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細(xì)胞融合技術(shù)可獲得具有雙親細(xì)胞遺傳特性的雜交細(xì)胞?;瘜W(xué)融合法常用聚乙二醇(PEG),PEG 能改變細(xì)胞膜脂質(zhì)分子的排列,在去除 PEG 后,細(xì)胞膜恢復(fù)原有的有序結(jié)構(gòu),促使細(xì)胞融合。電融合法是將細(xì)胞置于交變電場(chǎng)中,使細(xì)胞聚集排列成串,然后施加高壓電脈沖,破壞細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu),導(dǎo)致細(xì)胞融合。此外,還有利用滅活病毒介導(dǎo)的生物融合法,如仙臺(tái)病毒,病毒表面的糖蛋白可與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合,使相鄰細(xì)胞的細(xì)胞膜連接,進(jìn)而融合。細(xì)胞融合技術(shù)在單克隆抗體的制備、植物體細(xì)胞雜交培育新品種、動(dòng)物克隆等方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)服務(wù)運(yùn)用基因轉(zhuǎn)導(dǎo)技術(shù),實(shí)現(xiàn)外源基因在細(xì)胞中的穩(wěn)定表達(dá)。杭州高效干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化服務(wù)應(yīng)用
在細(xì)胞凋亡研究中,多種技術(shù)相輔相成。Annexin V - FITC/PI 雙染法是常用手段,Annexin V 對(duì)磷脂酰絲氨酸具有高度親和力,在細(xì)胞凋亡早期,磷脂酰絲氨酸從細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到外側(cè),Annexin V 與之結(jié)合,而 PI 可穿透死亡細(xì)胞的細(xì)胞膜,對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行染色。通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè),可區(qū)分正常細(xì)胞、早期凋亡細(xì)胞、晚期凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞。TUNEL 法即脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法,利用 TdT 酶將生物素或地高辛標(biāo)記的 dUTP 連接到凋亡細(xì)胞斷裂 DNA 的 3'-OH 末端,再通過(guò)顯色反應(yīng),在顯微鏡下觀察凋亡細(xì)胞。此外,Caspase 活性檢測(cè)也是關(guān)鍵,Caspase 家族在細(xì)胞凋亡過(guò)程中起重心作用,通過(guò)特定的熒光底物,檢測(cè) Caspase 的活性變化,可判斷細(xì)胞凋亡進(jìn)程。無(wú)錫高效細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)服務(wù)中心科研人員依賴(lài)細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)服務(wù),開(kāi)展基因編輯細(xì)胞系構(gòu)建,研究基因功能。
細(xì)胞表面受體如同細(xì)胞的 “順風(fēng)耳” 與 “傳聲筒”,掌控著細(xì)胞對(duì)外界信號(hào)的接收與傳遞,相關(guān)研究技術(shù)致力于解鎖這一通訊密碼。放射性配體結(jié)合測(cè)定法,利用放射性標(biāo)記的配體與細(xì)胞表面受體特異性結(jié)合,精確測(cè)量受體的數(shù)量、親和力及結(jié)合動(dòng)力學(xué)參數(shù),探究受體功能特性。在神經(jīng)科學(xué)研究中,通過(guò)該技術(shù)研究神經(jīng)遞質(zhì)受體,闡釋神經(jīng)元興奮與抑制的調(diào)控機(jī)制,為醫(yī)療神經(jīng)系統(tǒng)疾病,如癲癇、抑郁癥等提供理論支撐。熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)(FRET)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)受體與配體結(jié)合、激發(fā)后的構(gòu)象變化,直觀展現(xiàn)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的起始瞬間,揭示細(xì)胞通訊的精細(xì)過(guò)程。
細(xì)胞基因編輯技術(shù)仿佛神奇的 “基因剪刀”,能夠改寫(xiě)細(xì)胞的遺傳密碼。CRISPR - Cas9 技術(shù)是當(dāng)下較耀眼的明星,它精細(xì)定位目標(biāo)基因,切割 DNA 雙鏈,實(shí)現(xiàn)基因敲除、插入或替換。在遺傳疾病醫(yī)療領(lǐng)域,針對(duì)鐮刀型細(xì)胞貧血癥等單基因遺傳病,將糾正后的正常基因?qū)牖颊咴煅杉?xì)胞,利用基因編輯技術(shù)修復(fù)突變位點(diǎn),再回輸體內(nèi),有望從根源上醫(yī)療疾病。在作物育種方面,編輯農(nóng)作物基因,增強(qiáng)抗病蟲(chóng)害、耐旱澇等優(yōu)良性狀,提高糧食產(chǎn)量,保障全球糧食安全,為人類(lèi)生活帶來(lái)諸多福祉。高校實(shí)驗(yàn)室通過(guò)細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)服務(wù),開(kāi)展干細(xì)胞分化研究,為再生醫(yī)學(xué)奠基。
細(xì)胞分泌組承載著細(xì)胞間通訊的重要 “語(yǔ)言”,其分析技術(shù)日益成熟。利用超濾、超速離心等方法富集細(xì)胞培養(yǎng)上清中的分泌蛋白,再結(jié)合高靈敏度的質(zhì)譜分析,可鑒定出成百上千種分泌蛋白及其修飾形式。在免疫調(diào)節(jié)研究中,剖析免疫細(xì)胞分泌組,挖掘如白細(xì)胞介素、干擾素等關(guān)鍵細(xì)胞因子,闡釋機(jī)體免疫應(yīng)答啟動(dòng)與調(diào)控機(jī)制。于神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域,追蹤神經(jīng)元分泌的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子等,探究神經(jīng)發(fā)育、修復(fù)進(jìn)程。這一技術(shù)架起細(xì)胞微觀分泌與宏觀生理功能間的橋梁,助力解讀復(fù)雜生命活動(dòng)中的細(xì)胞協(xié)作奧秘。細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)服務(wù)提供細(xì)胞外泌體分離與鑒定服務(wù),探索細(xì)胞間通訊新途徑。福州簡(jiǎn)單細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)服務(wù)中心
細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)服務(wù)助力免疫細(xì)胞研究,解析免疫細(xì)胞活化與調(diào)控機(jī)制。杭州高效干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化服務(wù)應(yīng)用
細(xì)胞凋亡檢測(cè)對(duì)于了解細(xì)胞的死亡機(jī)制和疾病發(fā)長(zhǎng)頭發(fā)展過(guò)程至關(guān)重要。常見(jiàn)的檢測(cè)方法包括 Annexin V - PI 雙染法、TUNEL 法等。技術(shù)人員會(huì)對(duì)處理后的細(xì)胞進(jìn)行染色,通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)或熒光顯微鏡觀察細(xì)胞凋亡的情況。例如在藥物研發(fā)中,檢測(cè)藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用,判斷藥物的療效和作用機(jī)制。他們嚴(yán)格按照操作流程進(jìn)行樣本制備和檢測(cè),準(zhǔn)確區(qū)分早期凋亡細(xì)胞、晚期凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞,為藥物研發(fā)、瘤子學(xué)等領(lǐng)域提供關(guān)鍵的細(xì)胞凋亡數(shù)據(jù),有助于篩選出更有效的醫(yī)療藥物和方案。杭州高效干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化服務(wù)應(yīng)用