在細(xì)胞凋亡研究中,多種技術(shù)相輔相成。Annexin V - FITC/PI 雙染法是常用手段,Annexin V 對磷脂酰絲氨酸具有高度親和力,在細(xì)胞凋亡早期,磷脂酰絲氨酸從細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到外側(cè),Annexin V 與之結(jié)合,而 PI 可穿透死亡細(xì)胞的細(xì)胞膜,對細(xì)胞核進(jìn)行染色。通過流式細(xì)胞儀檢測,可區(qū)分正常細(xì)胞、早期凋亡細(xì)胞、晚期凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞。TUNEL 法即脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法,利用 TdT 酶將生物素或地高辛標(biāo)記的 dUTP 連接到凋亡細(xì)胞斷裂 DNA 的 3'-OH 末端,再通過顯色反應(yīng),在顯微鏡下觀察凋亡細(xì)胞。此外,Caspase 活性檢測也是關(guān)鍵,Caspase 家族在細(xì)胞凋亡過程中起重心作用,通過特定的熒光底物,檢測 Caspase 的活性變化,可判斷細(xì)胞凋亡進(jìn)程。細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)服務(wù)憑借先進(jìn)設(shè)備,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞成像的高分辨率觀察,洞察細(xì)胞細(xì)節(jié)。常州細(xì)胞增殖與毒性檢測服務(wù)哪家專業(yè)
細(xì)胞遷移與侵襲是眾多生理病理過程的重心驅(qū)動(dòng)力,相應(yīng)技術(shù)精細(xì)追蹤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)軌跡。Transwell 小室實(shí)驗(yàn)?zāi)M體內(nèi)組織屏障,通過觀察細(xì)胞穿過微孔膜的能力,區(qū)分遷移與侵襲特性,普遍用于瘤子轉(zhuǎn)移、胚胎發(fā)育研究。實(shí)時(shí)細(xì)胞成像系統(tǒng)搭配特制的微圖案化培養(yǎng)皿,能夠以高分辨率連續(xù)記錄細(xì)胞移動(dòng)路徑、速度、轉(zhuǎn)向等動(dòng)態(tài)參數(shù),結(jié)合圖像分析軟件量化細(xì)胞運(yùn)動(dòng)行為。在傷口愈合研究中,直觀呈現(xiàn)皮膚細(xì)胞向損傷部位的定向遷移過程,為加速愈合、防治疤提供策略;在瘤子學(xué)層面,揭示病細(xì)胞轉(zhuǎn)移路線,助力開發(fā)阻斷轉(zhuǎn)移的靶向療法。蘇州細(xì)胞劃痕檢測服務(wù)中心細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)服務(wù)在環(huán)境毒理學(xué)研究中,評估污染物對細(xì)胞的毒性效應(yīng)。
細(xì)胞分選技術(shù)在追求精細(xì)分離細(xì)胞的道路上不斷進(jìn)階。傳統(tǒng)流式細(xì)胞術(shù)憑借細(xì)胞表面標(biāo)志物的熒光標(biāo)記分選細(xì)胞,如今隨著多色熒光標(biāo)記、高速數(shù)字化信號(hào)處理技術(shù)發(fā)展,分選精度和速度大幅提升,能在復(fù)雜細(xì)胞群體中瞬間識(shí)別并分離出目標(biāo)細(xì)胞亞群,廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)、干細(xì)胞研究。新興的微流控芯片分選技術(shù)則以微型化、集成化優(yōu)勢嶄露頭角,利用芯片內(nèi)特殊設(shè)計(jì)的微結(jié)構(gòu)和流體動(dòng)力學(xué)原理,無需標(biāo)記即可根據(jù)細(xì)胞大小、形狀、密度等物理特性實(shí)現(xiàn)分選,降低對細(xì)胞活性的影響,在單細(xì)胞測序樣本制備、稀有細(xì)胞分離等前沿領(lǐng)域大顯身手,為細(xì)胞研究提供高純度、高質(zhì)量的細(xì)胞樣本。
細(xì)胞遷移與侵襲能力的研究對瘤子轉(zhuǎn)移、組織修復(fù)等領(lǐng)域意義重大。劃痕實(shí)驗(yàn)是簡單直觀的方法,在細(xì)胞單層上制造劃痕,觀察細(xì)胞向劃痕區(qū)域遷移的情況,通過顯微鏡拍照記錄不同時(shí)間點(diǎn)的細(xì)胞遷移距離,進(jìn)行量化分析。Transwell 實(shí)驗(yàn)則更為精確,上室加入細(xì)胞,下室加入含有趨化因子的培養(yǎng)液,細(xì)胞會(huì)向趨化因子濃度高的方向遷移。對于侵襲實(shí)驗(yàn),還需在 Transwell 小室的聚碳酸酯膜上鋪上一層基質(zhì)膠,模擬體內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì),檢測細(xì)胞穿過基質(zhì)膠和聚碳酸酯膜的能力。實(shí)時(shí)細(xì)胞分析技術(shù)(RTCA)利用微電極傳感器實(shí)時(shí)監(jiān)測細(xì)胞遷移過程中電阻抗的變化,可動(dòng)態(tài)、定量地分析細(xì)胞遷移和侵襲行為。細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)服務(wù)采用基因編輯技術(shù),構(gòu)建細(xì)胞疾病模型,模擬疾病發(fā)生過程。
以細(xì)胞培養(yǎng)為例,首先要獲取合適的細(xì)胞來源,如從組織中分離原代細(xì)胞或使用已建立的細(xì)胞系。對獲取的細(xì)胞進(jìn)行復(fù)蘇(若為凍存細(xì)胞),將其接種到含有適宜培養(yǎng)液的培養(yǎng)器皿中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)過程中,需定期觀察細(xì)胞的生長狀態(tài),根據(jù)細(xì)胞密度進(jìn)行傳代培養(yǎng)。當(dāng)需要進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染時(shí),先將外源核酸與轉(zhuǎn)染試劑混合形成復(fù)合物,然后加入到培養(yǎng)的細(xì)胞中,孵育一定時(shí)間,使復(fù)合物進(jìn)入細(xì)胞。對于熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn),先將熒光探針與目標(biāo)分子結(jié)合,再將其加入細(xì)胞培養(yǎng)液中,待標(biāo)記完成后,在熒光顯微鏡下進(jìn)行觀察和成像。每個(gè)實(shí)驗(yàn)流程都需嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作原則,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)服務(wù)助力制藥企業(yè),高效篩選藥物靶點(diǎn),加速新藥研發(fā)進(jìn)程。細(xì)胞劃痕檢測服務(wù)方案
細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)服務(wù)開展細(xì)胞自噬檢測服務(wù),探索細(xì)胞內(nèi)自我清潔機(jī)制。常州細(xì)胞增殖與毒性檢測服務(wù)哪家專業(yè)
細(xì)胞基因編輯技術(shù)仿佛神奇的 “基因剪刀”,能夠改寫細(xì)胞的遺傳密碼。CRISPR - Cas9 技術(shù)是當(dāng)下較耀眼的明星,它精細(xì)定位目標(biāo)基因,切割 DNA 雙鏈,實(shí)現(xiàn)基因敲除、插入或替換。在遺傳疾病醫(yī)療領(lǐng)域,針對鐮刀型細(xì)胞貧血癥等單基因遺傳病,將糾正后的正?;?qū)牖颊咴煅杉?xì)胞,利用基因編輯技術(shù)修復(fù)突變位點(diǎn),再回輸體內(nèi),有望從根源上醫(yī)療疾病。在作物育種方面,編輯農(nóng)作物基因,增強(qiáng)抗病蟲害、耐旱澇等優(yōu)良性狀,提高糧食產(chǎn)量,保障全球糧食安全,為人類生活帶來諸多福祉。常州細(xì)胞增殖與毒性檢測服務(wù)哪家專業(yè)