細(xì)胞培養(yǎng)用胎牛血清

來源: 發(fā)布時間:2023-03-16

選購FBS應(yīng)考慮哪些標(biāo)準(zhǔn)?產(chǎn)品檢測,每款FBS在生產(chǎn)上市之前,必須經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)控檢測。質(zhì)控環(huán)節(jié)必不可少,以確保上市的血清符合規(guī)定合乎規(guī)格,而血清產(chǎn)品分析證書(COA)就是FBS質(zhì)控的重要體現(xiàn)。在COA中,常規(guī)的檢測指標(biāo)包括內(nèi)的毒性、總蛋白、細(xì)菌、病毒等,另外總蛋白為30-50mg/mL、血紅蛋白檢測不高于30mg/dL。質(zhì)量驗證我們使用FBS目的是為了讓細(xì)胞更真實、健康地生長。在確保了FBS的來源真實性、安全可靠性后,下一步就要對FBS的質(zhì)量,即培養(yǎng)細(xì)胞的效果進(jìn)行鑒定了,而這也是決定細(xì)胞能否養(yǎng)好的關(guān)鍵。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等。細(xì)胞培養(yǎng)用胎牛血清

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胎牛血清:胎牛血清(FBS),胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。1、性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。2、蛋白質(zhì)含量3.5%~5.0%(w/v)。3、血紅蛋白含量≤0.02%(w/v)。4、無菌檢驗陰性。5、支原體檢驗陰性。6、細(xì)菌內(nèi)的毒性≤5(EU/ml)。7、牛腹瀉病毒陰性。8、大腸桿菌噬菌體陰性。9、支持細(xì)胞增殖(Sp2/0-Ag14)生長曲線(接種濃度)較大增殖濃度≥2.5×106個/ml,細(xì)胞倍增時間≤15h克隆率≥85%。十堰不含外泌體血清供應(yīng)商胎牛血清常用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。

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如何區(qū)別真假胎牛血清:免疫球蛋白,國產(chǎn)血清的只是定性檢測,結(jié)果也很不準(zhǔn)確,進(jìn)口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數(shù)值能完全體現(xiàn)出時的牛齡情況,國產(chǎn)血清,基本都是新生牛的,血清中容易產(chǎn)生IgM,IgG的含量也偏高,進(jìn)口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。其它不管是國產(chǎn)還是進(jìn)口血清,都是不測Antibiotic的(無四環(huán)素胎牛血清之外)。國外,Antibiotic的使用很嚴(yán)格,用量也很少,每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含Antibiotic或含量極低;國內(nèi),Antibiotic的濫用已成了普遍現(xiàn)象,血清中殘留很高,對細(xì)胞培養(yǎng)極為不利,這是國產(chǎn)血清質(zhì)量差的根本原因。

胎牛血清有必要做熱滅活嗎?實驗證明,經(jīng)過正確處理的熱滅活胎牛血清,對于大多數(shù)的細(xì)胞而言都是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn),或完全沒有任何作用,甚至可能因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,從而造成細(xì)胞生長速率的降低。經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會明顯的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會使此類沉淀物增加得更多,這常常會使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。因此我們建議客戶,若非必須,可以不需要做熱處理這一步。如此一來,不但節(jié)省客戶寶貴的時間,更確保血清的質(zhì)量。胎牛血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。

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胎牛血清的主要成分有哪些?脂聯(lián)素,有人發(fā)現(xiàn),將牛脂聯(lián)素注射入C57小鼠,可降低循環(huán)血糖水平和在高脂飲食后提高脂肪清理率。持續(xù)注射牛脂聯(lián)素兩周后,胰島素敏感性和葡萄糖耐受性明顯增強,高脂喂養(yǎng)小鼠肝臟脂質(zhì)堆積減少。這些結(jié)果提供了直接的證據(jù)表明內(nèi)源性牛脂聯(lián)素是一種調(diào)節(jié)脂肪和葡萄糖代謝的生理Hormone。以上可以看到,胎牛血清提供的一些活性因子參與營養(yǎng)的運輸、促進(jìn)營養(yǎng)分子向細(xì)胞的轉(zhuǎn)運和利用,調(diào)節(jié)細(xì)胞的代謝和生理狀態(tài)??梢娞ヅQ逶诩?xì)胞環(huán)境中發(fā)揮著積極的作用,這是人工合成的基礎(chǔ)培養(yǎng)基所比擬不了的。FBS的常見處理方法是熱滅活,其中將FBS在56°C的水浴中加熱30分鐘,偶爾搖晃。蕪湖標(biāo)準(zhǔn)級胎牛血清哪里有賣

切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會破壞而影響血清質(zhì)量。細(xì)胞培養(yǎng)用胎牛血清

如何區(qū)別真假胎牛血清:外觀,拿到血清,較先接觸的是血清外觀,對于缺少細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗的人來說,外觀的判斷尤為重要,顏色根據(jù)血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,我國的細(xì)胞培養(yǎng)用血清標(biāo)準(zhǔn)是不高于20mg/dl,實際上,血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響,這個指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采的血過程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度,良好的操作能降低血清的溶血。國產(chǎn)血清的點很分散,大多是由屠戶采的血后馬上離心收集,所以很少會有溶血,表現(xiàn)出明亮的蠟黃色,當(dāng)然,國產(chǎn)血清也很少有標(biāo)準(zhǔn)意義上的胎牛血清。進(jìn)口胎牛血清或多或少總有點溶血,因為真正的胎牛血清凝血功能差,紅細(xì)胞容易破裂。總的來說,國產(chǎn)的血清呈現(xiàn)出蠟黃。進(jìn)口的血清,質(zhì)量較好的呈現(xiàn)出談黃、微紅色,差點的呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。當(dāng)然,熱滅活胎牛血清或保存不當(dāng)?shù)难?,由于血紅蛋白的破壞氧化,會呈現(xiàn)出暗紅,甚至咖啡色。細(xì)胞培養(yǎng)用胎牛血清

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