、小鼠體內(nèi),之后注入熒光素,通過生物發(fā)光成像技術(shù)(BLI)來檢測光強(qiáng)度變化。做D-熒光素鉀鹽測試價(jià)格是多少。泰州熒光素鉀鹽D-熒光素鉀鹽濃度
海腎螢光素酶因其底物要求和光輸出方面的差異而可用于雙重報(bào)告檢測。Amplite?海腎熒光素酶報(bào)告基因測定Amplite?Renilla螢光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒提供了一種快速,靈敏的方法,可以使用專有的發(fā)光配方在基于細(xì)胞的檢測中檢海腎螢光素酶的活性,與海腎螢光素酶相互作用后,該試劑產(chǎn)生具有強(qiáng)光的產(chǎn)物。Amplite?海腎熒光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒特點(diǎn):該測定法與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長培養(yǎng)基兼容該試劑盒可以測量野生型和合成hRluc基因的原始表達(dá)或基因表達(dá)每個(gè)試劑盒均包含可以方便96孔和384孔板檢測所必不可少的組分。熒光素酶是生物體內(nèi)催化熒光素等物質(zhì)氧化發(fā)光的一類酶的總稱。自然界中,不同的發(fā)光生物擁有不同的熒光素酶,除了螢火蟲熒光素酶(FireflyLuciferase)之外,還有發(fā)光細(xì)菌體內(nèi)的細(xì)菌熒光素酶、發(fā)光海星的海星熒光素酶等。目前,人們對(duì)螢火蟲熒光素酶的研究**多、應(yīng)用***。一則關(guān)于手機(jī)上的細(xì)菌的新聞里,**在用ATP熒光檢測儀檢測手機(jī)表面的細(xì)菌。ATP是一種在動(dòng)物、植物和細(xì)菌等活細(xì)胞中都存在的能量物質(zhì),由前述的反應(yīng)式可知,ATP與熒光素、熒光素酶反應(yīng)發(fā)出熒光。檢測樣品中的微生物越多,ATP就越多,熒光反應(yīng)的光亮就越大。徐州D-熒光素鉀鹽活題成像原理D-熒光素鉀鹽使用的是什么技術(shù)?
4)待圖像分析前,向細(xì)胞內(nèi)添加熒光素工作液,37℃孵育5-10min,然后進(jìn)行圖像分析。2.活ti成像分析1)用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲(chǔ)存液,混勻。2)用μm濾膜過濾除菌。立即使用,或分裝于-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。3)腹腔注射(.),按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進(jìn)行注射,以小鼠為例,每只小鼠體重假定20g,每只小鼠用量3mg;4)注射入體內(nèi)10-15min(待光信號(hào)達(dá)到更強(qiáng)穩(wěn)定平臺(tái)期)后進(jìn)行成像分析。注:建議對(duì)每只動(dòng)物模型都需要建立熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線,從而確定更高信號(hào)檢測時(shí)間和信號(hào)平臺(tái)期。注意事項(xiàng)1)本品(fireflyluciferin)和甲蟲熒光素(beetleluciferin)、螢光素鉀鹽只是不同別名,以CAS號(hào)115144-35-9為準(zhǔn)。2)注射方式、動(dòng)物類型以及體重等都會(huì)影響信號(hào)的發(fā)射,因此建議每次實(shí)驗(yàn)都要做熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線,確定更佳信號(hào)平臺(tái)期和更佳的檢測時(shí)間。3)如果要進(jìn)行ATP的檢測,盡量避免外源ATP的污染,如操作時(shí)戴手套并使用ATP-free的實(shí)驗(yàn)耗材,在進(jìn)行熒光素的溶解時(shí)應(yīng)使用ATP-free無菌水。4)為避免反復(fù)凍融,本產(chǎn)品配制成溶液后建議適當(dāng)分裝后-20℃或-80℃保存。為防止氧化,如有條件,可以對(duì)儲(chǔ)存液充氮?dú)饣驓鍤夂蟊4妗?/p>
熒光素酶(Luciferase)是自然界中能夠催化熒光素產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱,其中**有7a70d2e3-5dda-4f49-84be-c6的是來自螢火蟲體內(nèi)(Fire?y)和海腎(Renilla)體內(nèi)的兩類螢光素酶,分別命名為F-Luciferase和R-Luciferase,同時(shí)近年來研究得較多的來源于高斯氏菌的高斯熒光素酶(Gaussluciferase)。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的過程中,會(huì)發(fā)出生物熒光(bioluminescence),可通過熒光測定儀設(shè)備測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光,常應(yīng)用于啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控及miRNA靶基因驗(yàn)證等方向研究。螢火蟲螢光素酶**通用和**常見的報(bào)告基因是北美螢火蟲photinuspyralis的熒光素酶,該蛋白質(zhì)不需要翻譯后修飾即可獲得酶活性。高濃度(體內(nèi))甚至沒有毒性,可用于原核和真核細(xì)胞。Amplite?螢光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒(12518)使用無DTT**配方來定量活細(xì)胞和細(xì)胞提取物中的螢光素酶活性。該測定基于螢火蟲熒光素酶,螢火蟲熒光素酶是一種單體的61kD酶,可催化熒光素的兩步氧化,在560nm處產(chǎn)生光。Amplite?螢光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒特點(diǎn):具有優(yōu)化的“混合讀取”測定規(guī)程,可與HTS液體處理儀器兼容具有高靈敏度。D-熒光素鉀鹽使用的注意事項(xiàng)。
2-乙磺酸)PIPES磷酸烯醇**酸三(環(huán)已胺)鹽PEP病毒保存液肝素鋰乙二胺四乙酸二鉀/EDTA二鉀血清分離膠/血液分離膠肝素抗凝劑乙二胺四乙酸三鉀/EDTA三鉀血液促凝劑高效促凝粉高效硅化劑水溶性硅化劑草酸鉀鈣離子螫合抗凝劑弱效抗凝劑吖啶酯己二酰阱NSP-DMAE-ADH吖啶酯-T4結(jié)合物吖啶酯-T3結(jié)合物吖啶磺酰胺鹽-N-乙胺基馬來酰亞胺吖啶磺酰胺鹽-T4結(jié)合物吖啶磺酰胺鹽-T3結(jié)合物生物素-T4結(jié)合物化學(xué)發(fā)光分析試劑及標(biāo)記物生物素-T3結(jié)合物生物素-NHS活性酯吖啶磺酰胺NSP-SA-ADH吖啶酯NSP-DMOAE-NHS吖啶酯NSP-DMOAE-PEG-GT-NHSCy3-NHS酯Cy7-NHS酯5-羧基熒光素-NHS酯6-羧基熒光素-NHS酯5(6)-羧基熒光素-NHS酯6-羧基熒光素D熒光素鈉鹽D-Luciferin,SodiumSaltD-熒光素鉀鹽D-Luciferin,PotassiumSaltD-熒光素螢火蟲,游離酸D-LuciferinFirefly,freeacid螢火蟲熒光素酶fireflyluciferase海腎熒光素酶Renillaluciferase天然腔腸熒光素Coelenterazineh腔腸素hCoelenterazinef腔腸素fCoelenterazineh/腔腸素h腔腸熒光素運(yùn)輸和保存冰袋運(yùn)輸;-20℃干燥避光保存;有效期一年。使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1)用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鈉鹽,配制成30mg/mL的儲(chǔ)存液(100-200×),混勻。立即使用。D-熒光素鹽也算是鈉鹽和鉀鹽。鎮(zhèn)江熒光素D-熒光素鉀鹽溶液怎么保存
ATP作用下的D-熒光素鉀鹽什么樣。泰州熒光素鉀鹽D-熒光素鉀鹽濃度
熒光素酶的基因可以被合成并插入到生物體中或轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中。研究者利用基因工程已經(jīng)使得小鼠、家蠶、馬鈴薯等一些生物可以合成熒光素酶。間接體外成像是一種強(qiáng)大的研究手段,可以對(duì)整個(gè)動(dòng)物體中的細(xì)胞群落進(jìn)行分析:將不同類型的細(xì)胞(骨髓干細(xì)胞、T細(xì)胞等)標(biāo)記上(即表達(dá))熒光素酶,就可以用高敏感度的CCD相機(jī)進(jìn)行對(duì)動(dòng)物體內(nèi)進(jìn)行活ti觀察而不會(huì)傷害到動(dòng)物本身。在熒光素酶中加入正確的熒光素底物就可以放出熒光,而發(fā)出的光子可以被光敏感元件,如熒光探測器或改進(jìn)后的光學(xué)顯微鏡探測到。這就使得對(duì)包括影響在內(nèi)的多種生命活動(dòng)進(jìn)程進(jìn)行觀察成為可能。例如,熒光素酶可以被用于檢測血庫中所存血液中的紅血球是否開始破裂。法醫(yī)可以用含有熒光素酶的溶液來檢測犯罪現(xiàn)場中殘留的血跡。醫(yī)院用熒光素酶的發(fā)光來發(fā)現(xiàn)特定的疾病。熒光素酶還可以作為“報(bào)告蛋白”被用于分子生物學(xué)研究中,例如,用于在轉(zhuǎn)染過熒光素酶的細(xì)胞中檢測特定啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄情況或用于探測細(xì)胞內(nèi)的ATP的水平;這一技術(shù)被稱為報(bào)告基因檢測法或熒光素酶檢測法(LuciferaseAssay)。熒光素酶是一個(gè)熱敏感蛋白,因此經(jīng)常被用于研究蛋白熱變性過程中熱休克蛋白的保護(hù)能力。泰州熒光素鉀鹽D-熒光素鉀鹽濃度