質(zhì)量和重心都應該平衡。注意速度和加速度不要太快,否則會直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心預冷至4度〉。膜和旋轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說明進行調(diào)整(對于角向離心機,膜垂直于軸〉。在實際應用中,一般的速度開度比手動低,可以延長離心管的使用壽命。4。當濃縮到剩余的1毫升時,取中國產(chǎn)的504.1l布拉德福德溶液,加104 l流過,看是否變藍,以判斷ur管是否漏蛋白。如果管道泄漏,重新倒入上層,然后流過新管道開始超濾。為了準確確定管道是否泄漏,用5 mg/ml BSA離心10分鐘,然后將其穿過,大致運行膠水或Bradf ord,繼續(xù)添加剩余的蛋白質(zhì)溶液以濃縮(在冰上操作以防止蛋白質(zhì)加熱〉,直到所有濃縮物都添加完畢。離心過程中應注意是否有蛋白質(zhì)沉淀,導致堵塞。如果發(fā)生沉淀,有必要確定沉淀的具體原因是蛋白質(zhì)濃度過高還是緩沖液不當。使用超濾離心管時應注意遵循正確的操作程序和安全規(guī)定,以避免意外傷害或污染。上海3K超濾離心管能干什么
多肽超濾離心管,垂直設計和有效的膜表面積提供了快速的樣品處理,較高的樣品回收率(> 90% 的樣品回收率),以及 80~100 倍濃縮的能力。濃縮物使用吸液器從過濾裝置中收集,而超濾液則在提供的離心管中收集。超濾離心管是一種可以為蛋白質(zhì)樣本的濃縮和緩沖交換提供可靠準確結(jié)果的一次性超濾離心式過濾裝置,與層析、透析等方法相比,超濾對被處理的分子更加溫和,不需要有機萃取,不會導致蛋白變性,且簡單高效。規(guī)格超濾濃縮器可處理體積4mL 以內(nèi)的樣本,離心管內(nèi)包含一個內(nèi)置豎直的聚醚砜(PES)膜過濾裝置,聚醚砜膜具備低蛋白附著、高通量的特點,可應用在3KD、5KD、10KD、30KD、50KD、100KD 六種不同的截留分子量中。截留分子量標識和體積刻度蝕刻在濃縮器的側(cè)面便于識別。上海高離心力離心管排行榜超濾離心管可以去除混合物中的低分子量化合物,提高目標化合物的純度。
市場上常見離心管主要分為兩種:即:塑料離心管 和玻璃離心管,也有少數(shù)是鋼制離心管。使用玻璃管時離心力不宜過大,需要墊橡膠墊,防止管子破碎,高速離心機一般不選用玻璃管。離心管蓋子封閉性不夠好,液體就不能加滿(針對高速離心機且使用角轉(zhuǎn)子)以防外溢,失去平衡。外溢后果是污染轉(zhuǎn)子和離心腔,影響感應器正常工作。超速離心時,液體一定要加滿離心管,因為超離需要抽高真空,只有加滿才能避免離心管變形。而鋼制離心管強度大,不變形,能抗熱,抗凍,抗化學腐蝕,它的應用也是相當普遍但使用時同樣也應避免接觸強腐蝕性的化學藥品,如強酸、強堿等。盡量避免這些化學物質(zhì)的腐蝕。
超濾離心管使用方法和注意事項:1、選擇合適的超濾離心管,主要考慮MWCO和濃縮體積,通常應截留分子量不應大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾離心管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾離心管。2、新買來的超濾是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準。操作要輕,加入蛋白液前,超濾離心管需要插在冰上預冷。3、質(zhì)量和重心二者都要達到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機預冷至4度)。不同離心機的轉(zhuǎn)速rpm換算成g之后,有所不同。離心機的加速度調(diào)至低檔,減小對膜的壓力。注意,一定要等離心機達到目的轉(zhuǎn)速之后,方可離開離心機,否則離心機出問題時,無法*時間處理,后果不可預測!使用超濾離心管時應注意保持其平衡和穩(wěn)定,并調(diào)整旋轉(zhuǎn)參數(shù)以確保較佳效果。
實驗室常用的離心管有塑料的和玻璃的,一般塑料的用得較多,因為玻璃的離心管不能用在高速或者超速離心機上。塑料的離心管又有PC (聚碳酸酯)、PE (聚乙烯)、PP(聚丙烯)等材質(zhì)。PP的管子性能相對來說比較好。塑料的離心管透明或者半透明,可以直觀地看到樣品的離心情況,但是比較容易變形,抗有機溶劑的腐蝕性較差,所以使用壽命較短。因此,實驗室一般會經(jīng)常購買離心管。PC (聚碳酸酯):透明度較好,硬度大,可以高溫消毒,但不耐強酸強堿以及一些有機溶劑如酒精之類。主要用于5萬轉(zhuǎn)以上的超高速離心。PE(聚乙烯):不透明。和丙銅、醋酸、鹽酸等不反應,較為穩(wěn)定,高溫下容易變軟。PP(聚丙烯):半透明,化學及溫度穩(wěn)定性較好,但是在低溫下會變脆,所以在離心時不要在4℃以下。超濾離心管也可用于水處理過程中去除污染物和雜質(zhì)。上海3K超濾離心管能干什么
超濾離心管是一種經(jīng)濟、有效且環(huán)保的分離技術(shù),具有普遍應用前景。上海3K超濾離心管能干什么
脫鹽、更換緩沖液或滲濾是從含有生物分子的溶液中去除鹽分或溶劑的重要方法。鹽分去除或緩沖液更換可通過超濾管來完成,具體過程是濃縮樣本,棄去濾出液,然后向濃縮液中加入任何所需的溶劑,恢復到樣本原先的體積。"洗出"的過程可反復進行,直到雜質(zhì)的濃度被充分降低。關于超濾管的常見問題與解答:Q:超濾管的膜材質(zhì)是什么?A:超濾管的膜材質(zhì)為默克密理博特有的Ultracel再生纖維素膜,生產(chǎn)工藝嚴格,截留分子量明確而準, 蛋白吸附損失小。Q:如果要用超濾的方法分離兩種蛋白,那么這兩個蛋白的大小需要相差多少?A:按照經(jīng)驗,建議兩個蛋白的分子量要相差 一個數(shù)量級(10倍)。上海3K超濾離心管能干什么