超濾離心管的分子量選擇:按照樣品量和目標(biāo)分子量選擇適當(dāng)?shù)某瑸V離心管,為了得到較高的收率,所選濾膜的截留分子量MWCO建議選擇所需截留分子大小的1/3左右,不超過目標(biāo)分子量的一半。因為超濾膜上孔徑是平均孔徑,膜上的孔并非均勻,離心高壓下也可能滲漏,因此截留孔徑越小,流速越慢但截留比例更大。如果樣本濃度低體積大,可選擇較小容積的超濾管多次重復(fù)加樣離心。如果同時需要脫鹽和去除可溶小分子雜質(zhì),可將待濃縮樣品稀釋到超濾管較大容積再離心,重復(fù)2次可除去99%鹽。避免過長時間或者過速離心,雖然優(yōu)良品質(zhì)的產(chǎn)品都有防死端設(shè)計,可避免過度離心造成膜表面干而造成不可逆吸附。使用超濾離心管時應(yīng)注意保持其清潔和衛(wèi)生,并定期更換超濾膜以確保較佳效果。江蘇10K超濾離心管排行榜
離心管主要有塑料、不銹鋼制成,塑料離心管常用資料有聚丙烯(PP).聚乙烯(PE),聚碳酸酯(PC)等。其中PP管性能較好,塑料離心管的優(yōu)點是透明(或半透明),硬度小,可用穿刺法取出梯度,缺陷是易變形,抗有機溶劑腐蝕性差,運用壽命短;不銹鋼離心管強度大,不變形,能抗凍,抗熱,抗化學(xué)腐蝕,但用時要防止接觸強腐蝕性的化學(xué)藥品、如強酸、強堿等化學(xué)試劑。這里主要介紹塑料離心管:塑料離心管都有管蓋,離心前管蓋必需蓋嚴,倒置不漏液。管蓋有三種作用:①避免樣品外泄,用于有放射性或強腐蝕性的樣品時②避免樣品揮發(fā)③支持離心管,避免離心管變形。廣東30K超濾離心管廠家有哪些使用超濾離心管時應(yīng)注意避免過度旋轉(zhuǎn)造成樣品混亂并影響分離效果。
超濾離心管的分子量選擇:按照樣品量和目標(biāo)分子量選擇適當(dāng)?shù)某瑸V離心管,為了得到較高的收率,所選濾膜的截留分子量MWCO建議選擇所需截留分子大小的1/3左右,不超過目標(biāo)分子量的一半。因為超濾膜上孔徑是平均孔徑,膜上的孔并非均勻,離心高壓下也可能滲漏,因此截留孔徑越小,流速越慢但截留比例更大。如果樣本濃度低體積大,可選擇較小容積的超濾管多次重復(fù)加樣離心。如果同時需要脫鹽和去除可溶小分子雜質(zhì),可將待濃縮樣品稀釋到超濾管較大容積再離心,重復(fù)2次可除去99%鹽。避免過長時間或者過速離心,雖然優(yōu)良品質(zhì)的產(chǎn)品都有防死端設(shè)計,可避免過度離心造成膜表面干而造成不可逆吸附。避免過度濃縮,體積越小,越容易因表面吸附而損失得率。離心后用Tips輕輕吹吸幾次濾膜截留的溶液,必要時補加一定體積的緩沖液沖洗膜表面,有助于減少膜表面吸附,能提高回收率。盡量避免Tips接觸膜表面。
當(dāng)濃縮到剩下1ml時,取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測,繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀,導(dǎo)致堵管。若發(fā)生沉淀,要確定沉淀的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,后者的方法是換不同的緩沖溶液,直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。在使用超濾離心管時,需要注意保持管子清潔、干燥和無污染。
超濾離心管是內(nèi)部裝有超濾膜的用于濃縮和凈化生物樣本的一次性耗材。15ML的超濾離心管可處理樣品量達20ML,具有快速超過濾功能,能夠達到較高的濃縮系數(shù),易于從稀釋液和復(fù)雜的樣本組合進行濃縮液回收。豎式設(shè)計以及其雙面的超大過濾面積能提供快速的樣本處理和較高的樣本回收率(通常大于90%稀薄的初始溶液),并能進行80倍濃縮。典型的處理時間為15至40分鐘。豎式設(shè)計將溶質(zhì)極化和之后造成的濾膜結(jié)垢降至低,過濾裝置中的物理止濾點防止過濾器旋轉(zhuǎn)過度使樣本干燥和造成樣本損失。濃縮液用移液管從過濾器的樣本槽中收集,而超過濾濾出液則收集到所提供的離心管中。該裝置可在擺桶或定角轉(zhuǎn)子中旋轉(zhuǎn)。的離心管有超過7種不同的截留分子量(截留分子量,MWCO)3Kda,5Kda,10Kda,30Kda,50Kda,100Kda,500Kda等。使用超濾離心管時應(yīng)注意選擇正確的膜孔徑,以確保所需分子能通過篩選過程。江蘇10K超濾離心管排行榜
使用超濾離心管時應(yīng)注意遵循正確的溫度、時間和壓力要求,以獲得較佳結(jié)果。江蘇10K超濾離心管排行榜
按用途可分:制備型離心管和分析型離心管。大量離心管(500mL、250mL)。普通離心管(50mL、15mL)。微量離心管(2mL、1.5mL、0.65mL、0.2mL) 塑料離心管,玻璃離心管,鋼制離心管。1、塑料離心管。塑料離心管的優(yōu)點是透明或者是半透明的,它的硬度小,可用穿刺法取出梯度。缺點是易變形,抗有機溶劑腐蝕性差,使用壽命短。塑料離心管都有管蓋,它的作用是防止樣品外泄,尤其是用于有放射性或強腐蝕性的樣品時防止樣品外泄是很重要的一點;管蓋還有一個作用是防止樣品揮發(fā)以及支持離心管,防止離心管變形。在挑選這一點的時候還要注意檢查管蓋是否嚴密,在試驗時能否蓋嚴,以到達倒置不漏液;我們都知道在塑料離心管中,常用材料有聚乙烯(PE),聚碳酸酯(PC),聚丙烯(PP)等,其中聚丙烯PP管性能會相對較好,所以,我們在挑選塑料離心管時盡可能的考慮聚丙烯的塑料離心管。江蘇10K超濾離心管排行榜