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未經(jīng)檢疫的胎牛血清可能攜帶傳染性物質(zhì),一旦流入境內(nèi),將會(huì)對(duì)人民**的生命健康造成重大威脅,如可能帶有瘋牛病病毒、牛病毒性腹瀉病毒、牛細(xì)小病毒、狂犬病毒或其他傳染性物質(zhì),具有極高的檢疫風(fēng)險(xiǎn)。此外,不合格的血清對(duì)實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性、穩(wěn)定性和真實(shí)性也會(huì)造成嚴(yán)重影響。無合格質(zhì)檢的胎牛血清存在支原體、病毒等污染,這對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果會(huì)造成嚴(yán)重不良影響;工藝不規(guī)范導(dǎo)致溶血,溶血較嚴(yán)重的血清含有許多胞內(nèi)產(chǎn)物,對(duì)細(xì)胞有刺激作用,影響實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性和數(shù)據(jù)的真實(shí)性;血清批次不穩(wěn)定,實(shí)驗(yàn)結(jié)果難以重復(fù)。血清的主要作用是提供促接觸和生長(zhǎng)因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用。南京特級(jí)血清報(bào)價(jià)
胎牛血清的主要成分:蛋白質(zhì)類包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促進(jìn)細(xì)胞附著)、轉(zhuǎn)鐵蛋白(能結(jié)合鐵離子,減少其毒性和被細(xì)胞利用)、纖維粘連素(促進(jìn)細(xì)胞附著生長(zhǎng))等;多肽類,主要是一些促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂的生長(zhǎng)因子,較為主要的生長(zhǎng)因子是血小板生長(zhǎng)因子,還有成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)因子等,雖然在血清中含量很少,但對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和分裂也起著重要作用;類,對(duì)細(xì)胞的作用是多方面的。包括:胰島素:促進(jìn)細(xì)胞攝取葡萄糖和氨基酸,與促細(xì)胞分裂有關(guān);類胰島素生長(zhǎng)因子:能與細(xì)胞表達(dá)的胰島素受體結(jié)合,從而有胰島素同樣的作用:促生長(zhǎng):促進(jìn)細(xì)胞增殖的效應(yīng);氫化可的松:血清中含有微量該成分,它可能具有促細(xì)胞貼附和增殖作用。但有人證明,血清中 的氫化可的松,在細(xì)胞密度較高時(shí)可能有抑制細(xì)胞生長(zhǎng)和誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生分化的作用。黃山細(xì)胞培養(yǎng)用胎牛血清品牌胎牛血清的無菌檢驗(yàn):陰性;支原體檢驗(yàn): 陰性;細(xì)菌內(nèi)有毒的 ≤5(EU/ml)。
不同產(chǎn)地的胎牛血清,品質(zhì)也是相差甚遠(yuǎn)。值得注意的是,胎牛血清是動(dòng)物源生物制品,我國(guó)對(duì)于動(dòng)物源制品的進(jìn)口一直有很嚴(yán)格的規(guī)定,目前我國(guó)批準(zhǔn)進(jìn)口的胎牛血清來源是澳大利亞、新西蘭和烏拉圭,合法正規(guī)途徑進(jìn)口的胎牛血清必須在產(chǎn)品包裝上標(biāo)注血源地。這意味著,其他血源地的胎牛血清在我國(guó)是不允許進(jìn)口的,在選購(gòu)進(jìn)口產(chǎn)品時(shí),要規(guī)避選取來源為禁止輸入國(guó)家的相關(guān)產(chǎn)品。合法進(jìn)口的胎牛血清需符合我國(guó)海關(guān)和檢驗(yàn)檢疫部門的監(jiān)管要求,具備真實(shí)完整的進(jìn)口貨物報(bào)關(guān)單和出入境檢驗(yàn)檢疫入境貨物檢驗(yàn)檢疫證明。選購(gòu)胎牛血清時(shí),需要核對(duì)廠家是否能提供購(gòu)買批次的進(jìn)口報(bào)關(guān)單和檢驗(yàn)檢疫證書,烏拉圭來源的血清還必須具有出口許可證,確保產(chǎn)品來源安全可追溯。
除了對(duì)血清進(jìn)行檢測(cè),有何更直觀的方式分辨血清質(zhì)量?目測(cè)法,我們可根據(jù)血清的顏色,沉淀,澄清度等進(jìn)行區(qū)分。顏色:顏色根據(jù)血清蛋白含量的不同,可表現(xiàn)出黃色或者紅色。進(jìn)口血清質(zhì)量較為好的呈現(xiàn)出淡黃、微紅色,較差質(zhì)量呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。熱滅清或保存不當(dāng)?shù)?,由于血紅蛋白的破壞氧化,會(huì)呈現(xiàn)出暗紅色,甚至咖啡色。沉淀:血清中的沉淀主要是有纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生。沉淀產(chǎn)生的原因很多,使用時(shí)反復(fù)凍融會(huì)增加沉淀。進(jìn)口血清過濾分裝前很少反復(fù)凍融,因此成品清澈。澄清度:進(jìn)口血清是由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡。國(guó)產(chǎn)血清絕大多數(shù)為新生牛血清,相對(duì)而言更加粘稠,顏色略深。一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌,如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾。
血清的安全風(fēng)險(xiǎn)因素主要有以下方面:地理因素,地理因素包括血清產(chǎn)地的流行病學(xué)趨勢(shì)、基礎(chǔ)設(shè)施情況以及血源供應(yīng)量。措施得當(dāng)可以預(yù)防能避免的動(dòng)物疾病,同時(shí)產(chǎn)地國(guó)穩(wěn)定可靠的基礎(chǔ)設(shè)施,對(duì)保證供應(yīng)鏈的安全也十分必要。血源是否充足則決定了血清是否可源源不斷地持續(xù)供應(yīng)。生產(chǎn),生產(chǎn)遵循cGMP指南,則可保證血清質(zhì)量,降低有關(guān)無菌過濾、摻加和標(biāo)簽錯(cuò)誤的風(fēng)險(xiǎn)。cGMP為現(xiàn)場(chǎng)審核的開展提供了框架。生產(chǎn)過程中對(duì)血清進(jìn)行有效的無菌過濾也是十分重要的。產(chǎn)品質(zhì)控,有效的無菌過濾使得細(xì)菌污染的風(fēng)險(xiǎn)很低。對(duì)于支原體和病毒篩查,一些相關(guān)規(guī)范內(nèi)部存在一定的方法靈活性,這使得采取不同方法進(jìn)行支原體和病毒篩查成為可能,并且有時(shí)使得要篩查的病毒種類無需太多。有效輻照,要進(jìn)一步降低外源因子風(fēng)險(xiǎn),可對(duì)血清進(jìn)行輻照(25–40 kGy)。但輻照并不能保證病毒污染的完全去除。輻照過量會(huì)導(dǎo)致FBS效能下降。新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛。福州細(xì)胞培養(yǎng)用胎牛血清品牌
胎牛血清:性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。南京特級(jí)血清報(bào)價(jià)
熱滅活:一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清,因?yàn)榇思訜岵襟E,可以使補(bǔ)體去活化,而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性,平滑肌的收縮,肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放,增強(qiáng)吞噬作用,淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和。有必要做熱滅活嗎?實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅清,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),或完全沒有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)明顯的增多,這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀察,像是 "小黑點(diǎn)",常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。購(gòu)買的時(shí)候注意詢問廠家是否是已滅清。南京特級(jí)血清報(bào)價(jià)
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