酸化后消失,中和或堿化后又出現(xiàn),微溶于乙醇;比較大吸收波長(水)。中文名稱:熒光素鈉中文別名:熒光黃鈉;熒光橙紅鈉;熒光素二鈉英文名FLUORESCEINSODIUM等級(jí):BS物性數(shù)據(jù)編輯播報(bào)1.性狀:未確定2.密度(g/cm3,25/4℃):.相對(duì)蒸汽密度(g/cm3,空氣=1):未確定4.熔點(diǎn)(oC):3205.沸點(diǎn)(oC,常壓):未確定6.沸點(diǎn)(oC,8kPa):未確定7.折射率:未確定8.閃點(diǎn)(oC):未確定9.比旋光度(o):未確定10.自燃點(diǎn)或引燃溫度(oC):未確定11.蒸氣壓(kPa,25oC):未確定12.飽和蒸氣壓(kPa,60oC):未確定13.燃燒熱(KJ/mol):未確定14.臨界溫度(oC):未確定15.臨界壓力(KPa):未確定16.油水(辛醇/水)分配系數(shù)的對(duì)數(shù)值:未確定17.上限(%,V/V):未確定18.下限(%,V/V):未確定19.溶解性:溶于水及乙醇,帶有強(qiáng)的綠色熒光,水溶性好。做D-熒光素鉀鹽測(cè)試價(jià)格是多少。熒光增白劑和熒光劑的區(qū)別
可用熒光素酶檢測(cè)系統(tǒng)靈敏方便地測(cè)定熒光素酶基因的表達(dá)。熒光素酶報(bào)告基因有許多優(yōu)點(diǎn):①非放射性;②比CAT及其他報(bào)告基因速度快;③比CAT靈敏100倍;④熒光素酶在哺乳細(xì)胞中的半衰期為3小時(shí),在植物中的半衰期為3.5小時(shí)。由于半衰期短,故啟動(dòng)子的改變會(huì)即時(shí)導(dǎo)致熒光素酶活性的改變,而熒光素酶不會(huì)積累。相反,CAT在哺乳細(xì)胞中的半衰期為50小時(shí)。熒光素酶濃度在10—16mol/L(10pS/L)到10-8mol/L(1mg/L)范圍內(nèi),熒光信號(hào)強(qiáng)度與酶濃度成正比。在理想條件下,可檢測(cè)到l0-20mol/L的熒光素酶。檢測(cè)步驟:1.用生物信息學(xué)方法分析并預(yù)測(cè)啟動(dòng)子區(qū)可能的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)。2.設(shè)計(jì)引物用PCR法從基因組DNA中克隆所需的靶啟動(dòng)子片段,將此片段插入到熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒(pGL3-basic)中。3.篩選陽性克隆,測(cè)序。擴(kuò)增克隆并提純質(zhì)粒備用。4.?dāng)U增轉(zhuǎn)錄因子質(zhì)粒,提純備用。同時(shí)準(zhǔn)備相應(yīng)的空載質(zhì)粒對(duì)照,提純備用。5.培養(yǎng)293(或其它目的細(xì)胞),并接種于24孔板中,生長10-24小時(shí)(80%匯合度)。6.將報(bào)告基因質(zhì)粒與轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染細(xì)胞。7.提取蛋白并用于熒光素酶檢測(cè)。8.加入底物,測(cè)定熒光素酶的活性。9.計(jì)算相對(duì)熒光強(qiáng)度,并與空載對(duì)照比較。常州螢火蟲熒光素酶D-熒光素鉀鹽應(yīng)用D-熒光素鉀鹽檢測(cè)是個(gè)人合作嗎?
注意事項(xiàng)1)本品(fireflyluciferin)和甲蟲熒光素(beetleluciferin)、螢光素鉀鹽只是不同別名,以CAS號(hào)115144-35-9為準(zhǔn)。2)注射方式、動(dòng)物類型以及體重等都會(huì)影響信號(hào)的發(fā)射,因此建議每次實(shí)驗(yàn)都要做熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線,確定更佳信號(hào)平臺(tái)期和更佳的檢測(cè)時(shí)間。3)如果要進(jìn)行ATP的檢測(cè),盡量避免外源ATP的污染,如操作時(shí)戴手套并使用ATP-free的實(shí)驗(yàn)耗材,在進(jìn)行熒光素的溶解時(shí)應(yīng)使用ATP-free無菌水。4)為避免反復(fù)凍融,本產(chǎn)品配制成溶液后建議適當(dāng)分裝后-20℃或-80℃保存。為防止氧化,如有條件,可以對(duì)儲(chǔ)存液充氮?dú)饣驓鍤夂蟊4妗?)對(duì)于檢測(cè)靈敏度要求特別高的實(shí)驗(yàn),建議使用新鮮配制的本產(chǎn)品。6)在進(jìn)行D-熒光素鉀鹽的溶解時(shí),應(yīng)使用無鈣鎂離子的DPBS,因鈣鎂離子可能會(huì)抑制熒光素酶的活性,此外鎂離子可能會(huì)對(duì)熒光素的氧化造成影響,從而影響檢測(cè)。7)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。8)本產(chǎn)品只作科研用途!
附錄ⅧB),與標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液制成的對(duì)照液比較,不得更濃()。干燥失重取本品,在105℃干燥至恒重,減失重量不得過%(附錄ⅧL)。鋅鹽取本品,加氯化鈉的飽和水溶液10ml溶解后,加稀鹽酸2ml,搖勻,濾過,濾液中加亞鐵**鉀試液1ml,不得發(fā)生渾濁。5鑒別方法編輯(1)取本品的水溶液(1→2000)1滴,點(diǎn)于濾紙上,即生成黃色斑點(diǎn),趁濕置溴蒸氣中,1分鐘后再使與氨蒸氣接觸,斑點(diǎn)即變?yōu)樯罘奂t色。(2)本品的水溶液顯強(qiáng)烈的熒光,用大量的水稀釋后仍極明顯;但加酸使成酸性后,熒光即消失;再加堿使成堿性,熒光又顯出。(3)本品熾灼灰化后顯鈉鹽的鑒別反應(yīng)(附錄Ⅲ)。6含量測(cè)定編輯取本品約,精密稱定,加水20ml溶解后,加稀鹽酸5ml使熒光素析出,用丁醇-氯仿(1:1)提取4次,每次20ml,合并提取液,用水10ml洗滌,洗液再用異丁醇-氯仿(1:1)5ml振搖提取,合并提取液,置105℃恒重的容器中,在水浴上通風(fēng)蒸發(fā)至干,殘?jiān)靡掖?0ml溶解后,再置水浴上蒸干,并在105℃干燥至恒重,精密稱定,殘?jiān)亓颗c相乘,即得供試量中含有C20H10Na2O5的重量。熒光素鈉是一種有機(jī)化合物,分子式為C20H10Na2O5,橙紅色粉末,無氣味,有吸濕性;易溶于水,溶液呈黃紅色,并帶極強(qiáng)的黃綠色熒光。光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性。
我們將與LgBiT具有極強(qiáng)親和作用的。HiBiT作為一種易于檢測(cè)且具有高靈敏度的蛋白質(zhì)標(biāo)簽,具有多種功能,例如當(dāng)與基于CRIPSR的標(biāo)簽一起使用時(shí),可以創(chuàng)建內(nèi)源性報(bào)告基因模型。[1]2020Lumit?技術(shù)隨著NanoBiT?技術(shù)的發(fā)展,人們認(rèn)識(shí)到可以利用該系統(tǒng)通過結(jié)合免疫測(cè)定的組分檢測(cè)多種分析物。由此產(chǎn)生的平臺(tái)(現(xiàn)稱為“Lumit”)提供了具有高靈敏度的簡化免疫檢測(cè)法。螢光素酶(英語:Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱,其中**有代表性的是一種學(xué)名為Photinuspyralis的螢火蟲體內(nèi)的螢光素酶。在相應(yīng)化學(xué)反應(yīng)中,熒光的產(chǎn)生是來自于螢光素的氧化,有些情況下反應(yīng)體系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。沒有螢光素酶的情況下,螢光素與氧氣反應(yīng)的速率非常慢,而鈣離子的存在常??梢赃M(jìn)一步加速反應(yīng)(與肌肉收縮的情況相似)。螢光生成反應(yīng)通常分為以下兩步:螢光素+ATP→螢光素化腺苷酸(luciferyladenylate)+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧螢光素+AMP+光這一反應(yīng)非常節(jié)省能量,幾乎所有輸入反應(yīng)的能量都被轉(zhuǎn)化為光。與之形成鮮明對(duì)比的是人類使用的白熾燈,只有約10%的能量被轉(zhuǎn)化為光,剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M(fèi)。螢光素或螢光素酶不是特定的分子。D-熒光素鉀鹽測(cè)試比較好的公司有哪幾個(gè)?南京螢火蟲熒光素酶D-熒光素鉀鹽應(yīng)用
D-熒光素鉀鹽如何選擇合作公司?熒光增白劑和熒光劑的區(qū)別
螢火蟲熒光素酶(Luciferase)是一種常用的信號(hào)分子,可以用來標(biāo)記腫瘤細(xì)胞.一.細(xì)胞方法將帶有熒光素luc轉(zhuǎn)酶報(bào)告基因的真核表達(dá)重組質(zhì)粒pRc/CMV2-7,利用G418篩選,獲得穩(wěn)染人乳腺哎細(xì)胞株MCF-7-luc,并在穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶基因的細(xì)胞克隆MCF-7體外評(píng)價(jià)其發(fā)光能力。通過建立裸鼠移植瘤模型,利用活題生物發(fā)光成像系統(tǒng)檢測(cè)腫大的瘤生長及轉(zhuǎn)移情況,為下一步監(jiān)測(cè)裸鼠移植瘤對(duì)藥物作用的變化情從而為分析藥物對(duì)腫大的瘤的治的好效果提供理想的狀況.G418篩選濃度的確定:37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中常培養(yǎng),G418按0、200、400、600、800、1000μg/ml設(shè)置6個(gè)濃度梯度。在細(xì)胞接種24h后,加入6孔板中,每個(gè)濃度設(shè)2個(gè)孔在10~14d內(nèi)全部死亡。每天觀察細(xì)胞生長情況,死亡更低的G418濃度,即為篩選質(zhì)粒轉(zhuǎn)染克隆MCF-7細(xì)胞的濃度。1)細(xì)胞轉(zhuǎn)染取對(duì)數(shù)生長期的MCF-7細(xì)胞,將細(xì)胞接種于6孔板內(nèi)待細(xì)胞融合度達(dá)到80%~90%孔培養(yǎng)板中,TM即可轉(zhuǎn)染。按照Lipofectamine2000試劑盒操作指南進(jìn)行轉(zhuǎn)染。在250μl無血清、無雙抗的DMEM培培養(yǎng)基中加入luc質(zhì)粒8μg/ml的pRc/CMV2-在250μl無血清、無雙抗的DMEM培養(yǎng)基中加入10μlLipofectamineTM2000,室溫培育5min。將上述2種稀釋液混勻。熒光增白劑和熒光劑的區(qū)別